June 3rd, 2013
Fareler Can Yüzmek, ancak birçok suşları bu etkinlik stresli bulmak için görünür. Sığ sudan kaçış davranışı motive etmek için kullanıldığı bu sorunu labirentine icat edilmiştir üstesinden gelmek için. Bu en azından geleneksel ve yaygın olarak kullanılan Morris su labirenti kadar iyi öğrenmeyi desteklemek için gösterilmiştir.
Bu prosedürün amacı, su labirentinin varyasyonlarını kullanarak farelerde uzamsal bilişi incelemektir. Diğer modellerden farklı olarak, su seviyesi farenin kürek çekmesine izin verecek kadar sığdır. Yüzmek yerine, Mae'nin ortasına bir fare yerleştirilir ve çıkışı aramasına izin verilir.
Çocuk havuzunun çıkışları, daha doğal bir kaçış tepkisini taklit etmek için yanlarda yer almaktadır. Doğru çıkış bulunduktan sonra, hayvan çıkarılır ve uzamsal bilişsel yeteneği temsil eden veriler kaydedilir. Çocuk havuzunun veya kürek çekme labirentinin uzamsal bilişi test etmek için mevcut tekniklere göre ana avantajı, örneğin, maus su labirenti veya ahır labirenti gibi, kesinlikle mo labirentinden çok daha az stresli olması ve ahırlarda olduğu gibi kafa karıştırıcı yerel veya fabrika ipuçları almamanızdır. Labirent.
Çocuk havuzu işaretinden art arda üç tasarım yapıldı. Biri, 85 santimetre çapında, 12 gerçek veya kuvvet çıkışı olan dairesel bir havuzdur. Mark iki, 86 santimetre çapında, köşelerde sekiz gerçek veya kuvvet çıkışı bulunan sekizgen bir havuzdur.
Son olarak, üçüncü işaret, 120 santimetre çapında, köşelerde ayarlanmış 12 gerçek veya kuvvet çıkışı olan bir do deck agonal havuzudur. Her tasarım beyaz bir taban üzerine inşa edilmiştir ve şeffaf akrilik plastikten yapılmış şeffaf duvarlarla çevrilidir. Havuz, bazen bir fare daha derin bir havuza sokulduğunda bulunan yüzme stresini azaltmak için 20 ila 25 santigrat derece su ile doldurulur.
Kürek çekme davranışını teşvik etmek için su seviyesi yaklaşık iki santimetre derinliğe ayarlanmıştır. Daha doğal bir kaçış tepkisini kolaylaştırmak için, hayvanın, aparatın yan tarafına yerleştirilmiş siyah plastik borudan yapılmış kuru bir tüpe kaçmasına izin verilir. Sahte çıkışlar siyah ahşap bir tapa ile kapatılırken, gerçek çıkış açıktır ve ek bir boruya birleştirilir.
Gerçek çıkışa girdikten sonra, fare bu borunun içindeyken hızlı ve dramatik bir şekilde ev kafesine geri dönebilir. Tüm uzamsal bellek testlerinde olduğu gibi, fare, aparatın şeffaf duvarlarından görülen oda ipuçlarına güvenir. Raflar, dolaplar ve siyah plastik şekiller, ayırt edici görsel ipuçları olarak hizmet etmek için duvarlara yerleştirilmelidir.
Denemeye başlamak için, bir fareyi havuzun ortasına, çevredeki dört konumdan birine, dokuz 12 veya saat üç konumuna bakacak şekilde yerleştirin. Kaçış borusu saat altıdaysa, hayvanı yavaşça serbest bırakmak yerine, suyun hemen üzerindeyken hızlı bir şekilde serbest bırakın, bu onların mücadele etmesine ve ilk yönelimlerini bozmasına neden olabilir. Fare 60 saniye kaçamazsa, onları manuel olarak çıkışa yönlendirin.
Şeffaf Perspex kanatçıkları kullanarak. Çıkışı ve hataları bulmak için zamanı kaydedin. Hatalar, bir tüpten bir kafa boyu kadar yaklaşmak veya giriş yapmadan gerçek çıkışın yakınından geçmek olarak tanımlanır.
Kafanın tamamı tüpe girdiğinde zamanlayıcı durdurulur. Her fare için 10 deneme yapılır ve denemeler arasında beş dakikalık bir dinlenme süresi vardır. Daha sonra, çocuk havuzu modeli Y labirentine uygulandı.
Cihaz, her biri 30 x sekiz x 20 santimetre olan şeffaf plastikten yapılmış üç koldan oluşur. Bu beyaz bir tabana monte edilir ve sığ su ile doldurulur. Yine. Sadece bir gerçek çıkış vardır ve diğer iki kol yanlış çıkışlarla sonlanır.
Kürek çekme ve labirentte bir deneme başlatmak için, kapalı kollardan birinin ucuna, merkezden uzağa bakacak şekilde bir fare yerleştirin. Fare 60 saniye içinde çıkamazsa, onları manuel olarak çıkışa yönlendirin. Clear Perspex kürekleri kullanarak, toplam çıkış süresinin ve hata sayısının ölçümlerini alın, kürek çekme y labirent susuz kullanılabilir.
Uzamsal yenilik hafızasını test etmek için, Y labirentinin zeminine ince bir ağaç yongası yatak tabakası yerleştirerek başlayın. Koku alma ortamını zenginleştirmek için, deney başlamadan önce bir veya iki deneysel olmayan farenin labirenti birkaç dakika keşfetmesine izin verin. Daha sonra talaşı karıştırarak koku alma ipuçlarını çıkarın.
Bu, bir sonraki farenin uzamsal ipuçlarına güvenmek zorunda kalmasını sağlamaya yardımcı olur. Çıkış kolunun ucundaki çıkış deliğini kapatmak için şeffaf bir giyotin kapı ve kolu diğer ikisinden ayırmak için opak bir giyotin kapı yerleştirin. Testin ilk aşamasında, fareyi başlangıç koluna yerleştirin ve özgürce keşfetmesine izin verin.
Her bir charm'da giriş sayısını ve harcanan zamanları kaydedin. Fare beş dakika boyunca keşfedildikten sonra, hayvanı çıkarın ve üç kola da serbest erişim sağlamak için opak kapıyı kaldırın. Fareyi başlangıç koluna yeniden yerleştirin ve iki dakika boyunca gözlemleyin.
Giriş sayısını ve her bir kolda geçirilen süreyi not edin. Kontrol. Fareler ilk iki kolu hatırlamalı ve daha fazla zaman geçirmelidir. Daha önce erişilemeyen yeni kolda, hipokampal lezyonlar çocuk havuzunda öğrenmeyi büyük ölçüde bozar.
Bu örnekte, kuru labirentteki performans, glutamat reseptörünün devre dışı bırakılması olan farelerde uzamsal yenilik hafızasındaki bozuklukları ortaya çıkardı. Bir AMPA reseptörü alt birimleri. Morris su labirentindeki yol uzunluğu ve kaçış süresi ölçümlerinin aksine, hipokampal lezyonlu fareler için çocuk havuzundaki hata oranı eğitim süresi boyunca sabit kaldı.
Dolayısıyla bu, kaçış süresi veya yol uzunluğunun aksine, saf bir uzamsal bellek ölçüsünü temsil eder, bu da farelerin görevin uzamsal olmayan öğeleriyle tanışmasını azaltır. Hata ölçümü ayrıca bozulmuş fareler ve kontroller arasında daha büyük bir fark sağlar. Çocuk havuzu veya Y MA testlerini denerken, her zaman aynı pozisyonda oturmayı hatırlamak önemlidir çünkü deneyler kendi başlarına uzamsal bir ipucu görevi görür.
Bir keresinde Avrupa Moleküler Biyoloji Organizasyonu EMBO'dan iki asil ödül sahibi de dahil olmak üzere ziyaretçilerimiz vardı ve onların orada bulunması farelerin performansını bozdu. Bu nedenle, çocuk havuzuna başlamadan önce, lütfen yakın çevredeki tüm Nobel Ödüllüleri uzaklaştırın.
Bu çalışma, geleneksel su labirentlerine kıyasla stresi azaltmak için tasarlanmış yeni bir yüzme havuzu labirenti kullanarak farelerde uzamsal biliş araştırmaktadır. Sığ su, farelerin daha doğal bir kaçış tepkisi ile uzamsal bilişsel yeteneklerini değerlendirirken yüzmelerine olanak tanır.
Assessing spatial cognition in rodent models is critical for target validation in neuroscience drug discovery, yet traditional water maze paradigms induce stress that confounds cognitive readouts. The shallow-water paddling maze variant reduces aversive stimuli while preserving spatial learning measurement, offering a refinement-aligned approach that improves assay reliability and translational predictivity. This supports mechanistic de-risking of hippocampal-targeted compounds by isolating spatial memory performance from swim-stress artifacts.
This method fits within the discovery biology phase, where behavioral assays inform target hypothesis testing prior to lead identification, particularly for CNS programs focused on memory disorders.