Tanı Laboratuvarı Sıçanlar ve Fareler Ecto-Endoparasites

Bu prosedürün genel amacı, laboratuvar farelerinde veya farelerde parazitlerin bulunup bulunmadığını belirlemektir. Bu, kürk ve derinin incelenmesi, dışkı muayenesi ve bağırsak içeriğinin incelenmesi dahil olmak üzere çeşitli şekillerde gerçekleştirilebilir. Sonuç olarak, bu örneklerin rutin muayenesi ile koloninin genel sağlığı hakkında önemli bilgiler veren sonuçlar elde edilebilir.

Bu yöntemlerin görsel olarak gösterilmesi, sanki kapsamlı ve dikkatli bir şekilde gerçekleştirilmiyormuş gibi çok önemlidir. Paraziter bir enfeksiyon gözden kaçabilir. Genel olarak, bu yöntemlere yeni olan kişiler mücadele edecektir, çünkü teknikler doğru bir şekilde uygulansa bile parazitler yanlış tanımlanabilir.

Göstereceğimiz yöntemler, kürk ve perianal örnekler almadan önce araştırmanız için kullanılan sıçanların ve farelerin sağlık durumu hakkındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Mineral yağ damlaları ile hayvan başına en az iki cam slayt hazırlayın. İlgilendiğiniz fareyi kafesinden kaldırın ve devrilmiş kafes kapağının iç kısmına yerleştirin.

Kuyruğundan tutmak. Farenin, perine ve perianal bölgesine beş santimetre uzunluğunda bir selofan bant uygulayın. Başarılı olursa, banda yapışmış saçlar olmalıdır.

Hayvanı dizginlemeye devam edin ve kürkünü forseps ile kavrayın. Kürek kemiği bölgesinden, ventral servikal bölgeden, aksiller bölgeden, kasık bölgesinden ve sırt kıçından kürk örneklerini nazikçe koparın. Bu örnekleri beş santimetre uzunluğunda selofan bant üzerine yerleştirin.

Her numune alınırken, bandı yapışkan tarafı aşağı bakacak şekilde kayar bir şekilde uygulayın. Tüm numuneler alındıktan sonra, her numunenin üzerine bir damla daha mineral yağ sürün ve cam örtü fişleri uygulayın. Perianal slaytlar incelendiğinde, si facia dışında herhangi bir parazitin yumurtasının bulunması olası değildir.

Dışkı muayenesi için, her hayvandan veya kafesten iki ila beş pelet toplayın. Numuneler aşırı kuruysa, 500 mikrolitre% 0.9 tuzlu su ile nemlendirin. Numuneleri 10 mililitrelik bir hap şişesine veya dışkı yüzdürme cihazına yerleştirin.

Toplama şişesini Petri kabına yerleştirin ve şişeyi dörtte biri yoğun yüzdürme ortamıyla doldurun. Daha sonra dışkıyı ezin ve büyük parçalar kalmayana kadar şişedeki çözeltiye karıştırın. Şişenin kenarının üzerinde bir menisküs oluşana kadar yüzdürme ortamı eklemeye devam edin.

Daha sonra kapak fişini menisküsün üzerine yerleştirin ve şişeyi oda sıcaklığında 15 dakika inkübe edin. Kuluçka sırasında parazit, yumurtalar ve proteazom ve vaha yükselir ve kapak kızağına yapışır, bu daha sonra daha fazla inceleme için bir slayta monte edilir. Bu tahlil, bir hap şişesi kadar basit bir şeyde gerçekleştirilebilir.

Feizer mevcut değilse, hayvan başına iki ila 10 dışkı peleti toplayarak başlayın ve kurutulursa bunları 500 mikrolitre, %0.9 tuzlu su içinde rehidrate edin. 15 mililitrelik bir cam santrifüj tüpünü, dörtte biri yoğun bir yüzdürme çözeltisiyle dolu olacak şekilde doldurun ve numuneyi karıştırın. Cam tüpü plastik bir çıtçıtlı kapakla kapatın ve karışımı homojen bir görünüm elde edene kadar 15 ila 30 saniye boyunca girdaplayın.

Şimdi, her numune tüpüne ek yüzdürme çözeltisi ekleyin. Hafif bir pozitif menisküs oluşturmak için. Her tüpe plastik bir kapak fişi uygulayın ve tüp blipi ile tam temas ettiğinden emin olun.

En iyi sızdırmazlık için tüpü bir çubukla temizleyin. Bir sonraki santrifüj, tüpler ve kapak, dönüşten sonra 10 dakika boyunca kayar. Herhangi bir kapak fişi kaybolur veya kırılırsa, bunları değiştirin ve menisküs yeni kapak fişine değecek şekilde tüpleri hafifçe eğin.

Ardından tüm kapak fişlerini çıkarın ve etiketli temiz bir cam mikroskop lamına yerleştirin. Bir iyot lekesi, anestezi uygulanmış veya ötenazi yapılmış bir hayvandaki kistlerin tanımlanmasına yardımcı olacaktır. Sırt kılı tabakasını, kuyruğun tabanına ve başın temporal bölgesine yakın bir yerde veya kazınacak herhangi bir cilt lezyonunun veya başka bir bölgenin etrafında, saç büyümesinin tersi yönde derinden kazıyın, kafa derisi bıçağıyla cildi kazıyın.

Bu epidermisi aşındırır. Bıçağı, etiketli bir slayta uygulanan mineral yağda silin. Gerekirse bir damla daha yağ ekleyin.

Numuneyi bir cam örtü kayma ile kaplamadan önce, ötenazi yapılmış bir hayvanı temiz bir diseksiyon tahtasına yerleştirin ve genital bölgedeki karın duvarını kaldırmak için forseps kullanın. Daha sonra makas kullanarak ventral karın duvarını genital bölgeden göğüs kafesinin tabanına kadar dikkatlice kesin ve bağırsakları açığa çıkarmak için cildi ve kası çıkarın. Daha sonra secum ve duodenumun bir kısmını bir Petri kabının kapağına alın.

Her bağırsak segmentini uzunlamasına kesin. Mukozayı açığa çıkarmak için, etiketli tek bir slayta iki damla% 0.9 salin koyun. Daha sonra sterilize edilmiş bir aşılama halkası kullanarak, mukozayı, duodenumu kazıyın ve kazıntıları bir damla tuzlu su içine yerleştirin.

İşlemi tekrarlayın, bir numuneyi çekumdan diğer damlaya aktarın. Kalan bağırsakları çıkarın. Duodenumdan başlayın ve inen kolona devam edin.

Bağırsakları Petri kabındaki 100 mililitrelik bir Petri kabının dibine aktarın. Bağırsakları daha küçük bölümlere ayırmak için makas kullanın. Toplanan dokuyu zar zor batırmak için tabağa yeterince musluk suyu ekleyin.

Numune karışımını 35 ila 40 santigrat derecede en az 10 dakika inkübe edin. Bu, yumuşatılmış bağırsak numunesi inkübe edilirken luminal kaskları serbest bırakacak ve açığa çıkaracaktır. Parazitler için duodenum ve SQL örneklerini incelemek için yüz kontrast mikroskobu kullanın.

Tam bağırsak örneğinin inkübasyonu tamamlandıktan sonra, çanak içeriğini diseksiyon mikroskobu altında inceleyin. Bir prob kullanarak kapsamlı bir inceleme yapın. Kıl kurtları küçük beyaz tüy benzeri solucanlar olarak görünecektir.

Tenyalar, parçalı yassı kurtlar olarak görünecektir. Küçük bir forseps ile herhangi bir solucan veya şüpheli malzeme toplayın ve bir slayta monte edin. Işık mikroskobu altında daha fazla inceleme için, ötenazi yapılmış fareyi veya sıçanı doğrudan 10 x objektif altındaki bir diseksiyon mikroskobunun sahnesine yerleştirin, saçı ayırmak için bir aplikatör çubuğu kullanın ve saç tellerinin tabanını gözlemleyin.

Ektoparazitler, bir saç telinin tabanında veya doğrudan cilt üzerinde kepek veya sarı mumsu bir birikim gibi görünebilir. En azından kraniyal bölgedeki ektoparazitleri araştırın. Kasık ve aksiller bölgeler.

Gözler ile kuruş arasında, kuruş arasında, kürek kemiği arasında ve çenenin altında dikkatlice kontrol edin. Küçük forseps kullanarak. Olası ektoparazitleri ve diğer şüpheli materyalleri bir slayta aktarın.

Tanımlama için bunları mineral yağa monte edin. Bu prosedürler birçok yaygın parazit bulacaktır. İşte birkaç örnek.

Bunlar perineal bant örneklerinden bulunan SE fasya yumurtalarıdır. Bir dışkı santrifüj preparatından akar miyopi musculi'yi içeren bir kürk tıkacı bulundu. Bunlar picis tetter yumurtalarıdır.

Bağırsak mukozasının bu doğrudan muayenesinde, bir trioni görülebilir Masere edilmiş bağırsakların muayenesi ortaya çıktı Bu yetişkin kıl kurtları Bir kez ustalaştıktan sonra, parazitler için bu tam inceleme bir saatten az sürebilir. Bu videoyu izledikten sonra, sıçanlarda ve farelerde parazitler için çeşitli muayenelerin nasıl yapıldığını iyi anlamalısınız. Bu parazitlerin bir kısmının insanlara bulaşabileceğini unutmayın.

Her zaman temel laboratuvar güvenlik kurallarına uyun.