Fibrin pıhtı oluşumunu izlemek için UV görünür spektroskopi

Bir yaraya yanıt olarak, bir dizi enzimatik reaksiyon, kan damarlarını kapatan ve aşırı kan kaybını önleyen çözünmeyen bir protein ağının (bir fibrin pıhtısı) oluşumunu başlatır.

Fibrin pıhtı oluşumunu in vitro olarak izlemek için, bir pıhtı oluşumu tamponu içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın. Tampon, bir kofaktör olan kalsiyum iyonlarını ve pıhtılaşma için gerekli olan çözünür glikoproteinler olan fibrinojenleri içerir.

Kuyuyu, reaksiyonu başlatan proteolitik bir enzim olan trombinlerle tedavi edin.

Plakayı UV görünür bir spektrofotometreye yerleştirin. Kuyuyu 350 nanometre dalga boyuna sahip ışıkla aydınlatın ve çözeltinin emilimini düzenli aralıklarla kaydedin.

Başlangıçta, gelen ışık, çözünür fibrinojenler içeren berrak çözeltiden geçer ve minimum ışık emilimi ve maksimum geçirgenlik gösterir. Dedektör, iletilen ışığı toplar ve çözeltinin bulanıklığı ile ilişkili olarak zamana karşı absorbansı gösteren spektrumlar üretir.

Zamanla, kalsiyum iyonlarının varlığında, trombin fibrinleri serbest bırakmak için çözünür fibrinojenleri parçalar. Bu çözünmeyen fibrinler, çözeltiyi bulanık hale getiren üç boyutlu bir fibrin ağı - bir pıhtı - oluşturmak için etkileşime girer. Fibrin pı