Name: Meme Kanseri Beyin metastaz tümör Hipoksi Dynamics in vivo Biyoparlaklık Görüntüleme Fare Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-10-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 2 s
Description: Keşfedin meme kanseri beyin metastazlarında tümör hipoksi dinamiklerini fare modelinde biyoparlaklık görüntüleme ile invaziv olmayan şekilde izleme yöntemini. Bu teknik kanser tedavisi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışmada, DOD Meme Kanseri IDEA Ödülü kısmen desteklenen W81XWH-08-1-0583 ve NIH / NCI CA141348-01A1 (DZ) ve FAMRI klinik bilim adamı ödülü (DS). Görüntüleme altyapı U24 CA126608 ve Simmons Kanser Merkezi (P30 CA142543) ve NIH 1S10RR024757-01 tarafından kısmen desteklenen Uluslararası Küçük Hayvan Görüntüleme Araştırma Programı tarafından sağlanmaktadır.

Bütün hayvan prosedürleri Teksas Üniversitesi Güneybatı Tıp Merkezi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi. 1 in vitro HIF-1α biyoparlaklık tahlil <ol><li> Gereç ve Yöntem: <ul><li> İnsan metastatik meme kanserli hücre hattı MDA-MB231, HIF-1-bağımlı bir roman muhabiri geni ile transfekte, 5HRE-ODD-luc Dr. Harada tarafından üretildi. </li><li> Hipoksik durum, gelişmiş, oksijen bağımlı bozulması etki alanı (ODD) Lusiferaz füzyon proteini ifade hipoksi-yanıt elemanı 5 kopyaya (5HRE) tarafından tahrik edilir. ODD varlığı normoksik koşullarında son derece düşük arka plan luciferase aktivitesi ile sonuçlanan ODD-Luc protein bozulmasına neden olur. Bu nedenle, bu yeni sistem, gerçek zamanlı görüntüleme ile bir tümör hipoksik bölgeleri tespit etmek için kullanılabilir. Harada ve ark 1,2 ile inşaat 5HRE-ODD-luc ifade vektör bildirilmiştir. </li></ul></li><li> Kültür normoxia veya hipoksi altında hücreleri: <ul><li> % 10 fetal sığır serumu (FBS)-DMEM orta% 1 glutamin, 400 mikrogram / ml G418 antibiyotik ve% 1 penisilin / streptomisin içeren rekombinant MDA-MB231 hücreleri koruyun. </li><li> In vitro HIF-1α biyoparlaklık deneyi, plaka 3 x 10 5HRE-ODD-luc vektör her iki altı iyi yemeğin iyi ifade 5 MDA-MB231 hücreleri. </li><li> Normoksik durum (% 21 O 2) altında diğer çanak tutmak hücreleri, gecelik inkübasyondan sonra çanak duvara takın ve daha sonra hipoksi hipoksi çalışmaları için bir odası (Billups-Rothenberg, Inc. Del Mar, CA) içine bir çanak transferi için izin verin . </li><li> % 0.1 O 2 oda ve gaz odasına bir gaz silindiri ile giriş deliği boru bağlayarak monte edin. Not: Bu işlem sırasında her ikisi de giriş ve çıkış bağlantı noktası kelepçeler açık olmalıdır. </li><li> Plastik kelepçeler kapatarak tasfiye kamara ve sızdırmazlık odaları olmuştur sonra gaz kaynağı bağlantısını kesin. </li><li> % 5 CO 2 ile 37 ° C inkübatör odasına yerleştirin. Not: odasına kültürlerin aşırı buharlaşma önlemek için nemlendirilmiş olmalıdır. - 20 ml steril su odasında 10 yerleştirerek başarılı olabilir. </li></ul></li><li> Biyoparlaklık tahlil: <ul><li> 24 saat inkübasyondan sonra, orta çıkarın ve buz PBS (2X) ile hücrelerin hızlı bir şekilde yıkayın. </li><li> 100 ul luciferase (Altın Biyoteknoloji, St Louis, MO), soğuk PBS 1 ml ekleyin. </li><li> (1, 30, 60, 180 s) farklı pozlama süreleri ile BL görüntüleme (IVIS Spektrum sistemi, kaliper Yaşam Bilimleri, Hopkinton, MA) edinin. </li><li> Her Yaşayan Image yazılımı (Kaliper Yaşam Bilimleri) kullanarak ışık yoğunluğunu ölçün. </li></ul></li></ol> 2. Bir meme kanseri beyin metastazı model oluşturulması <ol><li> MDA-MB231/5HRE-ODD-luc hücrelerin hazırlanması <ul><li> % 10 FBS,% 1 glutamin ve% 1 penisilin / streptomisin içeren Deme orta MDA-MB231/5HRE-ODD-luc hücreleri almak ve kültür. </li><li> 2-3 günde bir orta değiştirin. Tripsinize ve% 80 izdiham ulaştığınızda hücreleri yıkayın. </li><li> Uygun sayıda hücre sayımı ve serum serbest Deme orta 4 ul hacmi 10 5 hücre nihai bir konsantrasyon ile% 25 Matrigel (BD Biosciences, San Jose, CA) ile tekrar süspansiyon haline getirin. </li><li> Intrakranial enjeksiyon öncesinde buz üzerine yerleştirin hücreleri. </li></ul></li><li> Cerrahi implantasyon <ul><li> Bu çalışmada Bayan çıplak farelerin (BALB / c nu / nu, Ulusal Kanser Enstitüsü, Bethesda, MD) eski 4-6 hafta kullanılır. </li><li> Anestezisi (indüksiyon odasında O2 / izofluran% 3, Baxter International Inc, Deerfield, IL, ABD izofluran) ve oksijen (1 dm 3 / dak) izofluran (% 1), cerrahi işlem 3 sırasında hayvanları korumak . </li><li> Sağ parietal cilt betadin ve sonra insizyon öncesi% 70 alkol ile prepped olmalıdır. </li><li> Yüksek devirli kullanarak, çapak, kafatası, 1mm ön sağ yarımkürede koronal sütür ve saggital dikiş lateral 2 mm 1 mm delik. </li><li> 4 ul hücre karışımı (10 5 hücreleri) 10 ul Hamilton şırınga (Hamilton Company, Reno, NV) kullanarak çizin. Hücreleri doğrudan sağ kaudal diensefalon, ısmarlama bir 32G Hamilton iğne kullanarak duramater altında 1,5 mm içine enjekte edilir. Çekilme önce yaklaşık 30 iğne tutun. 32G ince iğne kullanımı, doku hasarı en aza indirir. </li><li> Burr hole kemik balmumu ile doldurun ve kafa derisi emilebilir dikişlerle yakın. </li><li> % 70 alkol ile kesi bölgesi hazırlayın. </li><li> Buprenorfin analjezi iki gün boyunca her 12 saat uygulayın. </li></ul></li></ol> 3, meme kanseri beyin metastazı tümör hipoksi dinamikleri in vivo biyoparlaklık görüntüleme <ul><li> 8 haftada bir kez intrakranial implantasyon ve tekrar sonra uzunlamasına biyoparlaklık görüntüleme başlatın (IVIS Spektrum sistemi) iki hafta-10 Hafta. </li><li> Bir seferde üç fareler anestezi (% 3 O 2 / indüksiyon odasında izofluran) </li><li> Daha önce 4 ayrıntılı olarak açıklandığı gibi her bir fare boyun bölgesinde subkutan D-luciferase (Altın Biyoteknoloji 120 mg / kg toplam hacminin 80 ul PBS) Yönetici bir çözüm . </li></ul> D-luciferase non-toksik ve sağlam kan-beyin bariyeri (KBB) ve hücre zarlarının 3,5 etme yeteneğine sahip olduğu gösterilmiştir . <ul><li> Görüntüleme odasında 3 fareler yerleştirin ve görüntüleme sırasında oksijen (1 dm 3 / dak) izofluran (% 1) ile korunur. </li><li> Beş dakika luciferase enjeksiyon sonra, bir dizi çeşitli pozlama süresi (1, 30, 60, 180 s) BL görüntüleme kazanır. </li></ul> Gözlemlerimiz tepe ışık yayma süresi boyun bölge 3,4 luciferase subkutan uygulamadan sonra yaklaşık 5 dakika olduğunu gösteriyor. <ul><li> Living Görüntüleme yazılımı (Kaliper Yaşam Bilimleri) ile ilgi bir bölgede mutlak foton sayısı (fotonlar / s) kullanarak verileri analiz (ROI), beyin BLI sinyal anahat elle çizilmiş. </li><li> Foton sayıları Arsa zaman içerisinde eğrisi tümör hipoksi dinamiği göstermek için. </li><li> Son BLI hemen sonra, pimonidazole, hipoksi marker ve daha sonra 1 saat yönetmek fareler kurban ve beyinleri teşrih. Optimal Kesme Sıcaklık (OCT) orta ve donma -80 ° C derin dondurucu bütün beyinleri gömün. Daha sonraki histolojik kresil violet boyama ve lucifeares, hipoksi işaretleyici pimonidazole karşı immünohistokimyasal ve HIF-1α görüntüleme gözlemlerini doğrulamak için yapılır. </li></ul> 4. Temsilcisi sonuçları: Şekil 1'de gösterildiği gibi, önemli ölçüde daha yüksek BLI sinyal, 24 saat hipoksik odası (% 1 O 2) inkübe transfekte hücreler sonra gözlenmiştir. Zayıf ışık yayma normoxia altında kontrol hücreleri gözlendi. Bu, hücrelere bir stres sinyali HIF-1α eksprese uyarılan 3 x 5 10 hücreleri, 24 saat kültürden sonra kalabalık hücre popülasyonu sonucu olabilir . Bununla birlikte, in vivo BLI sonuçları immünohistokimyasal boyama ile tümör hipoksi ve lusiferaz ifade arasındaki ko gösteren onaylandı . Pozlama süreleri otomatik bir dizi uzun pozlama süresi ile zayıf bir sinyal yakalama kolaylaştırır dizi görüntüleri, doyurarak CCD olmadan kısa bir süre kullanarak güçlü sinyaller sürekli alımlar sağlar. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3175/3175fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> In vitro HIF-1α biyoparlaklık tahlil Şekil 1. sıra: 24 hipoksi bir odasında 6-iyi çanak (% 0.1 O 2) her bir kuyunun içinde inkübe, 3 x 10 5 MDA-MB231/5HRE-ODD-luc hücreleri saat orta önce kaldırılır yıkanmış ve 1 ml PBS ile değiştirilir. 100 ul luciferase her kuyuya eklendi hemen sonra, BLI maruz kez bir dizi (1, 30, 60, 180 s) elde edildi. Güçlü lüminesans temsilcisi kuyulardan gözlendi Alt satır: Kontrol olarak, 3 x 10 5 hücre normoxia (% 21 O 2) zayıf ışık yaydığı altında inkübe. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3175/3175fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> In vivo tümör hipoksi dinamikleri biyoparlaklık görüntüleme Şekil 2 A) fare beynin sağ tarafında zayıf ışık sinyali MDA-MB231/5HRE-ODD-luc meme kanseri hücrelerinin intrakranial implantasyonu ilk görüntülenmiştir 5 hafta sonra. Artan optik sinyal, ek 6 hafta içinde artan tümör hipoksi belirten gözlendi B) arsa, ışık sinyali kantitatif foton sayımı zaman ders eğrisi gösterdi . <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3175/3175fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3 ve immun boyama ile kimyasal boyama tespit hipoksi lusiferaz Colocaliztion OCT gömülü bir metastaz meme kanseri MDA-MB231/5HRE-ODD-luc taşıyan bir donmuş bir farenin beyin kesitli oldu . 10 mikron bölümü, hipoksik işaretleyici, pimonidazole ile boyanmış anti-lusiferaz boyama ile tespit lusiferaz ifade ile mekansal olarak ilişkili bulunmuştur hipoksi intratümöral heterojenite saptandı. Ölçeği bar, 100 mm.

<ol><li>Harada, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+combination+of+hypoxia-response+enhancers+and+an+oxygen-dependent+proteolytic+motif+enables+real-time+imaging+of+absolute+HIF-1+activity+in+tumor+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">The combination of hypoxia-response enhancers and an oxygen-dependent proteolytic motif enables real-time imaging of absolute HIF-1 activity in tumor xenografts.</a> Biochem Biophys Res Commun. 360, 791-796 (2007).</li>
<li>Ou, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+HIF-1+imaging+for+determining+optimal+timing+of+combining+bevacizumab+and+radiotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">Usefulness of HIF-1 imaging for determining optimal timing of combining bevacizumab and radiotherapy.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 75, 463-467 (2009).</li>
<li>Zhou, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+near-infrared+optical+imaging+of+2-deoxyglucose+uptake+by+intracranial+glioma+of+athymic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Dynamic near-infrared optical imaging of 2-deoxyglucose uptake by intracranial glioma of athymic mice.</a> PLoS One. 4, e8051-e8051 (2009).</li>
<li>Contero, A., Richer, E., Gondim, A., Mason, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+quantitative+bioluminescence+imaging+for+assessing+tumor+burden%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">High-throughput quantitative bioluminescence imaging for assessing tumor burden.</a> Methods Mol Biol. 574, 37-45 (2009).</li>
<li>Zhao, D., Richer, E., Antich, P. P., Mason, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antivascular+effects+of+combretastatin+A4+phosphate+in+breast+cancer+xenograft+assessed+using+dynamic+bioluminescence+imaging+and+confirmed+by+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Antivascular effects of combretastatin A4 phosphate in breast cancer xenograft assessed using dynamic bioluminescence imaging and confirmed by MRI.</a> FASEB J. 22, 2245-2451 (2008).</li>
<li>Chang, E. L., Lo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+management+of+central+nervous+system+metastases+from+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Oncologist%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and management of central nervous system metastases from breast cancer.</a> Oncologist. 8, 398-410 (2003).</li>
<li>Palmieri, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vorinostat+inhibits+brain+metastatic+colonization+in+a+model+of+triple-negative+breast+cancer+and+induces+DNA+double-strand+breaks%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Vorinostat inhibits brain metastatic colonization in a model of triple-negative breast cancer and induces DNA double-strand breaks.</a> Clin Cancer Res. 15, 6148-6157 (2009).</li>
<li>Mason, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodality+imaging+of+hypoxia+in+preclinical+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Q+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Multimodality imaging of hypoxia in preclinical settings.</a> Q J Nucl Med Mol Imaging. 54, 259-280 (2010).</li>
<li>Tatum, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia%3A+importance+in+tumor+biology%2C+noninvasive+measurement+by+imaging%2C+and+value+of+its+measurement+in+the+management+of+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Biol%22%5BJournal%5D)">Hypoxia: importance in tumor biology, noninvasive measurement by imaging, and value of its measurement in the management of cancer therapy.</a> Int J Radiat Biol. 82, 699-757 (2006).</li>
<li>Moeller, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleiotropic+effects+of+HIF-1+blockade+on+tumor+radiosensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Pleiotropic effects of HIF-1 blockade on tumor radiosensitivity.</a> Cancer Cell. 8, 99-110 (2005).</li>
<li>Lu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+dynamics+and+distinct+functions+of+hypoxia+in+primary+tumor+growth+and+organotropic+metastasis+of+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">In vivo dynamics and distinct functions of hypoxia in primary tumor growth and organotropic metastasis of breast cancer.</a> Cancer Res. 70, 3905-3914 (2010).</li>
<li>Zhao, D., Chang, C. H., Kim, J. G., Liu, H., Mason, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+Near-Infrared+Spectroscopy+and+Magnetic+Resonance+Imaging+Monitoring+of+Tumor+Response+to+Combretastatin+A-4-Phosphate+Correlated+With+Therapeutic+Outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">In vivo Near-Infrared Spectroscopy and Magnetic Resonance Imaging Monitoring of Tumor Response to Combretastatin A-4-Phosphate Correlated With Therapeutic Outcome.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 80, 574-581 (2011).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Meme kanseri, beyin metastazı Evre IV meme kanseri hastalarının% 30&#39;unda ortaya çıkar. Yüksek morbidite ve mortalite ile ilişkili ve medyan sağkalım 13 ay 6 sahiptir. , Intrakranial başlangıcında ve ilerlemesinde gibi patofizyolojik profilleri anlaşılmasını kolaylaştırmak için bu klinik yıkıcı hastalığı taklit etmek için uygun hayvan modelleri için bir ihtiyaç vardır. Burada, insan meme kanseri hücreleri, fare beyninin içine doğrudan enjekte edilerek ortotopik meme kanseri beyin metastazı modeli geliştird...

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifin Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> D-luciferase </td><td> Altın Biyoteknoloji </td><td> L-123 </td><td> 120 in vivo çalışmada toplam hacmi 80 ul PBS mg / kg </td></tr><tr><td> İsofluranın </td><td> Baxter International Inc. </td><td> 1001936060 </td><td></td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> BD Biosciences </td><td> 354234 </td><td></td></tr><tr><td> Hamilton şırınga </td><td> Hamilton Şirket </td><td> 1701 </td><td></td></tr><tr><td> 32G Hamilton iğne </td><td> Hamilton Şirket </td><td> 7803-04 </td><td></td></tr><tr><td> Hipoksi haznesi </td><td> Billups-Rothenberg, Inc. </td><td> MIC-101 </td><td></td></tr><tr><td> Biyoparlaklık görüntüleme sistemi </td><td> Kaliper Yaşam Bilimleri </td><td> IVIS Spektrum sistemi </td><td></td></tr><tr><td> G418 </td><td> Fisher Scientific </td><td> SV3006901 </td><td></td></tr></tbody></table>

meme kanseri beyin metastaz tümör hipoksi dynamics in vivo biyoparlaklık görüntüleme fare modeli

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

Bu tümör hipoksi malign ilerlemesini teşvik ve terapötik yanıt olumsuz etkileyen önemli bir rol oynadığı kabul edilmektedir. Bu, derin yerleşimli ortotopik tümörlerin izlemek için verimli bir anlamı olmaması nedeniyle, kötü huylu beyin tümörleri intrakraniyal gelişimi sırasında in vivo, tümör hipoksi in situ hakkında az bilgi vardır. Lusiferaz gen ifade canlı hücreler tarafından yayılan ışık algılama dayalı Biyoparlaklık görüntüleme (BLI), preklinik hayvan çalışmalarında tedaviye yanıt olarak tümör büyüme ya da tümör boyutu değişiklikleri değerlendirmek için, hızla, özellikle, kanser araştırmaları için kabul edilmiştir. Ayrıca, bir muhabir gen promotor dizisinde kontrol altında ifade ederek, belirli bir gen ekspresyonu BLI tarafından non-invaziv takip edilebilir. Hipoksik stres altında, sinyal yanıtları ağırlıklı olarak hipoksi indüklenebilir faktör 1α (HIF-1α) aracılığıyla çeşitli genlerin transkripsiyon sürücü. Bu nedenle, stably insan meme kanseri MDA-MB231 hücreleri (MDA-MB231/5HRE-ODD-luc) in vitro HIF-1α biyoparlaklık tahlil yapılır transfekte HIF-1α muhabiri inşa 5HRE-ODD-luc, normoxia hücrelerin (% 21 O 2) bir kontrol olarak hizmet ederken, BLI 24 saat önce hipoksik odası (% 0.1 O 2) transfekte hücreler kuluçka. Hipoksi altında hücreler için gözlenen anlamlı olarak daha yüksek foton akısı, organizatörü normoxia içinde olanlara oranla bir artış HIF-1α bağlanma (HRE elemanları), göstermektedir. Hücreler bir meme kanseri beyin metastazı modeli kurmak için doğrudan fare beyninin içine enjekte edilir, in vivo tümör hipoksi dinamikleri biyoparlaklık görüntüleme implantasyon sonrası 2 hafta başlatılan ve haftada bir kez tekrarlanır . BLI artmış intrakraniyal tümör hipoksi gösteren, beyin tümör ilerledikçe artan ışık sinyalleri ortaya koymaktadır. Histolojik ve immünhistokimyasal çalışmalar in vivo görüntüleme sonuçları onaylamak için kullanılır. Burada, in vitro HIF-1α biyoparlaklık tahlil, intrakranial tümör hipoksi izlemek için in vivo biyoparlaklık görüntülemede bir çıplak fare ve uygulama bir meme kanseri beyin metastazı cerrahi kurulması yaklaşımları tanıtacak.

Hipoksi indüklenebilir faktör-1α aktivite Biyoparlaklık görüntüleme, bir meme kanseri beyin metastazı fare modeli intrakranial tümör hipoksi gelişimini izlemek için uygulanır.

Meme Kanseri Beyin metastaz tümör Hipoksi Dynamics in vivo Biyoparlaklık Görüntüleme Fare Modeli

Tümör hipoksisinin malign progresyonu teşvik etmede ve terapötik yanıtı olumsuz etkilemede önemli bir rol oynadığı yaygın olarak bilinmektedir. Orada...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, bir fare modelindeki ortotopik meme kanseri beyin metastazlarında tümör hipoksi dinamiklerini invaziv olmayan bir yöntemle değerlendirmektir. Bu, meme kanseri MDA MB 2 31 hücrelerinin hipoksi raporlayıcı konstrükt ile stabil olarak transduksiyonuyla gerçekleştirilir. Ardından, hipoksi raporlayıcı konstrüktün başarılı bir şekilde transfeksiyonunu ve ekspresyonunu doğrulamak için in vitro lusiferaz analizleri kullanılır.Ardından, intrakraniyal metastazların tümör hipoksisindeki boylamsal değişimleri izlemek için in vivo biyolüminesans görüntüleme gerçekleştirilir. Sonuçlar, hipoksi raporlayıcı geninin ekspresyon paterninin biyolüminesans görüntülemesine dayanarak, meme kanseri beyin metastazlarının tümör hipoksisinin başlangıcını ve gelişimini göstermektedir. Bu tekniğin EOL oksijen elektrodu gibi mevcut yöntemlere karşı temel avantajı, işlemin tamamen noninvaziv olması ve dinamik değişimlerin boylamsal olarak izlenmesine olanak tanımasıdır.Tümör hipoksisi radyasyon gibi geleneksel tedavilerin etkinliğini azalttığı için, bu tekniğin doğurduğu sonuçlar beyin tümörlerinin tedavisine veya teşhisine kadar uzanmaktadır. Bu nedenle, tümör hipoksisinin dereces

in-vivo-bioluminescence-imaging-tumor-hypoxia-dynamics-breast-cancer

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Lusiferaz ifade Meme tümör hücrelerini farelerde subkütan implant ve uzunlamasına bir çalışmada non-invaziv tümör büyümesini ve gelişimini izlemek için optik görüntüleme ile görüntülendi.

Meme Tümörleri IVIS Spektrum kullanarak in vivo Bioluminescent Görüntüleme

Lusiferaz modifiye insan beyin tümörü xenografts atimik farelerde tümör büyümesi ve biyoparlaklık görüntüleme kullanarak tedaviye yanıt daha sonraki izleme ile intrakranyal kurulmuş olabilir. Sağkalım analizi ile birlikte, biyoparlaklık izleme, beyin tümörlerinin tedavisi için düşünülen tedavilerin klinik öncesi test için önemli bir araştırma aracı.

Biyoparlaklık Görüntüleme kullanarak Tümör Büyüme ve Terapi yanıt sonraki Analizi ile İntrakranial Beyin Tümörü Xenografts kurulması

Kemik metastazı deneysel bir fare modeli lusiferaz meme tümör hücreleri ifade intrakardiyak teslim edildikten sonra kurulmuştur. Biyoparlaklık ve mikro BT görüntüleme ile tümör gelişimi ve osteolitik lezyon sonuçlandı boyuna takip edildi.

Biyoparlaklık ve Micro CT Görüntüleme Tümör Metastazlari ve osteolitik Lezyonlar İzleme

Bu yazıda onların büyüme ve metastaz sırasında metastatik meme kanseri hücrelerinde ifade böceği ve Renilla lusiferaz enzimler hem bioluminescent reaksiyonları, inşa görselleştirmek ve ölçmek için yöntemler...

Vivo Çift Yüzey Bioluminescent Imaging&#39;de

Kaynak:Marina Arantes Radicchi1, Victor Carlos Mello1,Victória Paz Machado1, Márcia Cristina Oliveira da Rocha1, Jaqueline Vaz de Oliveira1, Luana Cristina Camargo1,2, Luís Alexandre Muehlmann1, Ricardo Bentes Azevedo1, Sônia Nair Bao1, João Paulo Figueiró Longo11Biyolojik Bilimler Enstitüsü, Brasília Üniversitesi, 2Temel Psikolojik Süreçler Bölümü, Psikoloji Enstitüsü, Brasília ÜniversitesiBu video, lusiferaz eksprese eden meme adenokarsinom hücrelerini dişi bir fareye enjekte ederek ve zaman...

Dişi Fare Modelinde Meme Tümörü İlerlemesinin Biyolüminesans Görüntülemesi

Kaynak: Ciraku, L., et. al. Meme kanseri beyin metastatik tümör büyümesini incelemek ve hedeflemek için bir ex vivo beyin dilimi modeli. J. Vis. Uzm. (2021). Bu video, organotipik bir fare beyin diliminde lusiferaz eksprese eden tümör hücrelerinin görüntülenmesini göstermektedir. Luciferin ortama eklenir ve plaka, in vivo görüntüleme sisteminin haznesinin içine yerleştirilir. Görüntü yakalama parametreleri ayarlanır ve tümörün şekli ve boyutu tanımlanır. Tümör hücreleri tarafından yayılan...

Organotipik Bir Fare Beyin Diliminde Tümör Büyümesini Değerlendirmek için Biyolüminesans Görüntüleme

Bu anti-kanser tedavisi için, görüntüleme yanıt için bir yöntem...

Meme Kanseri Fare Modelleri Tümör Mikroçevre İlaç Yanıtlarının Görüntüleme Canlı

Burada kollarındaki kullandığımız, x-ışını nasıl inhibe mTOR etkinlik çalışmaya ve pozitron emisyon tomografi/bilgisayarlı tomografi Imaging etkileri myeloma kemik iliği engrafted tümörler bir xenograft modeli. Bu myeloma kemik iliği engrafted tümör vivo içindehedefleme terapiler Anti-miyelom etkisini fizyolojik ilgili, non-invaziv ve multimodal analizleri için sağlar.

Multipl Miyelom kemik iliği Xenografts NOG farelerde Multimodal kollarındaki ve pozitronik emisyon tomografi/Hesaplamalı tomografi görüntüleme

Bu protokol, Çift Bioluminesans görüntüleme ile tümör ilerlemesini ve anjiyogenezi gerçek zamanlı olarak izlemek için tümör taşıyan bir fare modelinin kurulması açıklanmaktadır.

Tümör Ilerlemesi ve anjiyogenezinin çift Bioluminescence görüntülenmesi

Burada, çeşitli meme kanseri hücre hatlarında lusiferaz ve yeşil floresan protein ekspresyonunu içeren noninvaziv bir izleme yöntemini tanımladık. Bu protokol, farelerde tümör oluşumunu ve metastatik kolonizasyonu gerçek zamanlı olarak izlemek için bir teknik sağlar.

Biyolüminesans Kullanarak Farelerde Meme Kanseri Büyümesi ve Metastatik Koloni Oluşumunun İzlenmesi

El yazması, ortotopik olarak enjekte edilen meme tümörlerinden spontan akciğer metastazının kurulması ve uzunlamasına büyüme izlemesi için metastatik kaskadının tüm aşamalarında müdahaleye uygun bir metodolojiyi açıklamaktadır.

In vivo (İn canlı) Ortotopik Olarak Enjekte Edilen Meme Tümörü Hücrelerinin Spontan Akciğer Metastazını Ölçmek için Görüntüleme

Keşfedin meme kanseri beyin metastazlarında tümör hipoksi dinamiklerini fare modelinde biyoparlaklık görüntüleme ile invaziv olmayan şekilde izleme yöntemini. Bu teknik kanser tedavisi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

Meme Kanseri Beyin metastaz tümör Hipoksi Dynamics in vivo Biyoparlaklık Görüntüleme Fare Modeli

Daha fazla video keşfet