Çocuk Rats için Hafif Travmatik Beyin Hasarı Yeni Bir Model

Bu prosedürün genel amacı, genç sıçanlarda hafif bir travmatik beyin hasarı oluşturmaktır. Bu, önce yaralanma indüksiyon platformunun hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. Daha sonra, anestezi uygulanmış bir sıçan, çentikli tinfoil üzerine yüzü aşağı bakacak şekilde yerleştirilir.

Yerleştirildikten sonra, kafaya göz kamaştırıcı bir darbe oluşturmak için bir ağırlık düşürülür. Hayvan daha sonra sırtüstü pozisyona getirilir ve kendini yazmak için geçen süre kaydedilir. Ertesi gün performans, yürüyen kiriş testinde ölçülür.

Bu tekniğin diğerlerine göre en büyük avantajı, hayvanların sadece kısa bir süreliğine uyuşturulmasıdır. Bu kapalı bir kafa travmasıdır, bu da aynı hayvanda yaralanmayı birkaç kez tekrarlamamıza izin verir ve yaralanmanın klinik olarak daha ilgili olan rotasyonel bir bileşeni vardır. Bu tekniğin sonuçları, pediatrik beyin sarsıntısı ve hafif travmatik beyin hasarının tedavisine kadar uzanır, çünkü model klinik olarak ilgili semptomolojiyi heterojen bir şekilde indükler ve prosedürün laboratuvarımızda bir teknisyen olan Irene Ma ve harlene haha olacağını gösterir.

Laboratuvarımızda lisans öğrencisi. Hafif travmatik beyin hasarı cihazını kurmak için şeffaf plastikten yapılmış U şeklinde bir sahne inşa edin. Hayvanı düştükten sonra toplamak için sahnenin altına bir sünger yerleştirin.

Ardından, keskin bir tıraş bıçağıyla bir parça folyo folyo alın. Çentikli folyonun sıçanın vücut ağırlığını desteklediğinden, ancak çarpmanın ardından hızlanmayı engellemeyeceğinden emin olun. Çentikli folyoyu sahnenin üstüne tau olacak şekilde bantlayın ve kılavuz tüpün altına doğru konuma yerleştirin.

Kılavuz tüpü, tentenin 3,5 santimetre üzerinde olacak şekilde konumlandırın. Ardından, bir ağırlığın üstüne misina takın. Ağırlığı kılavuz borunun içine yerleştirin ve çizgiyi, ağırlık folyonun 2,5 santimetre üzerinde asılı kalacak şekilde sabitleyin.

Bu yükseklik, farenin güvenli bir şekilde birden fazla vuruş almasını engeller. Misinayı kelepçe sehpasına takın. Ağırlığı misina ile plastik kılavuz borudan yukarı çekin ve 0.5 metre yüksekliğe yerleştirilmiş bir Alyan anahtar pimi ile yerinde tutun.

Başlamak için, anestezi uygulanmış bir sıçanda sedasyon derinliğini onaylayın ve sıçan göğsünü, başı doğrudan düşen ağırlığın yolunda olacak şekilde folyo üzerine hızlı bir şekilde yerleştirin. Başlamaya hazır olduğunuzda, ağırlığın plastik kılavuz borudan dikey olarak düşmesini sağlamak için Alyan anahtar pimini çekin. Bir kez vurulduğunda, sıçan hızla 180 derecelik bir dönüşe maruz kalacak ve sırtüstü pozisyonda inecektir.

Fareyi hemen toplama süngerinden çıkarın ve pamuk uçlu bir aplikatör ile farenin kafasına topikal lidokain uygulayın. Daha sonra, fareyi sırtüstü pozisyonda temiz, ısıtılmış bir kafese yerleştirin. Hayvanı anesteziden uyanana ve sırtüstü pozisyondan yüzüstü pozisyona geçene kadar gözlemleyin.

Bunu, sahte yaralı kontrol grubu için değer yazma zamanı olarak kaydedin. Hayvanı uyuşturun ve daha önce gösterildiği gibi sahneye yerleştirin. Daha sonra, Allen anahtar pimini çekmeden fareyi folyodan çıkarın ve kafasına topikal lidokain uygulayın.

Fareyi sırtüstü pozisyonda temiz, ısıtılmış bir kafese yerleştirin ve değer yazma süresini kaydedin. Son olarak, normal davranışını geri kazandıktan sonra fareyi ev kafesine geri koyun ve bir sonraki kontrol hayvanı ile tekrarlayın. Beyin hasarının indüksiyonundan 24 saat sonra, hayvanları işlem odasına geri koyun.

Fareleri temiz bir tutma kafesine aktarın ve farenin ev kafesini yerleştirin. Konik bir kiriş yüzünün daha dar ucunda, kafesin açık uçlu kısmı kirişin geniş ucuna doğru. Konik kiriş, güvenlik sağlayan küçük çıkıntılara sahip bir merkez platforma sahiptir.

Işının geniş ucuna bir video kamera yerleştirin ve tüm uzunluk görünene kadar odağı ayarlayın. Hazır olduğunda, fareyi konik kirişin geniş ucuna yerleştirin ve kiriş boyunca ev kafesine doğru yürümeye teşvik edin. Sıçan kirişi geçip ev kafesine girdikten sonra en az 60 saniye dinlenmesine izin verin.

Hedef konumu güçlendirmek için, bu bir numaralı denemedir ve analize dahil edilmemiştir. Ardından, video kamerayı açın ve farenin ışın yürüme görevini ek süreler için tamamlamasına izin verin ve ev kafesindeki 62. takviye periyotlarını koruyun. Sıçan tüm denemeleri tamamladıktan sonra, onu ev kafesine geri koyun ve bir sonraki hayvanı test edin.

Hayvan test sırasında kirişten düşerse, hemen kaldırın ve düştüğü yerdeki kirişe geri yerleştirin. Verileri puanlamak için. Testten sonra, her bir deneme için arka bacak ayak kaymalarının sayısını ve kirişi geçmek için toplam süreyi kaydedin.

Her hayvan ve test grubu için ortalama değerleri hesaplamak için bu verileri kullanın. Bu grafik, sahte kontrollere kıyasla tek bir beyin hasarı yaşayan genç sıçanlar arasındaki skorları yazma süresindeki ortalama farkları karşılaştırır. Yaralı sıçanlar, sırtüstü pozisyondan kendilerini yazmak için gereken sürede önemli bir artış gösterdi.

Burada, tek bir yaralanma yaşayan genç sıçanlar için kiriş yürüme görevinde arka bacak ayak kaymalarının ortalama sayısı gösterilmektedir. Sahte yaralı sıçanlarla karşılaştırıldığında, yaralı hayvanlar, bu prosedürü takiben kontrollere kıyasla kiriş boyunca önemli ölçüde daha fazla ayak kayması sergiledi. Oyun terapisi gibi diğer invaziv olmayan müdahaleler, bu tür müdahalelerin çocukların daha sonra yaşadıkları bazı sosyal eksiklikleri gerçekten iyileştirip iyileştiremeyeceğini belirlemek için araştırılabilir. Sarsıntı.

Bu videoyu izledikten sonra, genç kemirgenlerde hafif bir travmatik beyin hasarının nasıl güvenli bir şekilde indükleneceğini ve tespit edileceğini iyi anlamalısınız. Bu, birden fazla zaman noktasında tekrarlanabilir.