Endokrin ve Ekzokrin yeniden programlanması ve Silahların Yayılmasını Önleme Modeli Olarak Pankreas kanalının bağlanmasını yoluyla Fare Pankreas Cerrahi Sakatlık

Bu prosedürün genel amacı, beta hücre neogenezi ve proliferasyonuna izin veren bir ortam oluşturmak için kemirgen yetişkin pankreasta ciddi yaralanmaya neden olmaktır. Bu, önce pankreasın açığa çıkmasına izin vermek için bir orta hat laparotomisi yapılarak gerçekleştirilir. Pankreasın boyun bölgesindeki ana pankreas kanalı daha sonra iki cerrahi düğüm kullanılarak bağlanır.

Son adımda, kısmi kanal ligasyonu veya PDL pankreası hasat edilir. Sonuç olarak, immünohistokimyasal analiz ve Q-R-T-P-C-R, kısmi kanal ligasyonunun neden olduğu doku yeniden şekillenmesi, endokrin proliferasyonu ve neogenez ile ilgili faktörleri incelemek için kullanılır. Bu tekniğin pankreatektomi ve kimyasal beta hücre ablasyonu gibi diğer pankreas yaralanması modellerine göre en büyük avantajı, kısmi kanal ligasyonunun pankreas dokusunun çıkarılmasını veya beta hücrelerinin yok edilmesini içermeyen basit bir prosedür olmasıdır.

Sıçanların pankreasına bağlı parsiyel kanal ligasyonu, enstitümüze 20 yıldan daha uzun bir süre önce tanıtılmıştır. Bu tekniği, genetik hücre soy izlemesinin yanı sıra fonksiyon kaybı ve kazanımı deneylerini kolaylaştırmak için farelere çevirdik. Bu deneysel koşullar altında beta hücrelerinin oluşumunun arkasındaki mekanizmayı değerlendirmek için, Prosedüre başlamadan önce, sekiz haftalık anestezi uygulanmış bir farenin karnı olan toraksı antiseptik bir klorheksidin solüsyonu ile dezenfekte edin.

Daha sonra, karnın 2,5 x 1,5 santimetrelik bir bölümünü tıraş edin ve cerrahi bölgeyi antiseptik ve etanolün alternatif fırçaları ile dezenfekte edin. Son fırçalamadan sonra, uygun anestezi derinliğini ayak parmağınızla onaylayın. Hayvanı çimdikleyin ve örtün.

Ardından, steril makas kullanarak ksifoid işleminden göbek deliğine kadar uzanan deride üst orta hat kesisi yapmak için steril bir bıçak kullanın. Üst karın kadranını ortaya çıkarmak için alttaki lineer dirseği ve peritonu ayırın. Ardından dalağı ortaya çıkarmak için mideyi üst kısımdan geri çekin.

Daha sonra pankreasın dalak lobunu veya kuyruk bölgesini ortaya çıkarın. Daha sonra, pankreasın başını, boynunu ve gövdesini ortaya çıkarmak için duodenumu ve üst jejunumun bir kısmını sağ üst karın kadranına nazikçe geri çekin. Pankreasın boyun bölgesindeki pankreas ana kanalını bulun.

Pankreasın gövdesi ve kuyruk bölgesi artık pankreas kanalını bağlamak için açığa çıkmıştır. Boyun bölgesinin altına dikkatlice bir 6.0 dikiş iğnesi yerleştirin ve portal venin sol tarafına, gastroduodenal ve splenik lobları ayıracak şekilde ligate yapın. Lobların yeterince ayrıldığından emin olmak için birincinin yakınına ikinci bir ligasyon yerleştirin.

Daha sonra organları karın boşluğuna geri koyun ve kas tabakasını sürekli bir dikiş düzeninde kapatmak için dört sıfır poli glikol filamentli iplik kullanın. Son olarak, cildi kesintili bir dikişle kapatın ve tamamen iyileşene kadar hayvanı izleyin. PDL pankreasın boyutu küçülecek ve neredeyse yarı saydam görünecektir.

Delikler küçük beyaz noktalar olarak göründüğünde, pankreasın başı opak pembe renkte görünecek ve steril makas kullanılarak farklı ekzokrin LOI'nin tanımlanmasına izin verecektir. Pankreasın bağlı kuyruğunu dalaktan ve pankreasın kuyruğunu iç organlara bağlayan bağ dokusundan ayırmak için dalak boyunca kesin. Ardından PD L kuyruğunu asyonun hemen önünde kesin.

Sahte kuyruk dokusunu da aynı şekilde izole edin. Bununla birlikte, sahte pankreasın hem kuyruk hem de baş bölgesinin opak pembe olduğunu unutmayın. Her iki parçayı da ayrı ayrı izole etmek için, boyun bölgesindeki sahte bağlı pankreası kesin.

PDL doğru bir şekilde yapıldığında, fareler sağlıklı görünür ve vücut ağırlığı veya glisemide önemli bir fark göstermez. Sahte olarak ameliyat edilen hayvanlarla karşılaştırıldığında, ekzokrin asar dokusu PD L ameliyatından sonra kademeli olarak kaybolur ve bu da PDL'den üç gün sonra bağlanan PD L kuyruğunun boyutunda ve ağırlığında bir azalmaya neden olur Thein R doku morfolojisi, belirgin asar hücreleri apoptozu ile bozulur. Bir hafta sonra, pankreas dokusu CD 45 pozitif bağışıklık hücrelerinin sızması ile yutulur.

İki hafta sonra, birçok ASIN r lobülünün yerini fibrotik ve yağ dokusu alır, bu da PD L kuyruk pankreasının yarı saydam görünümüne neden olur ve deliklerin çıplak gözle görünür hale gelmesine izin verir. Asar apoptozun başlamasıyla aynı zamana denk gelen, sünek epitelin hücre aktivitesinde bir artış da gözlenir. Ayrıca, PDL'den iki hafta sonra, PDL kuyruğundaki toplam beta hücre hacmi, bağlanmamış sahte kuyrukta gözlenene kıyasla iki katına çıkar, buna beta hücre proliferasyonunda bir artış, embriyonik endokrin progenitör belirteç nörojenin üçte bir aktivasyonu eşlik eder.

Bu prosedürü denerken, ameliyatın her adımı için uygun aseptik tekniği kullanmak ve pankreas kanalının bağlanmasını, alttaki arterlere ve çevre dokulara mümkün olduğunca az zarar vererek gerçekleştirmek önemlidir. Bu prosedürü takiben, hücrelerin kaderi ve kökeni ile ilgili ek soruları yanıtlamak için kısmi kanal bağlı transgenik farelerde soy takibi gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir. PD L'den sonra.