Name: Sırt kök ganglion Modeli: Kanserli Sinir Invasion Vitro Modelleme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 23 s
Description: Keşfedin, sırt kök ganglionu ve kanser hücresi modeli kullanarak pankreas kanserinde sinir istilasını in vitro ortamda nasıl çalışılacağını. Bu yöntem, tümör mikroçevresindeki hücre-sinir etkileşimlerini anlamak ve hedefe yönelik tedavi stratejileri geliştirmek için değerli bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Edith Suss-Toby'ye hızlandırılmış mikroskopi ve görüntü analizindeki yardımları için teşekkür edilir. Nofar Rada'ya sanatsal çalışmaları için teşekkür edilir.

Altı haftalık dişi C57BL / CJ fareler de dört (Harlan, Kudüs, İsrail) Değerlendirme ve Laboratuar Hayvan Bakımı spesifikasyonları Akreditasyon Derneği göre deneyde kullanıldı. Tüm deney prosedürleri Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi ve Tarım düzenlemeler Bölümü uyarınca yapılmıştır. 1. Hasat Omurilik <ol><li> CO 2 odasının kullanarak fare Euthanize. o kesme kuvvetlerine bağlı ganglion köklerine zarar verebilir servikal dislokasyon kaçının. Buradan itibaren, steril koşullar altında tüm adımları gerçekleştirmek. </li><li> % 70 etanol ile hayvan aşağı ıslatın. Bu adım, Sterilizasyon ve iç organlar içinden sürükleyerek saç önlemek için önemlidir. </li><li> etanol kurumaya fareyi bırakın. nörotoksisite nedeniyle iç organları ile etanol herhangi bir temas önleyin. </li><li> Fareyi kurutulduktan sonra, yüzüstü pozisyonda işaretçilerine kullanarak konumlandırmak(yüz aşağı). Her hindlimb ve ön ayakları üzerinde işaretçilerine yerleştirin. </li><li> forseps kullanarak, lomber, posterior boyun craniocaudally uzanan bir orta hat kesi yapmak. Sonraki, forseps kullanarak iki taraflı dermal flep yükseltmek ve deri altı doku maruz kalmaktadır. </li><li> kraniyoservikal kavşak ulaşıncaya kadar fare kafatası palpe ediniz. Ağır forseps kullanarak, Kraniyoservikal kavşağı (7. servikal vertebra) servikal kas ve omurga kesti hayvana, dik makas kullanma. kaudal omurga incelemek ve lomber seviyesi (arka bacaklarda seviyesi) ulaşana kadar ağır forseps ile omurga tüketim. </li><li> Ağır forseps kullanarak lomber seviyede (5. bel omuru) bir tam kuyruk kesiye gerçekleştirin. </li><li> (Yüz yukarı) fareyi üzerine yuvarlayın. DRG servikal vertebra düşük seviyelerde elde olmadığı ve insizyon kaplanmasına gerek yoktur. </li><li> Karın boyun orta hatta kısmak geriCilt yanal ve sonra periton açmak için kesti. </li><li> En blok periton içine iç organları (karaciğer, dalak, pankreas, mide ve bağırsak) sökün. Sonraki retroperitoneal organlar (örneğin, böbrekler ve pankreas) çıkarın. Cranially, göğüs duvarı açın. </li><li> forseps ve cerrahi bıçak kullanarak, bilateral uzak vertebral kolonun gelen kaburga 5 mm bırakarak, kaburga kesti. Bu noktada, omurga gövdesinin geri kalanından ayrılır. </li><li> iki kez soğuk (4 ° C), taze fosfat tamponlu tuzlu su (PBS) ile kandan vertebral kolon yıkayın. </li></ol> 2. Yalıtımlı Dorsal Kök Gangliyon (DRG) <ol><li> 4X büyütme ile Stereomikroskopta kullanın. </li><li> bir yapışmayan emici olmayan bir platformda (Telfa / naylon) üzerine omurga yerleştirin. Aynı kranyokaudal yönelim de omurga yüzü yukarı yerleştirin. </li><li> herhangi bir omurga kasları ve bağ dokusu çıkarın. onlar da sinirler için bir dönüm noktası olarak kaburga kullanınomurga bırakın. Kaburga da cerrahi aletler sinirleri korur. DRG omurların servikal, torakal ve lomber sitelerinde yer almaktadır. </li><li> Sonraki kullanarak makas orta hatta omur gövdesi kesme ve omur gövdesinin hafif yanal geri çekilmesi ile omurilik ve DRG kökleri maruz kalmaktadır. </li><li> interkostal aralıkta, DRG için kaburga yanal boyunca medial periferik sinir izleyin. </li><li> DRG tanımlayın. Bu sinir yatan &#39;kızarmış yumurta&#39; sarısı gibi görünüyor. </li><li> ganglionlar sinir distalinde 2-3 mm bırakarak DRG için interkostal sinir distalinde Kes, geri çekme için kullanılır. Bu &quot;kuyruk&quot; hasattan sonra silinecektir. </li><li> forseps kullanarak sinir kavrayın. DRG vücudu kendisi kısma nöral hücre hasarına neden olur ve kaçınılmalıdır. </li><li> onun anterior ve posterior kökler vasıtasıyla, proksimale omurilik onun eki boyunca DRG yaklaşın. </li><li> ef çekerek DRG nazik geri çekme uygulaferent sinir (interkostal sinir güdük) yanal ve DRG yakın ön ve arka kökleri kesmek. </li><li> % 10 fetal buzağı serumu (FCS) ile desteklenmiş taze buz DMEM,% 1 penisilin-streptomisin,% 1 temel olmayan amino asitler ve% 1 sodyum piruvat ile dolu bir 35 mm Petri kabı DRG tutun. </li></ol> Petri Dish 3. İmplantasyonu <ol><li> ECM katılaşma önlemek için önceden soğutulmuş pipet uçları kullanılarak buz üzerinde sonraki adımları gerçekleştirin. </li><li> 2-4x büyütme bir stereomikroskop altında, bir kağıt ızgara üzerinde 35 mm cam alt petri yerleştirin. ÖNEMLİ: sıvı halde ECM tutmak için buz üzerinde çalışma. ızgarasının merkezinde büyüme faktörü-tükenmiş ECM&#39;nin 1 mm çapında bir nokta (yaklaşık 20 ul) oluşturur. </li><li> direk görüş altında, çanak dibine yakın ECM nokta merkezine DRG yerleştirin. Not: Bu protokolde kullanılan kanser hücreleri fare pankreas kanseri hücreleri (KPC) establisbaşka yerde 19 açıklandığı gibi KPC farelerden alınan taze izole tümör örneklerinden hed. </li><li> birleşik kültürlerinden hasat 40.000 kanser hücreleri, bir kez PBS ile yıkayın ve buz üzerinde 40 ul ECM bunları tekrar süspansiyon. </li><li> DRG her yönde bir stereomikroskopta ölçüsü 500 mikron kullanarak ızgara direk görüş altında. Bu noktada yavaş 10.000 hücre / 10 ul ECM tohum. matris matris veya ayrılma onların yayılmasını önlemek, çanak dibine yakın hücreleri enjekte etmek için bir 2-10 ul soğutulmuş ucu kullanın. (Şekil 1). </li><li> katılaşmaya 10-15 dakika boyunca, bir laminar akış başlığı içinde çanak bırakın. ECM kurumayı önlemek. </li><li> Yavaş yavaş plakanın yan duvarına karşı, daha önce belirtildiği gibi hazırlandı, DMEM ekleyin. ECM (yaklaşık 2 ml) karşılamak için yeterli orta ekleyin. </li><li> 37 ° C&#39;de geri inkübatör çanak koyun. </li><li> ertesi gün taze ortam ile orta değiştirin. </li><li> 2 günde orta yerine. &lt;/ Li&gt; </ol> 4. Veri Toplama, Time-lapse videomikroskopi <ol><li> implantasyonu sonrası 7. gününde, zaman atlamalı mikroskopi için çanak almak. Bazı hücreler nedeniyle hızlı göç önceki satın alma gerektirebilir unutmayın. </li><li> Canlı görüntüleme sırasında, 37 ± 0.1 ° C ve% 5 CO2 ortalama sıcaklıkta kapalı bir ortamda koyunuz. </li><li> mikroskop üzerine yerleştirilen bir şarj akuplaj düzenli kamera kullanarak hücreleri kaydedin. </li><li> üç ila altı farklı hücrelerin hücre lokomosyon takip 72 saat kadar için dijital görüntüleri her 10 dakika sürer. </li><li> 24 saat sonra orta değiştirin. </li><li> veri toplama ve mikroskop yazılımı kullanılarak basit analiz gerçekleştirin. </li></ol> 5. Veri Analizi <ol><li> Daha gelişmiş uygulamalar (örneğin, 2D veya 3D hücre izleme) (örneğin Imaris 4D gibi) özel yazılım kullanın. Not: Bu yazılım bir hücrenin xy koordinatları belirlerherhangi bir hareket kökenli mesafe ve hızı ile birlikte, zaman verilir. </li><li> 10 dakika aralıklarla sonraki konumlar arasındaki seyahat mesafe ölçülerek ortalama hız hesaplayın. akson hücre ön mesafedir ve DRG doğru hücrelerin tek yönlü hareketini açıklar İleri Göç İndeksi (ATK) hesaplayın. </li></ol>

<ol><li>Carter, R. L., Foster, C. S., Dinsdale, E. A., Pittam, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perineural+spread+by+squamous+carcinomas+of+the+head+and+neck%2C+a+morphological+study+using+antiaxonal+and+antimyelin+monoclonal+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">Perineural spread by squamous carcinomas of the head and neck, a morphological study using antiaxonal and antimyelin monoclonal antibodies.</a> J Clin Pathol. 36, 269-275 (1983).</li>
<li>Beard, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perineural+invasion+is+associated+with+increased+relapse+after+external+beam+radiotherapy+for+men+with+low-risk+prostate+cancer+and+may+be+a+marker+for+occult%2C+high-grade+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">Perineural invasion is associated with increased relapse after external beam radiotherapy for men with low-risk prostate cancer and may be a marker for occult, high-grade cancer.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 58, 19-24 (2004).</li>
<li>Maru, N., Ohori, M., Kattan, M. W., Scardino, P. T., Wheeler, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+significance+of+the+diameter+of+perineural+invasion+in+radical+prostatectomy+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Pathol%22%5BJournal%5D)">Prognostic significance of the diameter of perineural invasion in radical prostatectomy specimens.</a> Hum Pathol. 32, 828-833 (2001).</li>
<li>Ceyhan, G. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+neuropathy+and+neuropathic+pain--a+comprehensive+pathomorphological+study+of+546+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Pancreatic neuropathy and neuropathic pain--a comprehensive pathomorphological study of 546 cases.</a> Gastroenterology. 136, 177-186 (2009).</li>
<li>Ceyhan, G. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neurotrophic+factor+artemin+promotes+pancreatic+cancer+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">The neurotrophic factor artemin promotes pancreatic cancer invasion.</a> Ann Surg. 244, 274-281 (2006).</li>
<li>Takahashi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perineural+invasion+by+ductal+adenocarcinoma+of+the+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Perineural invasion by ductal adenocarcinoma of the pancreas.</a> J Surg Oncol. 65, 164-170 (1997).</li>
<li>Zhu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve+growth+factor+expression+correlates+with+perineural+invasion+and+pain+in+human+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Nerve growth factor expression correlates with perineural invasion and pain in human pancreatic cancer.</a> J Clin Oncol. 17, 2419-2428 (1999).</li>
<li>Hirai, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perineural+invasion+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">Perineural invasion in pancreatic cancer.</a> Pancreas. 24, 15-25 (2005).</li>
<li>Mitchem, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+tumor-infiltrating+macrophages+decreases+tumor-initiating+cells%2C+relieves+immunosuppression%2C+and+improves+chemotherapeutic+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Targeting tumor-infiltrating macrophages decreases tumor-initiating cells, relieves immunosuppression, and improves chemotherapeutic responses.</a> Cancer Res. 73, 1128-1141 (2013).</li>
<li>Kelly, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuated+multimutated+herpes+simplex+virus-1+effectively+treats+prostate+carcinomas+with+neural+invasion+while+preserving+nerve+function%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Attenuated multimutated herpes simplex virus-1 effectively treats prostate carcinomas with neural invasion while preserving nerve function.</a> FASEB J. 22, 1839-1848 (2008).</li>
<li>Dai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+survival+in+perineural+invasion+of+pancreatic+cancer%2C+an+in+vitro+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Pathol%22%5BJournal%5D)">Enhanced survival in perineural invasion of pancreatic cancer, an in vitro approach.</a> Hum Pathol. 38, 299-307 (2007).</li>
<li>Ayala, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer-related+axonogenesis+and+neurogenesis+in+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Cancer-related axonogenesis and neurogenesis in prostate cancer.</a> Clin Cancer Res. 14, 7593-7603 (2008).</li>
<li>Ayala, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stromal+antiapoptotic+paracrine+loop+in+perineural+invasion+of+prostatic+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Stromal antiapoptotic paracrine loop in perineural invasion of prostatic carcinoma.</a> Cancer Res. 66, 5159-5164 (2006).</li>
<li>Ceyhan, G. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+invasion+in+pancreatic+cancer%2C+a+mutual+tropism+between+neurons+and+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Neural invasion in pancreatic cancer, a mutual tropism between neurons and cancer cells.</a> Biochem Biophys Res Commun. 374, 442-447 (2008).</li>
<li>Bapat, A. A., Hostetter, G., Von Hoff, D. D., Han, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perineural+invasion+and+associated+pain+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Perineural invasion and associated pain in pancreatic cancer.</a> Nat Rev Cancer. 11, 695-707 (2011).</li>
<li>Ketterer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reverse+transcription-PCR+analysis+of+laser-captured+cells+points+to+potential+paracrine+and+autocrine+actions+of+neurotrophins+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Reverse transcription-PCR analysis of laser-captured cells points to potential paracrine and autocrine actions of neurotrophins in pancreatic cancer.</a> Clin Cancer Res. 9, 5127-5136 (2003).</li>
<li>Gil, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve-sparing+therapy+with+oncolytic+herpes+virus+for+cancers+with+neural+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Nerve-sparing therapy with oncolytic herpes virus for cancers with neural invasion.</a> Clin Cancer Res. 13, 6479-6485 (2007).</li>
<li>Gil, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paracrine+regulation+of+pancreatic+cancer+cell+invasion+by+peripheral+nerves%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Paracrine regulation of pancreatic cancer cell invasion by peripheral nerves.</a> J Natl Cancer Inst. 102, 107-118 (2010).</li>
<li>Weizman, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophages+mediate+gemcitabine+resistance+of+pancreatic+adenocarcinoma+by+upregulating+cytidinedeaminase%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Macrophages mediate gemcitabine resistance of pancreatic adenocarcinoma by upregulating cytidinedeaminase.</a> Oncogene. 33, 3812-3819 (2014).</li>
</ol>

Bu araştırma, ICRF Barbara S. Goodman'ın bağışladığı araştırma kariyeri geliştirme ödülü (2011-601-BGPC) ve ABD-İsrail İki Uluslu Bilim Vakfı'ndan bir hibe ile desteklenmiştir. Yazarlardan başka herhangi bir mali açıklama yapılmayacaktır.

Bu makale sinir niş kanserli mikro, DRG modeli özetlediği in vitro bir model sunuyor. Video bu tür fare DRG, onun çıkarılması ve ECM nihayet, onun kültürleme olarak anatomik işaretlerini tanıma başlayarak tüm adımları gösterir. Eş-kültür kanser hücreleri ile beraber DRG da sunulmaktadır. In vitro perinöral niş mikro çalışmak için bu model gerekli hale literatürde tarif edilen in vitro perinöral invazyon araştırma için başka bir model vardır. video sunulan protokol ...

doğrudan işgali, lenfatik yayılım ve hematojenik yayılma: solid tümörler üç ana şekilde yaymak. Ancak, sık sık sinirler boyunca, yayılmasını dikkate alınmaz kanser yayılmış bir dördüncü araç yoktur. Kanserli nöral invazyon (CNI) özellikle baş ve boyun, 1 prostat 2, 3 ve pankreas kanserlerinde, kanser yayılmış iyi bilinen bir yoldur. 4-8 CNI lider, pankreas adenokarsinomu olan bireylerin% 80&#39;den fazla oluşur çölyak ganglion sinirler yoluyla yayılan retroperitoneal tümör. Bu nörotropik kanser hücreleri, merkezi sinir sistemi (MSS) doğru sinirler boyunca tek yönlü göç için eşsiz bir yeteneği var. 9 Bu bulgu perinöral mikroçevresinin malign büyümeyi destekleyen faktörleri sağlayarak, kanser hücreleri tarafından istismar edilebileceğini göstermektedir. CNI araştırma için birkaç tane in vitro model bir arka kök gangliyon (DRG) / Kanser hücresi modelidir. bu modEl sık taze ayrışmış kültürlenmiş DRG preparasyonlar bitişik hücre dışı matris (ECM) yetiştirilen bu model, fare ya da insan kanser hücre çizgileri nöral stroma ve kanser hücreleri arasında. 10-18 parakrin etkileşimi incelemek için kullanılır. Bu video makalede pankreas duktal adenokarsinom in vitro CNI uygulamasını göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>< güçlü > Ekipman: < / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Çalışma mikroskobu</td><td>Leica</td><td>M205</td><td></td></tr><tr><td>Hızlandırılmış Sistem</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forseps</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F4142 ve nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi bıçak</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z309036</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3271</td><td></td></tr><tr><td>35 mm Petri kapları, cam alt</td><td>de groot</td><td>60-627860</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company&nbsp; </td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Materials:</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% etanol</td><td>Sigma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cold PBS</td><td>Biyolojik endüstriler</td><td>02-023-1A</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Biyolojik endüstriler</td><td>01-055-1A</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>Renyum</td><td>10108165</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin ve streptomisin</td><td>Biyolojik endüstriler</td><td>01-031-1B</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Piruvat</td><td>Biyolojik endüstriler</td><td>03-042-1B</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamin</td><td>Biyolojik endüstriler</td><td>03-020-1B</td><td></td></tr><tr><td>Büyüme faktörü tükenmiş matrigel</td><td>Trevigen</td><td>3433-005-01</td><td></td></tr></tbody></table>

sırt kök ganglion modeli: kanserli sinir invasion vitro modelleme

In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

Katı tümörlerin yayılmasının bir yolu nöral istiladır. Bu rota baş ve boyun, prostat ve pankreas kanserlerinde iyi bilinmektedir. Bu nörotropik kanser hücreleri, sinirler boyunca merkezi sinir sistemine (CNS) doğru tek yönlü olarak göç etme konusunda benzersiz bir yeteneğe sahiptir. Dorsal kök gangliyonları (DRG)/kanser hücresi modeli, nöral stroma ve kanser hücreleri arasındaki etkileşimi incelemek için sıklıkla kullanılan üç boyutlu (3D) bir in vitro modeldir. Bu modelde, fare veya insan kanseri hücre hatları, taze ayrışmış kültürlenmiş DRG preparatlarına bitişik olarak ECM'de büyütülür. Bu makalede, farelerden DRG izolasyon protokolü ve pankreas kanseri hücreleri ile birlikte kültür için petri kaplarına implantasyon gösterilmiştir. İmplantasyondan beş gün sonra, kanser hücreleri DRG nöritleri ile temas etti. Daha sonra bu hücreler, kanser hücrelerinin daha geniş polarize, nörotropik göçünü kolaylaştırmak için köprü başları oluşturdu.

<html> Video mikroskopi görüntüleme kullanılarak, DRG kanser hücrelerinin DRG karşı olan kolonilerden uzak göç ederken implantasyon sonrası neurites 5-7 gün çimlenme görülebilir. Implantasyonu sonrası 7. gün, kanser hücreleri neurites (Şekil 2) ile temas. Protokolünde kullanılan pankreas kanser hücrelerinin ileri geçiş göstergesi, diğer hücre hatları (QLL2, B16F) (Şekil 3a) ki kat da...

Bu video makale, pankreatik duktal adenokarsinomda dorsal kök gangliyonları (DRG)/kanser hücresi modelinin kullanımını göstermektedir.

Sırt kök ganglion Modeli: Kanserli Sinir Invasion Vitro Modelleme

One way that solid tumors disseminate is through neural invasion. This route is well-known in cancers of the head and neck, prostate, and pancreas. These ...

Bu modelin genel amacı, kanserli nöral mikroçevreyi yeniden oluşturmaktır. Bu, kanser hücresi ve nöron etkileşimlerinin araştırılmasına olanak tanır. Bu yöntem, tümör hücresi ile nöronlar arasındaki etkileşim ve her bir grubun karşılıklı etkileri gibi, tümör mikroçevresi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.Bu tekniğin temel avantajı; güvenilir olması, uygulanmasının kolay olması ve nöral nişteki hem hücresel hem de serebral faktörleri ele almasıdır. Bu tekniğin etkileri, kanser gelişimi boyunca nöral yeniden şekillenme ve invazyon sürecindeki kilit faktörlerin terapötik geliştirilmesine ve farmakolojik olarak hedeflenmesine kadar uzanmaktadır. Hayvanı bir CO2 haznesinde ötanize ettikten sonra, kürkü %70 etanol ile ıslatın ve kurumaya bırakın.Fareyi pron pozisyonda sabitleyin ve ardından boynun arka kısmından bel omurgasına kadar kraniyokaudal yönde uzanan bir midline insizyon yapın. Daha sonra, dermal flepleri bilateral olarak kaldırmak ve cilt altı dokuyu açığa çıkarmak için pens kullanın. Kraniyoservikal eklem tanımlanana kadar fare kafatasını palpe edin.Hayvana dik açıyla konumlandırılmış makaslar kullanarak kraniyoservikal bileşkedeki servikal kasları ve

in-vitro-modeling-cancerous-neural-invasion-dorsal-root-ganglion

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu videoda, perinöral invazyonu incelemek için civciv koryoallantoik membran veya CAM üzerinde dorsal kök gangliyonları ve kanser hücrelerini birlikte kültürleme yöntemini açıklıyoruz.

Civciv Korioallantoik Membran veya CAM Tümör Modeli: Tümör Hücrelerinin Perinöral İnvazyonunu Simüle Etmek İçin Bir In Ovo Yöntemi

Bu videoda, fare dorsal kök ganglionu ve nörotropik kanser hücrelerini birlikte kültürleyerek in vitro perinöral kanser hücresi istila modeli geliştirme prosedürünü gösteriyoruz. Model, kanser tahlilleri yapmak, hızlı ve tekrarlanabilir sonuçlar üretmek için kullanılabilir.

Murin Dorsal Kök Gangliyonları ve Kanser Hücrelerinin Üç Boyutlu Ko-kültür Modelinin Oluşturulması: Perinöral Kanser Hücre İstilasını İncelemek İçin Bir İn Vitro Model

Bu videoda, nörotropizm ve nöral invazyonu incelemek için DRG ve kanser hücrelerinin birlikte kültürlenmesi için in vitro bir yöntem gösteriyoruz.

Kanserli Nöral İnvazyonun İn Vitro Modellenmesi: Dorsal Kök Gangliyonları ve Kanser Hücrelerini Ko-kültür Yapmak İçin Bir Yöntem

Bu videoda, pankreas kanseri hücrelerini siyatik sinire enjekte ederek perinöral invazyon için in vivo bir fare modeli geliştiriyoruz. Bu model, invazyonun derecesini ölçmeye ve kanser hücreleri ile sinirler arasındaki etkileşimleri incelemeye yardımcı olur.

Murin Perineural İnvazyon Modeli: Fare Siyatik Sinirinde Perinöral İnvazyonu Simüle Etmek için İn Vivo Model Oluşturma

Bu videoda, izole fare DRG dokuları kullanılarak dorsal kök gangliyonları veya DRG eksplant kültürü ve DRG ile ayrışmış hücre modelleri geliştirmek için bir yöntem gösterilmektedir. Bu modeller, kontrollü bir ortamda nöron-glial etkileşimlerle çeşitli mekanizmaların incelenmesine yardımcı olur.

Dorsal Kök Ganglion Eksplant ve Disizosiyasyon Hücre Kültürü Oluşturulması

Perinöral invazyon (PNI), baş ve boyun skuamöz hücreli karsinomunun (HNSCC) yaygın bir özelliğidir ve daha düşük sağkalım oranları sağlar. Mekanizmaları tam olarak anlaşılamamıştır. Yarı katı bir matris ile sınırlı murin dorsal kök gangliyonlarından üretilen nöritler kullanılarak, HNSCC hücre hatlarının PNI'sinde yer alan yollar araştırılabilir.

Baş ve Boyun Skuamöz Hücre Karsinomu içinde perinöral invazyon İçin Bir Model

Biz bir vivo içinde fare modeli perineural işgalinin siyatik sinir syngeneic pankreas kanseri hücreleri enjekte edilerek tanımlamak. Model ölçüde sinir işgalinin miktar için sağlar ve araştırma perineural işgalinin hücresel ve moleküler mekanizmaları destekler.

Vivo fare siyatik sinir modeli Perineural işgali

Perinevral invazyonu baş ve boyun skuanöz hücre karsinomları ve diğer tümörlerde agresif bir fenotiptir. Piliç chorioallantoik membran modeli anjiyogenez, kanser istilası ve metastif eğitimi için kullanılmıştır. Burada bu modelin perineval invazyonu in vivo olarak değerlendirmek için nasıl kullanılabilirler olduğunu gösteriyoruz.

Kafa ve boyun kanseri Perinevral Invazyonu değerlendirmek için Chick Chorioallantoik membran In vivo model

Bu protokol, çok bölmeli (MC) bir cihazda yetişkin Sprague Dawley sıçanlarından ekilen dorsal kök ganglionunu (DRG) hasat etmek ve kültürlemek için bir teknik sağlar.

Periferik Nöronal Özellikleri İncelemek için Çok Bölmeli Cihazlarda Dorsal Kök Gangliyonlarının Toplanması, Gömülmesi ve Kültürlenmesi

Bu protokol, fare Dorsal Kök Gangliyonlarının (DRG) tüm mount ve ayrışmış kültürlerinin oluşturulması için yöntemleri ve bunların tümör-sinir etkileşimlerini değerlendirmek için kullanımlarını açıklar.

Dorsal Kök Gangliyon Kültürünün İn Vitro Modellerinin Oluşturulması: Kanser-Sinir Karışmasının Araştırılmasında Tamamlayıcı Yaklaşımlar

Keşfedin, sırt kök ganglionu ve kanser hücresi modeli kullanarak pankreas kanserinde sinir istilasını in vitro ortamda nasıl çalışılacağını. Bu yöntem, tümör mikroçevresindeki hücre-sinir etkileşimlerini anlamak ve hedefe yönelik tedavi stratejileri geliştirmek için değerli bir araçtır.

Sırt kök ganglion Modeli: Kanserli Sinir Invasion Vitro Modelleme

Daha fazla video keşfet