Spontan Meme Kanseri metastaz Ortotopik Fare Modeli

Bu prosedürün genel amacı, primer tümör meme kanseri büyümesinin ölçülmesinin yanı sıra meme kanseri kinetiğinin görselleştirilmesi ve ölçülmesine izin veren bir fare spontan metastazı meme kanseri modeli oluşturmaktır. Bu yöntem, tümörle ilişkili genlerin değiştirilmesinin kanser büyümesini ve metastazı nasıl etkileyebileceği gibi spontan kanser metastazı alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, bu modelin insan meme kanseri gelişimini taklit etmesi ve bu da onu terapötik ajanların etkinliğini test etmek için ideal hale getirmesidir. Deney gününde, 4T1 lusiferaz tümör hücrelerinin bir gece kültürünü hasat edin ve hücreleri santrifüjleme ile peletleyin. Süpernatanı vakumla çıkarın, daha sonra hücreleri 10 ml PBS'de yıkayın ve peleti saymak için 10 ml taze PBS'de yeniden süspanse edin. Daha sonra, hücreleri HBSS'de 2x10 ^ 5 hücre / ml konsantrasyonuna seyreltin ve süspansiyonu buz üzerinde 1.5 ml steril mikrosantrifüj tüplerine verin. Ardından, fareyi elinizle kısıtlayın, 6-8 haftalık dişi bir BALB/c faresinin meme bezlerini siyah bir kalemle etiketleyin ve 3 numaralı meme ucunu çevreleyen tüyleri tıraş etmek için elektronik bir saç düzeltici kullanın. Mikrofüj tüpünün 2-3 ters çevrilmesiyle hücreleri yeniden askıya almaya devam edin, ardından dikkatlice 50