RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/54157-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol details the bioconjugation of a cysteine-containing protein to a maleimide, emphasizing reagent purification, reaction conditions, and characterization of the bioconjugate. This technique is crucial for ensuring specificity in protein modification, impacting the activity of resulting bioconjugates.
Bu protokol, reaktif saflaştırma, reaksiyon koşulları, Bioconjugate saflaştırma ve Bioconjugate karakterizasyonu dahil olmak üzere, bir maleimid proteini ihtiva eden bir sisteinin bioconjugation için gerekli olan önemli adımlar göstermektedir.
Protein biyokonjugatlarının sistein-maleimid kimyası yoluyla sentezlenmesinin genel amacı, protein üzerindeki modifikasyon bölgesinde özgüllüğü sağlamaktır. Bu da elde edilen biyokonjugatın, örneğin antikor ilaç konjugatlarının aktivitesini etkiler. Protein yapısı veya işlevi ile ilgileniyorsanız ve nano tıp, floresan mikroskobu veya sistem kimyası alanında araştırma yapıyorsanız, bu teknik sorularınızı yanıtlamanıza yardımcı olacaktır.
Bu tekniğin temel avantajı, daha fazla koşul altında oldukça spesifik ve yüksek verimli olmasıdır. Bu işleme başlamak için, 12 miligram liyofilize sitokrom C'yi altı mililitre 20 milimolar fosfat tamponunda çözün. Sitokrom C'yi azaltmak için 16 mikrolitre taze hazırlanmış bir molar DTT solüsyonunu protein solüsyonuna pipetleyin. Solüsyonu karıştırdıktan sonra, herhangi bir kromotografik ortama enjekte etmeden önce 0.22 mikron düşük protein bağlayıcı PBDF şırınga filtresinden süzün.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
08:14
Related Videos
11.5K Views
07:07
Related Videos
10.1K Views
12:22
Related Videos
10K Views
11:25
Related Videos
7.2K Views
09:12
Related Videos
7.4K Views
11:09
Related Videos
11.3K Views
11:02
Related Videos
8.3K Views
11:44
Related Videos
13.2K Views
08:47
Related Videos
10.2K Views
07:11
Related Videos
3.2K Views