Domuz Tibial Allotransplantation cerrahi angiogenez: bileşik Allotransplantation Model yeni bir büyük hayvan kemik skarların

Şu anda bozukluklarına bileşik allotransplantation her türlü uzun-vadeli-immünosupresyon, hayat kritik olmayan endikasyonları desteklemek zor bağlıdır. Biz kemik VCA çalışma ve kemik canlılığı uzun süreli bağışıklık modülasyonu, gerek kalmadan korumak için cerrahi angiogenez kullanımını göstermek için kullanılan yeni bir domuz tibial VCA modeli mevcut.

Bu projenin genel amacı, vaskülarize kompozit tibial allotransplantasyon kullanarak segmental kemik kaybı ve rekonstrüksiyonu için yeni bir büyük hayvan modeli oluşturmaktır. Amerika Birleşik Devletleri'nde neoplazm, enfeksiyon, konjenital anomali veya travmadan kaynaklanan segmental kemik kusurlarını yeniden yapılandırmak için yılda yaklaşık 3.000 uzuv koruyucu ameliyat gerçekleştirilmektedir. Mevcut rekonstrüktif seçenekler önemli mobilite ve yüksek komplikasyon oranları ile ilişkilidir.

Kemik allotransplantasyonunun kullanımı, rezeke edilen kemiğin boyut ve şekil uyumlu canlı kemik ile değiştirilmesine izin verebilir. Kemiğin allotransplantasyonu, kısmen reddi önlemek ve doku ölümüyle sonuçlanmak için uzun süreli immünosupresyon ihtiyacı nedeniyle nadiren klinik olarak gerçekleştirilmiştir. Küçük hayvan modelleri, ilaç immünosupresyonuna veya tolerans indüksiyonuna bir alternatif göstermektedir.

Herhangi bir organ veya uzuv allotransplantı gibi, kan akışı da besin damarlarının mikrocerrahi onarımı ile sağlanır. Ameliyatta, nakledilen segmentin medüller kanalına alıcıdan türetilmiş bir vasküler besleme yerleştirerek benzersiz bir adım daha gerçekleştirilir. Ortaya çıkan neoanjiyojenik kan akımı, iki hafta sonra immünosupresif tedavinin kesilmesiyle birlikte hızla gelişir.

Klinik kullanımdan önce, bu videoda anlatıldığı gibi büyük bir hayvan modelinde kemik allotransplantasyonunu daha fazla incelemek akıllıca olacaktır. İki takımlı bir yaklaşımda, iki büyük SLA uyumsuz Yucatan mini domuzu aynı anda çalıştırılıyor ve her domuz alıcı ve donör olarak görev yapıyor. İlk olarak, her domuzun sağ tibiasından bir vasküler pedikülün alındığı bir tibial kemik segmenti.

Bu süreçte, her domuzda segmental bir tibial defekt oluşturulur. Çapraz transplantasyon tarzında, tibial kemik segmentleri, her bir tibial kemik defektini yeniden yapılandırmak için iki Yucatan mini domuzu arasında değiştirilir. Allojenik tibial kemik segmentinin ve oluşturulan tibial kemik defektinin yerleştirilmesinden sonra, alt arka ekstremiteden alıcıdan türetilmiş bir arteriyel venöz demet, kemik segmenti içinde alıcıdan türetilmiş bir neoanjiyojenik dolaşımı teşvik etmek için allojenik tibial kemik segmentine implante edilir.

Allotransplantasyonun vaskülarizasyonunu gerçekleştirmek için, allojenik tibial kemik segmentinin besin pedikülünün, alıcının alt arka ekstremitesinin bir kas dalına mikrocerrahi bir anastomozu gerçekleştirilir. Kemik fiksasyonu, kilitli bir kompresyon plakası ile sağlanır. Takip eden iki hafta içinde, implante edilen arteriyel venöz demetten başlayan yeni bir alıcı kaynaklı dolaşım kurulana kadar allojenik besin pedikülünün açıklığını korumak için kısa süreli bir immünosupresyon uygulanır.

İşlemden bir gün önce hızlı Yucatan mini domuzları ve kontrol ilacı uygulaması için tartın. Sedasyondan sonra, kulak damarına intravenöz ilaç ve sıvı infüzyonu için periferik bir kateter yerleştirin ve analjezik ve profilaktik antibiyotik uygulayın. Ardından, mini domuzu bir ısıtma pedi üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin.

Sağ arka bacak tıraş edin ve bacağınızı üç kez yıkayın. Steril bir şekilde hazırlayın ve örtün. Tüm yaraları kapatmak için antimikrobiyal bir insizyon örtüsü kullanın.

Kan basıncını, nabız hızını, vücut ısısını ve solunum hızını izleyin. Bir işaretleyici ile bir insizyon hattı çizin ve diz ekleminin üzerinden başlayarak tibianın ön sırtı boyunca tibiotalar ekleme kadar ön lateral bir kesi yapın. Cildi ve deri altı dokusunu inceleyin ve tibiayı ön bölme kas sisteminden ayırın.

Daha sonra, tibialis anterior kasından bir parçayı kökeninden serbest bırakın. Görüş alanını iyileştirmek için salınımlı bir testere kullanarak tibial sırtın bir kısmını çıkarın. Daha sonra neoanjiyogenezi teşvik etmek için arteriyel venöz demet olarak kullanılacak kraniyal tibial arteri ve veni tanımlayın.

Daha sonra, interosseöz membranı açın ve tibial diyafizin besin pedikülüne yol açan kaudal tibial arter adı verilen kraniyal tibial arterin inen dalını tanımlayın. Şimdi kraniyal ve kaudal tibial arteri büyük bir dikkatle inceleyin ve tibial diyafizin besin pedikülünü tanımlayın. Ardından, pedikülü bir mikro kelepçe ile tutturun.

Vasküler pedikülü ayırmayın. Daha sonra kemik vaskülarize allotransplantasyonunun anastomozu için kullanılacak ön kas bölmesinde bir kas dalı tanımlayın. Ardından, vasküler pedikül de dahil olmak üzere tibial kemik segmentinin hasadına başlayın.

Önceden boyutlandırılmış ve tekrarlanabilir bir kemik rezeksiyonu sağlamak için bir kesme aparatı kullanın. Kesme aparatını tibianın medial yüzeyine sabitleyin. Jig tarafından yönlendirilen, hem allotransplant hem de 3,5 santimetrelik bir kusur elde etmek için tam olarak 3,5 santimetre mesafede paralel kemik kesimleri yapın.

Ardından kesme aparatını çıkarın. Tibial kemik segmentini döndürerek, tibial kemik segmentinin besin pedikülünü görselleştirin. Besin pedikülünü ayırın ve tibial parçayı dikkatlice serbest bırakın, yüzeyinde ince bir kas manşeti bırakın ve vasküler pedikülü de dahil olmak üzere tibial kemik segmentinin yükselmesini tamamlayın.

Çıkarıldıktan sonra, tibial kemik segmenti artık mikrovasküler transfer için hazırdır. Daha sonra, allojenik tibial kemik segmentine transpozisyon için kraniyal tibial arteriyel venöz demetini distal olarak bağlayın. Şimdi, iki büyük uyumsuz mini domuz arasında hasat edilen tibial kemik segmentlerini çapraz nakil şeklinde değiştirin.

Kraniyal tibial arteriyel venöz demetin geçişine izin vermek için, proksimal tibial osteosentez tarafından V şeklinde bir segment çıkarın ve distal osteosentez tarafına bir delik açın. Daha sonra, daha sonra yeni bir anjiyojenik dolaşımın geliştirilmesi için alıcı hayvanın AV demetini allotransplantasyona sokun. Kemik allotransplantının besin pedikülünü tibial ön kompartmanın hazırlanmış kas dalına uçtan uca bir şekilde anastomoz edin.

Dokuz delikli 3.5 kilitleme plakası kullanarak osteosentez elde edin. Fasyal ve katmanlı cilt kapanışı gerçekleştirin. Son olarak, yara üzerine tıkayıcı bir kompresyon pansuman uygulayın.

Postoperatif immünosupresif ilaç uygulaması ve izlenmesi için, dış juguler ven içine bir venöz kateter yerleştirin. Boyunda uzunlamasına bir ön lateral kesi ile damarı açığa çıkarın. Tünel açarak, arkadan bir Hickman kateteri yerleştirin.

Kateteri şah damarına yerleştirin ve emilmeyen dikişlerle sabitleyin. Ek olarak, kateteri cilde sabitleyin ve boyun katmanlarını kapatın. Domuzun 60 dakika iyileşmesine izin verin ve ardından tamamen iyileşene kadar yakından izleyin.

Daha sonra mini domuzu kendi kalemine geri koyun ve su içmeye ve ad libidum yemek yemeye bırakın. Postoperatif analjezi için Carprofen kullanın. Ek olarak, iki hafta boyunca günlük olarak profilaktik antibiyotik uygulayın.

AV demeti anjiyogenezi sırasında kemik vaskülarize allotransplantın besin pedikülü yoluyla kan akışını sürdürmek için, 14 gün boyunca Takrolimus, Mikofenolat Mofetil ve Prednizolondan oluşan üçlü bir tedavi uygulayın. İmmünsüpresif ilaçların günlük dozlarını hedeflenen kan oluğu seviyelerine göre ayarlayın. Prednizolonun başlangıç dozunu, idame dozu elde edilene kadar kademeli olarak azaltın.

Tarif edilen teknik, dört SLA majör uyumsuz Yucatan mini domuzunda başarıyla gerçekleştirildi. Tüm mini domuzlar takip sonuna kadar hayatta kaldı ve topallamadan yürüdüler. Kan örneklerinin analizi, Takrolimus ve Mikofenolat Mofetil için terapötik oluk seviyelerine ulaşıldığını gösterdi.

Bu, ameliyat sonrası ilk iki hafta boyunca besin damarı hasarını ve reddedilmeye bağlı trombozu önlemek için yeterli immünosupresyon sağladı. Daha sonra, allojenik kemik allotransplantı içinde yeni bir alıcı kaynaklı kan kaynağı kuruldu ve kemik allojenik dolaşımına olan ihtiyacı ortadan kaldırdı. VCA katılımını ölçmek için 25 puanlık bir puanlama sistemi kullanıldı.

Düzenli radyolojik değerlendirme, çalışma süresi boyunca kemik PCA'sının ilerleyici iyileşmesini gösterdi. İnternal fiksasyonda redüksiyon veya gevşeme kaybı olmadan sürdürüldü. Kısa süreli immünosupresyon ile birlikte cerrahi anjiyogenezi test etmek için mümkün olan kemik VCA için güvenilir ve tekrarlanabilir bir büyük hayvan modeli geliştirdik.

Bu model, anjiyogenez, allotransplant sağkalımı ve immün yanıt arasındaki etkileşimi araştıran gelecekteki çalışmalar için temel teşkil edecektir. Ayrıca, kemik VCA reddinin karmaşık sürecini ve diğer yenilikçi bağışıklık modülerliği stratejilerini tanımlamak için kullanılabilir.