Vivo Kas-tendon morfogenez Drosophila pupa içinde görüntüleme

Bu prosedürün genel amacı, canlı Drosophila pupalarında kas-tendon morfogenezini incelemektir. Bu yöntem, kas gelişimi alanındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Kas hücrelerinin tendon hedefleriyle nasıl etkileşime girdiği ve ne zaman seğirme yeteneği kazandıkları gibi. Bu yöntemin temel avantajı, kas-tendon morfogenezinin sağlam organizmada ve saatlerce incelenebilmesidir. Protokole başlamak için, sinek stoklarının şişelerinin duvarlarından beyaz pre-pupa toplamak için ıslak bir fırça kullanın ve bunları bir cam slayta aktarın. Daha sonra, bir stereo mikroskop altında, ıslak bir fırça ile pupalara yapışan sinek yiyecek kümelerini çıkarın ve pupaların ventral tarafını cam slayta doğru yönlendirin. Kahverengiye dönmeye başlayan veya hala hareket eden pupaları atın. Cam slaytı genotip, toplama tarihi ve saati ile etiketleyin. Slaytı bir Petri kabına aktarın ve pupaların kurumasını önlemek için ıslak bir doku ekleyin. Pupaları 25 ° C'de bir kuluçka makinesinde saklayın