Diyabetik tavşanların arka ekstremite Iskemi preklinik modeli

Periferik arter hastalığı için bir rejeneratif tedavi son derece yararlı olacaktır ve bu hayvan modeli daha iyi deneysel tedaviler insan hastalarda işe yarayabilir olup olmadığını test etmek mümkün olabilir. Prosedürümüz daha iyi bir model ortaya koymayı amaçlıyor. Diyabet veya hiperlipidemi hastalarında karşılaşılan terapötik direnci daha doğru bir şekilde kopyalayan bir dirençtir.

Bu hayvan modeli periferik iskemi için yeni tedavileri test etmek için kullanılabilir ve iskemi neovasasiizasyon tehlikeye bir pre-klinik model sağlar. Anestezi dört ila altı aylık diyabetik ve hiperlipidemik tavşan arka pençe çimdik yanıt eksikliği doğruladıktan sonra, trakea sağ tarafında sadece lateral bir 4-5 santimetre uzunluğunda kesi yapmak için bir sayı 15 bıçak ile bir neşter kullanın ve sağ ortak karotid arter ortaya çıkarmak için künt diseksiyon kullanın. Kesi açmak ve dikkatle juguler ven ve vagus sinirinden karotis arter izole etmek için küçük Weitlaner retractors kullanın.

Karotis arter tamamen sinir ve juguler ven ayrılmış olduğunda, maruz kalan arterproksimal ve distal uçlarında bir 4-O ipek sütür yerleştirin ve bir cerrah düğüm ve dört kare düğüm ile karotis distal ucunda kravat. Proksimal ucunda, gerektiği gibi, damar sıkma veya gevşeme sağlamak için bir vasküler silikon kravat kullanın. Sonra, vazodilatasyon teşvik etmek ve sinir tahrişini azaltmak için maruz karotis arter ve sinir boyunca% 1 lidokain yaklaşık 0.5 mililitre uygulayın.

Arter içine dört inç tel ekleme aracı yerleştirin heparin IV.Place 500 uluslararası birimleri uygulayın. 0,014 inç ile 185 santimetrelik kılavuz teli, inen aorttaki iliak tepecikteki aort çatalına yerleştirme aracıyla besleyin ve tel üzerinde üç Fransız pigtail anjiyografik kateter ilerletin. Pigtail kateterini, azalan aorttaki iliak tepecikteki aort bifurkasyonuna iki santimetre proksimal olarak ilerletin ve kateterin ucunu yedinci lomber ile ilk sakral vertebra arasında konumlandırın.

2-4 mililitre kontrast maddeenjekte ederek kateterin yerini test edin. Doğru konumlandırma onaylandıktan sonra vazodilasyonu artırmak için kateterden 100 mikrogram nitrogliserin intraarteriyel enjeksiyon uygulayın. Daha sonra vazodilatasyona yardımcı olmak için kateterden 0.8 ila %1 lidokain mililitre uygulayın ve kateteri heparinize salinle yıkayın.

Otomatik anjiyografik enjektör için boruyu katetere takın, herhangi bir havayı çizgiden çıkardığından emin olun. Saniyede üç mililitre kateter den dokuz mililitre kontrast madde sağlamak ve saniyede altı kare dijital çıkarma anjiyografisi gerçekleştirmek için otomatik anjiyografik enjektörkullanın. Seri görüntüleri seçin ve kemik görünümünü en aza indirmek ve kontrast ile damar perfüzyon tam bir resim yakalamak için eksi% 40 ayarı kullanarak anjiyogram görüntüsünü değiştirmek.

Femoral arter izole etmek için, sağ femoral arter üzerinde uzunlamasına deri kesi yapmak için bir numara 15 neşter bıçak kullanın, kesi inguinal ligament inferiora uzanır emin olmak ve patella sadece proksimal bölgede biter. Femoral arter ortaya çıkarmak ve Weitlaner retractors ile kesi açmak için künt diseksiyon kullanın. Sinir tahrişini azaltmak ve vazodilatasyonu teşvik etmek için yerel olarak % 1 lidokain yaklaşık 0.5 mililitre uygulayın.

Alt epigastrik, derin femoral, lateral circumflex ve yüzeysel epigastrik arterler de dahil olmak üzere tüm dalları ile birlikte femoral arterin tüm uzunluğu serbest bırakmak için dokuların künt diseksiyon devam edin. Popliteal ve safenöz arterler boyunca diseksiyon, yanı sıra dış iliak arter, periyodik doku hasarına karşı korumak için tuzlu bölge nemlendirici. Dikkatle femoral ven ve sinir femoral arter ayırmak ve arter kesilmesine izin vermek için dikişler arasında yeterli boşluk ile femoral arter üzerinde iki 4-O ipek dikişler yerleştirin.

Sonra ligated arter iki bağları arasında kesmek için küçük Metzenbaum makas kullanın. Arter safenöz ve popliteal arterler oluşturmak için biftek nerede femoral arter excise, proximately çalışma, epigastrik arter hemen altında femoral arter geri kalanı çıkarmak için herhangi bir yan dalları bağlama. Tekrar anjiyografi için, monte edilmiş üç milimetre paslanmaz çelik top ile bir silastik levha kullanın.

4-O ipek dikişler ile quadriceps kas üst kısmına paslanmaz çelik topu takmak için. Yerinde olduğunda topun üzerinde deri çekin. Vazodilatasyonu artırmak için kateterden 100 mikrogram nitrogliserin intraarteriyel enjeksiyon uyguluyoruz.

Gerekirse, vazodilatasyon ile yardımcı olmak ve heparinize salin ile floş kateter ile% 1 lidokain başka bir 0.8-bir mililitre uygulayın. Dokuz mililitre kontrast madde daha enjekte etmek için aynı ayarlarda otomatik anjiyografik enjektörkullanın. Sonra başka bir anjiyogram gerçekleştirin, gösterildiği gibi.

İşlemin sonunda, sağ arter kateteri çıkarın ve arter etrafında zaten yerinde 4-O ipek sütür kullanarak arter kravat. Daha sonra kas ve subcutiküler tabakaları 4-O polidioksanone veya 3-O poliglactin 910 sütür ile sürekli bir dikiş deseni içinde bir konik iğne ile kapatın ve gömülü sürekli subcutiküler dikiş deseninde ters kesme iğnesi üzerinde 4-O polidioksanone veya 4-O poliglactin 910 sütür kullanarak cildi kapatın. Diyabetik olmayan hayvanlarda, yüksek kolesterol bile, diyabetik hayvanlara göre son zaman noktasında anjiyogramlarda iskemik ekstremitede kan basıncı ve vaskülarite de artan bir iyileşme vardır.

Histolojik olarak, kas liflerinin kaybolması veya bozulması olarak kas yapısında ödem ve iskemik hasar ile uyumlu değişiklikler gözlenir. Ayrıca, PECAM bir ve alfa düz kas aktin için immünboyama doku bölümlerinde damarların sayısını ve boyutunu belirlemek için kullanılabilir. Doppler ultrason, lazer Doppler görüntüleme, kızılötesi termografi ve MRG gibi diğer görüntüleme yöntemleri, iskemik ekstremite reperfüzyonunun daha fazla izlenmesi için eklenebilir.

Terapötik direncin bu dahil edilmesiyle, modelimiz hastalıklı bir durumda iskemiyi daha doğru bir şekilde taklit eder, periferik arter hastalığı için yeni tedavilerin değerlendirilmesini ilerletebilir.