Pupal and Adult Injections for RNAi and CRISPR Gene Editing in <em>Nasonia vitripennis</em>

Elena Dalla Benetta; Duverney Chaverra-Rodriguez; Jason L. Rasgon; Omar S. Akbari

doi:10.3791/61892

Nasonia vitripennis'te RNAi ve CRISPR Gen Düzenleme için Pupal ve Yetişkin Enjeksiyonları

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Pupal and Adult Injections for RNAi and CRISPR Gene Editing in Nasonia vitripennis

Nasonia vitripennis'te RNAi ve CRISPR Gen Düzenleme için Pupal ve Yetişkin Enjeksiyonları

Full Text

5,963 Views

08:41 min

December 4, 2020

DOI: 10.3791/61892-v

Elena Dalla Benetta*¹, Duverney Chaverra-Rodriguez*¹, Jason L. Rasgon², Omar S. Akbari¹

¹Division of Biological Sciences, Section of Cell and Developmental Biology,University of California, San Diego, ²Department of Entomology, The Center for Infectious Disease Dynamics, The Huck Institutes of the Life Sciences,The Pennsylvania State University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a method for efficient pupal and adult injections in Nasonia vitripennis, providing a practical alternative to traditional embryonic microinjection. The technique enables functional analysis of genes through RNA interference (RNAi) and CRISPR/Cas9 genome editing.

Key Study Components

Research Area

Genetic engineering in non-canonical insect models
Functional genetics of Nasonia vitripennis
Applications of RNAi and CRISPR/Cas9 techniques

Background

Challenges in embryonic microinjection for parasitoid wasps
The need for accessible methods in genetic studies
Significance of using Nasonia as a model organism

Methods Used

Pupal and adult injection techniques for gene manipulation
Nasonia vitripennis as the biological system
Utilization of RNAi and CRISPR/Cas9 technologies

Main Results

Successful implementation of the injection method with high survival rates (15-100%)
Observation of desired phenotypes through gene editing
Verification of the effectiveness of RNAi and CRISPR without complicated procedures

Conclusions

The method demonstrates a significant advancement in the field of insect genetics
It opens new avenues for functional genetic studies in various insect species

Frequently Asked Questions

What is the purpose of this study?

The study aims to introduce a simpler approach for genetic manipulation in Nasonia vitripennis compared to traditional embryonic microinjections.

What are the two main techniques used in this research?

The techniques utilized are RNA interference (RNAi) and CRISPR/Cas9 genome editing.

Why is Nasonia vitripennis chosen as a model organism?

Nasonia vitripennis is a non-canonical insect model that allows researchers to investigate genetic mechanisms in parasitoid wasps.

What are the benefits of using pupal and adult injections?

These methods are faster, require less specialized equipment, and allow for heritable germline mutations compared to embryo injections.

What is the significance of achieving high survival rates?

High survival rates indicate the effectiveness and reliability of the injection method for genetic studies.

Can this method be applied to other insect species?

Yes, the optimized method may also facilitate functional studies in other insect species beyond Nasonia.

How does this study contribute to the field of genetics?

It provides accessible methods for genetic modification, expanding research possibilities in developmental biology and molecular genetics.

Burada, Nasonia vitripennis'te etkili pupal ve yetişkin enjeksiyonları için yöntemleri embriyo mikroenjeksiyonuna erişilebilir alternatifler olarak tanımlıyoruz ve RNA paraziti (RNAi) yoluyla RNA susturma veya CRISPR/Cas9 genom düzenlemesi yoluyla gen nakavt kullanarak ilgi genlerinin fonksiyonel analizini sağlıyoruz.

Parazitoid yaban arısı gibi kanonik olmayan böcek modeli üzerine yapılan araştırmalar sınırlıdır çünkü embriyonik mikroenjeksiyon çok zordur. Yöntemimiz bu sorunu atlayarak bölgeye özgü ve kalıtsal germ hattı mutasyonlarını mümkün kılar. Pupa veya yetişkin dişilerin enjekte edilmesi hızlıdır ve başarılı embriyonik mikroenjeksiyonlar elde etmek için gereken pahalı ekipman veya özel eğitim gereksinimini ortadan kaldırır.

Bu teknik, model olarak kullandıkları herhangi bir böcek türünde işlevsel çalışmalar yapmak için pahalı ekipmanlara erişimi olmayan hiçbir özel laboratuvara izin vermeyecektir. Optimizasyondan sonra, bu yöntem Nasonia'daki diğer birçok genin fonksiyonel genetiğini incelemek için kullanılabilir. Ayrıca bu yöntemin Nasonia veya diğer böceklerin genetik dönüşümü için nükleik asitler sağlamak için kullanılabileceğini düşünüyoruz.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

Biyoloji Sayı 166 Nasonia vitripennis CRISPR / Cas9 ReMOT BAPC destekli CRISPR Yetişkin enjeksiyonları RNAi