Sitokin Diferansiye İnsan Primer T Hücrelerinde Mitokondriyal Solunumun Gerçek Zamanlı İzlenmesi

Mitokondriyal metabolizma, T hücresi dayanıklılığının ve hafızasının önemli bir düzenleyicisidir. Bu nedenle mitokondriyal solunumun ölçülmesi, T hücrelerinin özellikleri hakkında önemli bilgiler verir. Denizatı makinesi, mitokondriyal solunumun çeşitli elementlerini, gerçek zamanlı olarak, canlı insan birincil T lenfositlerinde, herhangi bir etiketlemeye gerek kalmadan ölçebilir.

Bu yöntem, kanser immünoterapi başarısının önemli belirleyicileri olan T hücresi uygunluğunu ve hafıza potansiyelini izlemek için çok uygundur. Başlamak için, CD3 / CD28 boncuklarını, milyon hücre başına 12.5 mikrolitre boncuğu bir mikrosantrifüj tüpüne aktararak ve tüpteki boncukların 12.5 mikrolitresi başına 12.5 mikrolitre PBS ekleyerek yıkayın. Ardından, mikrosantrifüj tüpünü bir dakika boyunca uygun bir mıknatıs üzerine yerleştirin, tamponu atın ve boncukları orijinal T hücresi ortamı hacminde yeniden askıya alın.