Nontravmatik İntraventriküler Kanama Kemirgen Modelinde İntrakraniyal Basınç İzleme

Bu protokol, kemirgenlerde travmatik olmayan intraventriküler kanamayı takiben kafa içi basıncı, ortalama arteriyel basıncı ve serebral perfüzyon basıncını ölçmek için bir yöntemi tanımlar. İntrakraniyal ve ortalama arteriyel basınçlar, sırasıyla sıçanın korteksine ve femoral arterine yerleştirilen bir fiber optik sensör ile doğru ve güvenilir bir şekilde ölçülebilir. Burada açıklanan teknikler, intraventriküler kanaması olan hastalar invaziv intrakraniyal basınç monitörizasyonu gerektirdiğinde klinik ortama çevrilmiştir.

Bu çalışmanın amacı, intraventriküler IVH'yi takiben ICP'lerin, MAP'lerin ve CCP'lerin objektif olarak izlenmesi ile bir IVH hayvan modeli oluşturmaktı, böylece yazarlar bunu IVH tarafından indüklenen ICP'lerin sonraki hafıza disfonksiyonu üzerindeki etkilerine odaklanacak gelecekteki deneylerde daha fazla uygulayabilirler. Fiber optik sensörler küçük olduğu için büyük mücadeleler hassasiyet içerebilir. Femoral arter diseksiyonu, özellikle mikrocerrahi becerilerde kullanılmayanlar için bazıları için de bir zorluk oluşturabilir.

Sıçanı anestezi altına aldıktan sonra, sıcaklığı sürekli izlemek için rektal termometreyi takın. Saçları başın ve femur bölgesinin üzerine kesin ve ameliyattan önce üç alternatif Betadine ovma ve% 70 alkol ile cildi hazırlayın. Sıçanı ventilatörden geçici olarak çıkararak ve sekresyonları 10 mililitrelik bir şırıngaya bağlı PE-50 tüp ile aspire ederek biriken solunum sekresyonlarını aspire edin.

Gözleri steril yapay gözyaşları göz merhemi ile koruyun. Kafa derisi insizyonundan önce, lokal bupivakaini cilde ve deri altı dokularına enjekte edin. Sıçanı stereotaktik bir çerçeve üzerinde eğilimli bir konuma yerleştirin ve kulak çubuğu.

15 bıçaklı bir neşter ile orta hat boyunca 1,5 santimetrelik bir kafa derisi kesisi yapın. Hemostaz için gazlı bezle hafif basınç uygulayın. Steril bir pamuk ucu aplikatörü kullanarak, bregma dönüm noktası görünene kadar periostu kafatasından ayırın.

Stereotaksi kullanarak bregma'yı bulun ve işaretleyin ve bregmanın 1.4 milimetre lateral ve negatif 0.9 milimetre posterior iki bilateral çapak deliğinin yerini işaretleyin. El tipi bir matkap kullanarak, sağ ve sol yarımkürelerde bu iki küçük kafatası çapak deliğini oluşturun. Fazla kemik yongalarını steril laktasyonlu Ringer çözeltisi ile sulayın.

Sağ yarımkürede, intraventriküler kanama oluşturmak için 28 gauge iğneyi kanülden sağ lateral ventrikülün derinliğine yerleştirmek için çapak deliği seviyesinde 22 gauge'lik bir kılavuz kanül yerleştirin. Fiber optik basınç sensörünü okuma ünitesine bağlayın. Okuma ünitesini açın ve seçilen birimlerin milimetre cıva cinsinden olduğundan emin olun.

Ardından, okuma ünitesi sıfır okuyana ve kullanıma hazır olana kadar ucunu laktasyonlu Ringer çözeltisi ile küçük bir beherin içine batırarak sensörü hazırlayın. Sol yarımkürede, ICP'nin gerçek zamanlı izlenmesi için basınç sensörünü kortekse iki ila üç milimetre derinliğe yavaşça yerleştirin. ICP monitörünü taktıktan sonra, sol uyluk ve kasık bölgesine kolay erişim için sıçanın alt gövdesini çevirin.

Steril hazırlama ve lokal bupivakain uygulamasından sonra, 15 bıçaklı bir neşter ile arka bacak üzerinde 1,5 santimetrelik bir cilt kesisi yapın. Sol femoral arteri yüzeysel olarak bir hemostat ile ve daha sonra mikroskop altında ince uçlu forseps kullanarak daha derin tabakaları inceleyin. Bitişik arterin yerini belirlemeye yardımcı olmak için derin mavi femoral veni tanımlayın.

Distal femoral arteri 3-0 ipek sütür kullanarak bağlayın ve femoral arterin proksimal kısmına geçici bir metal klips yerleştirin. Okuma ünitesine bağlı ikinci bir fiber optik basınç sensörünün önceden astarlanmış olmasını sağlayın. Basınç sensörünü, daha sonra kapatılan bir Tuohy Borst'a yerleştirilen PE-50 borusuna yerleştirin.

Tuohy Borst'u bir ucunda bir milimetrelik bir şırıngaya bağlı üç yönlü bir stopcock'a ve diğer ucunda PE-50 borulu 22 gauge'lik bir iğneye bağlayın. Mikroskop altında, mikro makasla iki milimetrelik bir femoral arteriyotomi yapın ve kurulumun geri kalanına bağlı PE-50 tüp ile kanüle edin. Bir milimetrelik bir şırınga kullanarak 500 mikrolitre kanı aspire edin ve basınç sensörünün MAP'yi okuması için üç yönlü stopcock'u çevirin.

PE-50 tüpüne bağlı 28 gauge intraventriküler iğneyi, IVH hayvanları için aspire edilmiş kan ve araç kontrol hayvanları için emzirilmiş Ringer'larla doldurun. Daha sonra bu iğneyi kılavuz kanüle sağ lateral ventrikülün derinliğine yerleştirin. Dakikada 100 mikrolitre hız kullanarak, bir milimetrelik şırıngayı başparmağınızla pompalayarak kanı veya 200 mikrolitre steril laktasyonlu Ringer çözeltisini sağ lateral ventriküle enjekte edin.

ICP, arteriyel kan basıncı ve rektal sıcaklığı izleyin ve kaydedin. Enjeksiyon sonrası ICP ve MAP değerlerini izleyin ve kaydedin. İntraventriküler enjeksiyonu tamamladıktan sonra, femoral artere yerleştirilen basınç sensörünü içeren PE-50 tüpünü geri çekin ve kanamayı önlemek için geçici klipsi femoral artere uygulayın.

3-0 ipek sütür kullanarak femoral arterin proksimal kısmını bağlayın ve femoral insizyonu 3-0 ipek kullanarak kesilmiş bir şekilde kapatın. ICP monitöründeki intraventriküler iğne ile kılavuz kanülü çıkarın. Çapak deliklerini kemik mumu ile kapatın.

Ve kafatası kesisini 3-0 ipek dikişle kesintili olarak kapatın. Kesiye topikal bupivakain uygulayın ve kilogram karprofen başına 0.5 miligram enjekte edin. Sternal yassılığı korumak için yeterli bilinci yeniden kazanana kadar hayvanları gözetimsiz bırakmayın.

Sıçanların gözetim altında ameliyattan sonra tamamen iyileşmelerine izin verin ve iyileşmeden sonra yiyecek ve suya serbestçe erişerek onları ev kafeslerine geri döndürün. Sahte grup hariç, IVH ve araç kontrol gruplarında intraventriküler enjeksiyon sırasında ICP'ler anlamlı olarak artmıştır. ICP'ler IVH grubunda araç kontrolüne kıyasla daha yüksekti.

ICP'ler daha sonra bu hayvan gruplarında intraventriküler enjeksiyondan sonraki beş dakika içinde hızla azaldı ve normalleşti. MAP'lerin prosedür boyunca benzer kaldığı, CPP'lerin ise kan veya laktasyonlu Ringer çözeltisinin intraventriküler enjeksiyonu sırasında azaldığı gözlendi. Cerrahinin hayati adımları arasında doğru yer ve çapak deliklerinin delinmesi ve femoral arteriyotomi yer alır.

Sensörlerin basınç değişikliklerini doğru bir şekilde okumadaki görevlerini yerine getirmelerini sağlamak için yukarıda belirtilen adımlar yakından takip edilmelidir.