Name: Farelerde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Kaynaklı İnme Sonrası Ensefalomiyosinanjiyoz Tedavisi İçin Bir Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-22T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 54 s
Description: Keşfedin farelerde orta serebral arter oklüzyonu sonrası ensefalomiyosinanjiyoz cerrahisiyle iskemik beyin dokusunda anjiyogenezi artırma yöntemini. Bu teknik inme tedavisinde kan akışını iyileştirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Araştırma Mükemmellik Programı-UConn Health (Ketan R Bulsara ve Rajkumar Verma'ya) ve UConn Health start-up'ı (Rajkumar Verma'ya) tarafından desteklenmiştir.

Tüm deneyler UConn Health Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmış ve ABD yönergelerine uygun olarak yürütülmüştür. Aşağıdaki protokol herhangi bir kemirgen türünde veya türünde çalışmalıdır. Burada, 8 ila 12 haftalık, yaş ve kilo uyumlu C57BL / 6 vahşi tip erkek fareler kullanıldı. Fareler standart chow diyeti ve su ad libitum ile beslendi. Standart muhafaza koşulları, 12 saatlik bir aydınlık / karanlık döngüsü ile% 72.3 ° F ve% 30 -% 70 bağıl nemde tutuldu.
1. Ameliyat öncesi hazırlık
<ol><li>Ameliyattan önce otoklavlama yaparak tüm aletleri sterilize edin. Çalışma yüzeyini %70 etanol ile sterilize edin ve elektrikli ısıtma yastığı ile çalışma yüzeyini 37 °C'ye ısıtın.</li>
	<li>Fareyi indüksiyon için% 4-5% izofluran ile uyuşturmak için bir indüksiyon odası kullanın. Ameliyat sonuna kadar bakım için burun konisi yoluyla % 1.5 -% 2.0 izofluran verin. Ameliyattan önce, sert bir arka ayak sıkışmasına yanıt eksikliğini ve postüral reaksiyonun ve sağ refleksin kaybını değerlendirerek farenin uygun şekilde uyuşturulduğundan emin olun.</li>
	<li>Fareyi çalışma yüzeyindeki sol tarafına yerleştirin ve her iki gözü de korumak için göz merhemi uygulayın.</li>
	<li>Cerrahi alan üzerindeki saçları (yani, göz ve kulak arasındaki sağ lateral kafatası) elektrikli makaslarla tıraş edin. Cerrahi alanı, cerrahi bölgenin ortasından dışarıya doğru konsantrik daireler halinde,% 70 etanol ve ardından povidon çözeltisi ile temizleyin ve bu adımları 2 kat tekrarlayın. NOT: Ameliyat bölgesinin göze yakın olması nedeniyle, cerrahi bölgeyi çevreleyen alanın% 150'sinin çıkarılması, tahrişi veya gözün kazara yaralanmasını önlemek için mümkün olmayabilir.</li>
	<li>Ameliyat yerinde ameliyat öncesi analjezi olarak deri altı enjeksiyonu ile% 0.25 bupivakain (8 mg / kg vücut ağırlığına kadar) tek doz bupivakain uygulayın.</li>
	<li>4x büyütmede cerrahi bir mikroskop kurun. Mikroskop tüm cerrahi adımlar için kullanılır.</li>
</ol>2. Ameliyat prosedürü
NOT: Ameliyat adımları Şekil 1'de sunulmuştur. Bu protokol için, sahte gruba üç fare, yalnızca EMS için üç fare, MCAo için 12 fare ve MCAo + EMS grubu için 23 fare tahsis edildi.
<ol><li>MCAo ameliyatı NOT: MCAo, bizim tarafımızdan ve diğerleri tarafından tanımlandığı gibi kemirgenlerde iyi karakterize edilmiş bir iskemik inme modelidir12,13,14. Ameliyat adımları burada kısaca açıklanmıştır. Fokal geçici serebral iskemi, izofluran anestezisi altında 60 dakikalık sağ MCAo ile indüklendi ve ardından 7 veya 21 gün boyunca reperfüzyon yapıldı.<ol><li>İç karotis arter bifurkasyonundan eksternal karotis arter kütüğü yoluyla 10-11 mm uzunluğunda 6.0 silikon kauçuk kaplı monofilament ilerleterek orta hat ventral boyun insizyonu ve ardından tek taraflı sağ MCAo yapın. Sahte farelerde, dikişin internal karotis artere ilerlemesi dışında aynı ameliyatları gerçekleştirin.</li>
		<li>Otomatik bir ısıtma yastığı ile ameliyat sırasında sıcaklığı ~ 37 ° C'de tutarak bir sıcaklık kontrol sistemi kullanarak rektal sıcaklıkları ölçün.</li>
		<li>Doppler probunu lateral kafatasına (MCA bölgesine karşılık gelen) yerleştirerek ve8 değerini kaydederek sütür yerleştirmeden önce serebral kan akışını ölçmek için lazer Doppler flowmetry kullanın. Tıkanıklığın başlangıç çizgisindeki serebral kan akışının% 15'ine indirgenmesini doğrulamak için, dikiş ilerletildikten sonra aynı prosedürü kullanın. Reperfüzyonu doğrulamak için, dikiş alındıktan sonra aynı prosedürü kullanın.</li>
		<li>Kronik son noktalar için yeterli beslenmeyi sağlamak için kurban edilene kadar ve / veya ameliyattan 1 hafta sonra tüm hayvanları ıslak püre ile besleyin, çünkü hayvanlar inme sonrası yetiştirme eksikliklerine sahiptir.</li>
	</ol></li>
	<li>EMS ameliyatı<ol><li>60 dakikalık MCAo'dan sonra, fareleri yalnızca MCAo veya MCAo + EMS gruplarına randomize edin. MCAo'dan (MCAo + EMS grubu) veya belirli deneyler için sahte ameliyattan (yalnızca EMS grubu) 4 saat sonra EMS gerçekleştirin. Ameliyattan önce yeni bir çift steril cerrahi eldivene geçin. NOT: Fareler 60 dakikalık MCAo'dan sonra anesteziden kurtuldu ve EMS ameliyatından önce yeniden anestezi altına alındı.</li>
		<li>EMS alan gruplar için (MCAo + EMS veya yalnızca EMS grupları), 1-2 mm rostralden sağ kulağa ve 1-2 mm kaudalden sağ göze kadar uzanan makasla 10-15 mm'lik bir cilt kesisi yapın. NOT: Steril makaslar, altındaki temporalis kaslarının kazara zarar görmesini önlemek için kullanıldı.</li>
		<li>Kelepçeleri kullanarak cilt kapaklarını geri çekin ve temporalis kasını ve kafatasını görsel olarak tanımlayın.</li>
		<li>Temporalis kasını bir yayma tekniği ile makas kullanarak kafatasından açıkça ayırın. Ventral yansımayı kolaylaştırmak için kasın kaudal sınırı boyunca ventralal olarak yönlendirilmiş 2-3 mm'lik bir miyotomi uygulayın.</li>
		<li>Bir mikro matkap kullanarak yansıyan temporalis kasının altındaki kafatasında ~ 5 mm çapında bir kraniyotomi uygulayın.</li>
		<li>Beynin pial yüzeyini ortaya çıkarmak için dura materini cımbızla çıkarın. Beyinde kazara yaralanmayı önlemek için çok dikkatli olun.</li>
		<li>Temporalis kasının dorsal sınırını dorsal deri flebinin deri altı dokusuna 6-0 monokril filamentlerle dikerek maruz kalan serebral kortekse hizalayın.</li>
		<li>Cilt kesisini 6-0 monofilament dikişle kapatın. Fareyi tekrar kafesine yerleştirin ve anesteziden iyileşene kadar izleyin. Fareyi barınma tesisine geri getirin.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Ameliyat sonrası dikkat edilmesi gerekenler
<ol><li>Fareleri hastalık için ve cerrahi bölgeyi günlük enfeksiyon için izleyin. Hidrasyonu desteklemek için günlük deri altı normal salin (vücut ağırlığına göre% 1 hacim) verin.</li>
	<li>Ameliyattan 7 gün sonrasına kadar şiddetli dehidrasyon (vücut ağırlığı kaybı >% 20) için izleyin. % >20 kilo kaybı durumunda vücut ağırlığına göre deri altı normal salin% 1 hacim ek bir bolusu uygulayın.</li>
	<li>Özel hususlar olmadan enjeksiyonlara, fizyolojik izlemeye ve diğer testlere devam edin. NOT: Bu prosedürde, ameliyat sonrası tedavi için opioidlerin veya steroidal olmayan anti-enflamatuar ilaçların (NSAID'ler) kullanımından, bu ajanların inme sonucu veya enfarktüs boyutu üzerindeki bilinen etkileri nedeniyle, kurum içi kurumsal hayvan bakımı ve kullanım komitesi15,16,17,18 ile istişare halinde kaçınılmıştır. Bununla birlikte, postoperatif analjezi kullanımı, diğer modellerle birlikte EMS cerrahisi için oldukça teşvik edilmektedir. Bunun için lütfen Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi'ne (IACUC) danışın.</li>
</ol>

<ol><li>Stroke, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Last+updated+10%2F22%2F20%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Last updated 10/22/20.</a> , Accessed 11/12/20. https://www.cdc.gov/stroke/index.htm (2020).</li>
<li>Cipolla, M. J., McCall, A. L., Lessov, N., Porter, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reperfusion+decreases+myogenic+reactivity+and+alters+middle+cerebral+artery+function+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reperfusion decreases myogenic reactivity and alters middle cerebral artery function after focal cerebral ischemia in rats.</a> Stroke. 28 (1), 176-180 (1997).</li>
<li>Arai, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+mechanisms+of+neurovascular+damage+and+repair+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Child+Neurology%22%5BJournal%5D)">Cellular mechanisms of neurovascular damage and repair after stroke.</a> Journal of Child Neurology. 26 (9), 1193-1198 (2011).</li>
<li>Ergul, A., Alhusban, A., Fagan, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenesis%3A+a+harmonized+target+for+recovery+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Angiogenesis: a harmonized target for recovery after stroke.</a> Stroke. 43 (8), 2270-2274 (2012).</li>
<li>Imai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+encephalo-myo-synangiosis+in+surgical+revascularization+strategies+for+moyamoya+disease+in+children+and+adults%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">The importance of encephalo-myo-synangiosis in surgical revascularization strategies for moyamoya disease in children and adults.</a> World Neurosurgery. 83 (5), 691-699 (2015).</li>
<li>Ravindran, K., Wellons, J. C., Dewan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+outcomes+for+pediatric+moyamoya%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%3A+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Surgical outcomes for pediatric moyamoya: a systematic review and meta-analysis.</a> Journal of Neurosurgery: Pediatrics. 24 (6), 663-672 (2019).</li>
<li>Kim, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neovascularization+effect+of+bone+marrow+stromal+cells+in+temporal+muscle+after+encephalomyosynangiosis+in+chronic+cerebral+ischemic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Neurosurgical+Society%22%5BJournal%5D)">The neovascularization effect of bone marrow stromal cells in temporal muscle after encephalomyosynangiosis in chronic cerebral ischemic rats.</a> Journal of Korean Neurosurgical Society. 44 (4), 249-255 (2008).</li>
<li>Srivastava, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+and+neuro-rehabilitative+effects+of+acute+purinergic+receptor+P2X4+%28P2X4R%29+blockade+after+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective and neuro-rehabilitative effects of acute purinergic receptor P2X4 (P2X4R) blockade after ischemic stroke.</a> Experimental Neurology. , 329(2020).</li>
<li>Cao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGFR1-mediated+pericyte+ablation+links+VEGF+and+PlGF+to+cancer-associated+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">VEGFR1-mediated pericyte ablation links VEGF and PlGF to cancer-associated retinopathy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (2), 856-861 (2010).</li>
<li>Hedlund, E., Hosaka, K., Zhong, Z., Cao, R., Cao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malignant+cell-derived+PlGF+promotes+normalization+and+remodeling+of+the+tumor+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Malignant cell-derived PlGF promotes normalization and remodeling of the tumor vasculature.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (41), 17505-17510 (2009).</li>
<li>Cao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+angiogenesis+for+ischemic+disorders%3A+what+is+missing+for+clinical+benefits%5BTitle%5D)+AND+%22Discovery+Medicine%22%5BJournal%5D)">Therapeutic angiogenesis for ischemic disorders: what is missing for clinical benefits.</a> Discovery Medicine. 9 (46), 179-184 (2010).</li>
<li>Verma, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+miR-141-3p+ameliorates+the+negative+effects+of+poststroke+social+isolation+in+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Inhibition of miR-141-3p ameliorates the negative effects of poststroke social isolation in aged mice.</a> Stroke. 49 (7), 1701-1707 (2018).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice-middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice-middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. 47 (47), 2423(2011).</li>
<li>Pétrault, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neither+nefopam+nor+acetaminophen+can+be+used+as+postoperative+analgesics+in+a+rat+model+of+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Neither nefopam nor acetaminophen can be used as postoperative analgesics in a rat model of ischemic stroke.</a> Fundam Clin Pharmacol. (2), 194-200 (2017).</li>
<li>Khansari PS,, Halliwell RF, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+Underlying+Neuroprotection+by+the+NSAID+Mefenamic+Acid+in+an+Experimental+Model+of+Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Mechanisms Underlying Neuroprotection by the NSAID Mefenamic Acid in an Experimental Model of Stroke.</a> (64), (2019).</li>
<li>Mishra, V., Verma, R., Raghubir, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+flurbiprofen+in+focal+cerebral+ischemia%3A+the+possible+role+of+ASIC1a%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of flurbiprofen in focal cerebral ischemia: the possible role of ASIC1a.</a> Neuropharmacology. 59 (7-8), 582-588 (2010).</li>
<li>Chen, T. Y., Goyagi, T., Toung, T. J., Kirsch, J. R., Hurn, P. D., Koehler, R. C., Bhardwaj, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+opportunity+for+ischemic+neuroprotection+with+selective+kappa-opioid+receptor+agonist+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Prolonged opportunity for ischemic neuroprotection with selective kappa-opioid receptor agonist in rats.</a> Stroke. 35 (5), 1180-1185 (2004).</li>
<li>Turóczi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+fiber+viability%2C+a+novel+method+for+the+fast+detection+of+ischemic+muscle+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Muscle fiber viability, a novel method for the fast detection of ischemic muscle injury in rats.</a> PLoS ONE. 9 (1), e84783(2014).</li>
<li>Im, K., Mareninov, S., Diaz, M. F. P., Yong, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+introduction+to+performing+immunofluorescence+staining%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">An introduction to performing immunofluorescence staining.</a> Methods in Molecular Biology. , Clifton, N.J. 299-311 (2019).</li>
<li>Zheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+roles+of+adenosine+A1%2C+A2A%2C+and+A3+receptors+in+skeletal+muscle+ischemia+and+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Protective roles of adenosine A1, A2A, and A3 receptors in skeletal muscle ischemia and reperfusion injury.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 293 (6), H3685-H3691 (2007).</li>
<li>Jiao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+mouse+choroidal+and+retinal+vasculature+using+fluorescent+tomato+lectin+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Visualization of mouse choroidal and retinal vasculature using fluorescent tomato lectin perfusion.</a> Translational Vision Science and Technology. 9 (1), (2020).</li>
<li>Simard, J. M., Sahuquillo, J., Sheth, K. N., Kahle, K. T., Walcott, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Managing+malignant+cerebral+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Treatment+Options+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">Managing malignant cerebral infarction.</a> Current Treatment Options in Neurology. 13 (2), 217-229 (2011).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoclasts+protect+bone+blood+vessels+against+senescence+through+the+angiogenin%2Fplexin-B2+axis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Osteoclasts protect bone blood vessels against senescence through the angiogenin/plexin-B2 axis.</a> Nature Communications. 12 (1), 1832(2021).</li>
<li>Paro, M., Gamiotea-Turro, D., Blumenfeld, L., Bulsara KR,, Verma, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Model+for+Encephalomyosynangiosis+Surgery+after+Middle+Cerebral+Artery+Occlusion-Induced+Stroke+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22BioXriv%22%5BJournal%5D)">A Novel Model for Encephalomyosynangiosis Surgery after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice.</a> BioXriv. 10, (2021).</li>
<li>Venkat, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+with+an+Angiopoietin-1+mimetic+peptide+promotes+neurological+recovery+after+stroke+in+diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22CNS+Neuroscience+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Treatment with an Angiopoietin-1 mimetic peptide promotes neurological recovery after stroke in diabetic rats.</a> CNS Neuroscience & Therapeutics. 27 (1), 48-59 (2021).</li>
<li>Cheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acidic+fibroblast+growth+factor+delivered+intranasally+induces+neurogenesis+and+angiogenesis+in+rats+after+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Acidic fibroblast growth factor delivered intranasally induces neurogenesis and angiogenesis in rats after ischemic stroke.</a> Neurological Research. 33 (7), 675-680 (2011).</li>
<li>Xu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+mutant+of+acidic+fibroblast+growth+factor+against+cerebral+ischaemia-reperfusion+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Protective effects of mutant of acidic fibroblast growth factor against cerebral ischaemia-reperfusion injury in rats.</a> Injury. 40 (9), 963-967 (2009).</li>
<li>Tsai, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acidic+FGF+promotes+neurite+outgrowth+of+cortical+neurons+and+improves+neuroprotective+effect+in+a+cerebral+ischemic+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Acidic FGF promotes neurite outgrowth of cortical neurons and improves neuroprotective effect in a cerebral ischemic rat model.</a> Neuroscience. 305, 238-247 (2015).</li>
<li>Meller, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+by+osteopontin+in+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection by osteopontin in stroke.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 25 (2), 217-225 (2005).</li>
<li>Meseguer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteopontin+predicts+three-month+outcome+in+stroke+patients+treated+by+reperfusion+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Medicine%22%5BJournal%5D)">Osteopontin predicts three-month outcome in stroke patients treated by reperfusion therapies.</a> Journal of Clinical Medicine. 9 (12), 4028(2020).</li>
<li>Zhu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+osteopontin+levels+and+adverse+clinical+outcomes+after+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Plasma osteopontin levels and adverse clinical outcomes after ischemic stroke.</a> Atherosclerosis. 332, 33-40 (2021).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Bu protokol, MCAo kaynaklı inmenin fare modelinde başarılı bir EMS prosedürünü açıklar. Veriler, aşılanmış dokunun canlı kaldığını ve EMS ameliyatından çok sonra beyin korteksi ile bağlar oluşturabileceğini göstermektedir. Bu bulgular, inme bölgesinde yavaş yavaş zengin vasküler trofik bir ortam geliştirmek için serebral kas grefti kullanmanın mantığını desteklemektedir. EMS, aynı ortamda enfarktüslü serebral dokuyu potansiyel olarak onarmak için umut verici bir terapidir.
Protokolün kritik ad...

İskemik inme, yıkıcı kronik sekelleri olan akut nörovasküler bir yaralanmadır. ABD'de inme mağdurlarının çoğu, yılda 650.000, kalıcı fonksiyonel sakatlıktan muzdariptir1. Mevcut tedavilerin hiçbiri, iskemik inmenin akut fazından sonra nöroproteksiyon ve fonksiyonel iyileşme sağlamaz. Akut iskemik inmeden sonra, hem doğrudan hem de kollateral kan kaynakları azalır, bu da beyin hücrelerinin ve ağlarının işlev bozukluğuna yol açar ve ani nörolojik defisitlere neden olur 2,3. İskemik bölgeye kan akışının restorasyonu, inme tedavisinin en önemli hedefi olmaya devam etmektedir. Bu nedenle, iskemik bölgede kan akışını teşvik etmek için anjiyogenezi arttırmak umut verici bir terapötik yaklaşımdır; Bununla birlikte, eritropoietin, statinler ve büyüme faktörleri de dahil olmak üzere inme sonrası anjiyogenezi teşvik etmek için daha önce çalışılan yöntemler, kabul edilemez toksisite veya çevrilebilirlik seviyeleri ile sınırlandırılmıştır4.
Ensefalomiyosinanjiyoz (EMS), sıklıkla inmeye yol açan daralmış kraniyal arterlerin bir durumu olan moyamoya hastalığı olan insanlarda serebral anjiyogenezi artıran cerrahi bir prosedürdür. EMS, hastanın temporalis kasının vasküler bir bölümünün kafatasından kısmen ayrılmasını, ardından kraniyotomi ve kasın etkilenen kortekse aşılanmasını içerir. Bu prosedür iyi tolere edilir ve serebral anjiyogenezi indükleyerek moyamoya hastalığı olan hastalarda iskemik inme riskini azaltır 5,6. Bu nedenle, prosedür bu hastalarda büyük ölçüde önleyici bir rol oynamaktadır. Bu işlemin getirdiği anjiyogenez, iskemik inme ortamında nörovasküler koruma ve iyileşmeyi teşvik etmede de rol oynayabilir. Bu rapor, EMS tarafından ortaya çıkarılan anjiyogenezin, serebral iskemi için anlayış ve terapötik seçenekleri genişletme potansiyeline sahip olduğu hipotezini desteklemektedir.
EMS'nin yanı sıra, anjiyogenezi iyileştirmek için çeşitli farmakolojik ve cerrahi yaklaşımlar vardır, ancak bunların birkaç sınırlaması vardır. Vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF) uygulaması gibi farmakolojik yaklaşımların, tümör dokularında bulunanlara benzeyen kaotik, düzensiz, sızıntılı ve ilkel vasküler pleksusların oluşumu da dahil olmak üzere çeşitli sınırlamalar nedeniyle yetersiz veya hatta zararlı olduğu bulunmuştur 7,8 ve klinik çalışmalarda yararlı etkileri yoktur9.
Cerrahi yaklaşımlar arasında yüzeyel temporal arter-orta serebral arter anastomozu gibi direkt anastomozlar, ensefalo-duro arterio-sinanjiyoz (EDAS), ensefalomiyosinanjiyoz (EMS) gibi indirekt anastomozlar ve direkt ve indirekt anastomoz kombinasyonları10 yer almaktadır. Tüm bu prosedürler, EMS hariç, küçük hayvanlarda teknik olarak çok zorlu ve talepkardır. Diğer prosedürler kompleks vasküler anastomoz gerektirirken, EMS nispeten basit bir kas grefti gerektirir. Dahası, temporalis kasının kortekse yakınlığı, aşılama için doğal bir seçim olmasını sağlar, çünkü aşılama için daha uzak bir kas kullanıldığında gerekli olacağı gibi, kan kaynağından tamamen eksize edilmesi veya ayrılması gerekmez. 
EMS, sıçanlarda kronik serebral hipoperfüzyon modellerinde incelenmiştir 7,11. Bununla birlikte, temporalis kas grefti kullanan EMS, kemirgenlerde akut iskemik inmede hiç çalışılmamıştır. Burada, orta serebral arter tıkanıklığı modeli (MCAo) ile iskemik inme sonrası farelerde EMS'nin yeni bir protokolünü tanımladık. Bu makale, MCAo'dan sonra farelerde EMS'nin bu yeni yaklaşımı için yöntemlerin ve erken verilerin bir açıklaması olarak hizmet vermektedir.

<table><tbody><tr><td>6-0 monokril sütür</td><td>Ethilon</td><td>697G</td><td></td></tr><tr><td>çalışma yüzeyini sterilize etmek için% 70 etanol</td><td>Walgreens</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bupivakain% 0.25 çözelti</td> Doku retraksiyonu için <td>Midwest Vet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kelepçeleri</td><td>Silikon kaplamalı Roboz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Doccal sütür</td><td>Doccal Corporation</td><td>602145PK10Re</td><td></td></tr><tr><td>Çalışma yüzeyi</td><td></td><td></td><td></td>için elektrikli ısıtma yastığı</tr><tr><td>İzofluran anestezi</td><td>Piramal Kritik Bakım A.Ş</td><td></td><td></td></tr>. <tr><td>İzofluran dağıtım aparatı</td><td>B6Surgivet (Isotech 4)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikro matkap</td><td>Harvard Aparatı</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikrodiseksiyon cımbızı, kavisli x2</td><td>Piramal Critical Care Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>fare anjiyogenezi panel arrat</td><td>Ar-Ge D biotech</td><td>ARY015</td><td></td></tr><tr><td>İğne sürücüsü</td><td>Ethilon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Göz koruması için Merhem</td><td>Walgreens</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ameliyat mikroskobu</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Çalışma yüzeyi</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Povidone iyot çözeltisi</td><td>Walgreens</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rektal termometre</td><td>dünya hassasiyeti alet</td><td></td><td></td></tr>: <tr><td>Sulama için tuzlu su veya% 70 etanol</td><td>Walgreens</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ameliyat bölgesini tıraş etmek için küçük elektrikli tıraş bıçağı</td><td>Jenerik</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi makas</td><td>Roboz</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde orta serebral arter oklüzyonu kaynaklı İnme sonrası ensefalomiyosinanjiyoz tedavisi İçin bir model

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

İskemik inme geçiren hastaların çoğu için etkili bir tedavi mevcut değildir, bu da yeni terapötiklerin geliştirilmesini zorunlu kılmaktadır. Beynin iskemik inme sonrası kendi kendini iyileştirme yeteneği, etkilenen bölgedeki yetersiz kan akımı ile sınırlıdır. Ensefalomiyosinanjiyoz (EMS), moyamoya hastalığı olan hastalarda anjiyogenezi sağlayan nöroşirürjik bir prosedürdür. İskemik beyin yüzeyine vasküler temporalis kas greftinin yerleştirilmesi ile kraniyotomi içerir. EMS, farelerde akut iskemik inme ortamında hiç çalışılmamıştır. Bu çalışmayı yönlendiren hipotez, EMS'nin kas greftini çevreleyen kortikal yüzeyde serebral anjiyogenezi arttırmasıdır. Burada gösterilen protokol prosedürü açıklar ve EMS yaklaşımının fizibilitesini ve etkinliğini destekleyen ilk verileri sağlar. Bu protokolde, 60 dakikalık geçici orta serebral arter tıkanıklığından (MCAo) sonra, fareler MCAo veya MCAo + EMS tedavisine randomize edildi. EMS oklüzyondan 3-4 saat sonra yapıldı. Fareler, MCAo veya MCAo + EMS tedavisinden 7 veya 21 gün sonra kurban edildi. Temporalis greft canlılığı nikotinamid adenin dinükleotid indirgenmiş-tetrazolyum redüktaz testi kullanılarak ölçüldü. Bir fare anjiyogenez dizisi, anjiyojenik ve nöromodülatör protein ekspresyonunu ölçtü. İmmünohistokimya, beyin korteksi ile greft bağını ve damar yoğunluğundaki değişimi görselleştirmek için kullanıldı. Buradaki ön veriler, aşılanmış kasın EMS'den 21 gün sonra canlı kaldığını göstermektedir. İmmün boyama, başarılı greft implantasyonu ve kas greftinin yakınındaki damar yoğunluğunda artış gösterdi ve bu da anjiyogenezin arttığını gösterdi. Veriler, EMS'nin fibroblast büyüme faktörünü (FGF) arttırdığını ve inme sonrası osteopontin seviyelerini azalttığını göstermektedir. Ek olarak, inme sonrası EMS, protokolün güvenli ve güvenilir olduğunu düşündüren mortaliteyi arttırmamıştır. Bu yeni prosedür etkili ve iyi tolere edilir ve akut iskemik inme sonrası gelişmiş anjiyogenez için yeni müdahaleler hakkında bilgi sağlama potansiyeline sahiptir.

Bu çalışma için toplam 41 fare kullanılmıştır. MCAo'da bir ve MCAo + EMS'de iki olmak üzere üç mortaliteden sonra, gösterilen sonuçları elde etmek için toplam 38 fare kullanıldı.
İstatistik Her deneyden elde edilen veriler, standart sapma (S.D.) ± ortalama olarak sunulur. Anlamlılık, iki grubu karşılaştırmak için eşleşmemiş öğrencinin t-testi veya ikiden fazla grup için tek yönlü ANOVA kullanılarak belirlendi ve çoklu karşılaştırmaları düzeltmek için Newman-Keuls post-hoc t...

Protokol, moyamoya dışı akut iskemik inmenin tedavisi için ensefalomiyosinanjiyozis-iskemik beyin dokusunun pial yüzeyine vasküler temporalis kas flebinin greftlenmesi için yöntemler sağlamayı amaçlamaktadır. Yaklaşımın anjiyogenezi arttırmadaki etkinliği, farelerde geçici bir orta serebral arter tıkanıklığı modeli kullanılarak değerlendirilir.

Farelerde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Kaynaklı İnme Sonrası Ensefalomiyosinanjiyoz Tedavisi İçin Bir Model

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

İnme hasarı beyindeki vasküler ağı tahrip eder ve inme iyileşmesi için vasküler kaynağın erken canlanması gereklidir. EMS cerrahisi, beyindeki anjiyogenezi artırarak vasküler ağları hızla geri yükler. EMS cerrahisi, sonuçta iskemik dokuya kan akışını artıracak olan serebral anjiyogenezi elde etmek için güvenli bir yöntem sunar.Bu yöntem farmakolojik müdahale ihtiyacını azaltabilir. EMS, iskemik inme tedavisi için terapötik potansiyele sahiptir. Özellikle hemikraniektominin rutin olarak yapıldığı malign inme ortamında uygulanabilir.EMS, hızlı inme iyileşmesini kolaylaştırabilir. EMS cerrahisi, nöroanjiyogenezin mekanizması hakkında fikir verebilir ve uygulama, genellikle anjiyogenezi takip eden nörogenez çalışmasına genişletilebilir. Bununla birlikte, herhangi bir cerrahi prosedür önemli bir uygulamaya ihtiyaç duysa da, kemirgen cerrahisi konusunda biraz deneyime sahip herhangi bir araştırmacının EMS ameliyatını kolayca öğrenebileceğine ve gerçekleştirebileceğine inanıyorum.Ameliyattan önce otoklavlama yaparak tüm aletleri sterilize edin. Çalışma yüzeyini% 70 etanol ile sterilize edin ve elektrikli bir ısıtma yastığı ile 37 santigrat dereceye ısıtın. İzoflorin kaynaklı anesteziden sonra, fareyi çalışma yüzeyinde sol tarafına yerleştirin.Künt forseps ile ayak parmağını sıkıştırarak anestezi derinliğini doğrulayın. Daha sonra her iki gözü oftalmik merhem ile yağlayın. Daha sonra, saçları cerrahi alan üzerinde elektrikli bir tıraş bıçağı ile tıraş edin ve cerrahi alanı% 70 etanol ile temizleyin, ardından providon çözeltisi izleyin.Ameliyat bölgesinde preoperatif analjezi olarak subkutan enjeksiyon ile tek doz %0.25 büpivakain uygulanır. Daha sonra istenen büyütmede cerrahi bir mikroskop kurun. 60 dakikalık orta serebral arter tıkanıklığından sonra, fareleri sadece orta serebral arter tıkanıklığına veya orta serebral arter tıkanıklığına ve ensefalomiyosinanjiyoz gruplarına randomize edin.Ensefalomiyosinanjiyoz alan gruplar için, bir ila iki milimetre rostralden sağ kulağa ve sağ göze bir ila iki milimetre kaudal uzanan, makasla 10 ila 15 milimetrelik bir cilt kesisi yapın. Daha sonra kelepçeleri kullanarak cilt kapaklarını geri çekin ve temporalis kasını ve kafatasını görsel olarak tanımlayın. Temporalis kasını bir yayma tekniği ile makas kullanarak kafatasından açıkça ayırın.Daha sonra, ventral yansımayı kolaylaştırmak için kasın kaudal sınırı boyunca ventralal olarak yönlendirilmiş iki ila üç milimetrelik bir miyotomi yapın. Daha sonra, bir mikro matkap kullanarak yansıyan temporalis kasının altındaki kafatasında yaklaşık beş milimetre çapında bir kraniyotomi yapın. Daha sonra, beynin kazara yaralanmasını önlemek için beynin kazık yüzeyini aşırı dikkatle ortaya çıkarmak için dura materini cımbızla çıkarın.Kesiyeri metinde açıklandığı gibi diktikten sonra, fareyi tekrar kafesine yerleştirin ve anesteziden iyileşene kadar izleyin. Ardından fareyi konut tesisine geri getirin. Temporalis kas grefti ameliyattan yedi gün sonra greftlenmiş ve kontrol kasında kas hücrelerinin geçici hasarını gösterdi, kas hücresi sağkalımı yaklaşık% 71 ve% 97 idiBununla birlikte, aşılanan ve kontrol kası arasındaki bu fark ortadan kalktı ve kaslar ameliyattan 21 gün sonra tamamen iyileşti.Sadece ensefalomiyosinanjiyoz ve orta serebral arter tıkanıklığı modelinde, temporalis kas greftlerinin kortikal yüzeye yapışması, başarılı cerrahi, greft implantasyonu ve bağlanmayı düşündürmektedir. Ensefalomiyosinanjiyozis, inme sonrası kan damarı yüzey alanını ve perilezyonel korteksteki entegre yoğunluğu önemli ölçüde arttırır. Protein dizisi sonuçları, inmeden 21 gün sonra ensefalomisinanjiyoz grubu ile orta serebral arter tıkanıklığında FGF asidik protein düzeylerinde anlamlı bir artış ve osteopontin düzeylerinde bir azalma olduğunu gösterdi ve bu da anjiyogenez ve nöroproteksiyonun iyileştiğini düşündürdü.Orta serebral arter tıkanıklığı ameliyatından 21 gün sonra, farelerde mortalite% 10 ila% 11 mortalite vardı. Bununla birlikte, oklüzyon cerrahisi sonrası ensefalomiyosinanjiyozis mortaliteyi arttırmadı, bu da toleransını düşündürdü. Hasarı önlemek için temporalis kasını parçalara ayırırken bir numaralı önlem alın.İki numara, kafatasını açmak için mikro matkap kullanımıyla. Ve üç numara, dura mater'in cımbızla çıkarılması sırasında. EMS, hematik beyin yaralanmaları gibi diğer akut yaralanmalar için uygulanabilir.Başarılı olursa, EMS sadece inme sonucunu iyileştirmekle kalmaz, aynı zamanda diğer akut beyin yaralanmalarında da faydaları artırabilir. EMS, malign inme için yeni tedavi yaklaşımına kapılar açacaktır. Anjiyogenezi iyileştirmek için yeni bir yöntem sağlayacaktır ve genellikle iyi perfüze edilmiş dokuya bağlı olan yetişkin nörogenezine ışık tutabilir.

a-model-for-encephalomyosynangiosis-treatment-after-middle-cerebral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

İpliksi Orta serebral arter oklüzyonu farelerde iskemik inme eğitimi için ortak bir model.

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Biz video intraluminal monofilament kullanarak yetişkin farelerde orta serebral arter oklüzyonu üretmek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Ayrıca beyin enfarktüsü ölçüde 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür (TTC) ile boyanarak tarafından nasıl değerlendirileceğini gösterir.

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Orta serebral arter oklüzyonu (MCAO) çeşitli kemirgen modelleri yaygın deneysel beyin araştırmalarda kullanılır. Burada, insan iskemik strok çoğunluğu tarafından uygulanan zarar tekabül eden bir boyutta tutarlı bir kortikal enfarktüs üreten transkraniyal sürekli uzak MCAO modelini göstermektedir.

Farelerde Modelleme İnme: Distal Orta Serebral Arter Daimi Pıhtılaşma

inme patofizyolojisini anlamak için, güvenilir modeller kullanmak önemlidir. Farelerde en sık kullanılan inme modellerinden birini anlatacağız Bu yazıda, orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli olarak adlandırılan reperfüzyon ile (ayrıca lümen içi filament veya sütür modeli olarak adlandırılır).

Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım

Silikon kaplı bir sütür kullanılarak orta serebral arterin tıkanmasıyla inen bir fare inme modelini tarif ediyoruz. Protokol, kalıcı oklüzyon veya geçici bir iskemiyi indüklemek için uygulanabilir ve ardından reperfüzyon uygulanabilir.

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Intraluminal filaman tıkanıklığı orta serebral arter deneysel kontur rodents en sık kullanılan vivo içinde modeldir. Ortak karotid arter onarım izin vermek için başka bir cerrahi yaklaşım burada, reperfüzyon ortak karotid arter ve orta serebral arter bölge tam bir reperfüzyon veren gerçekleştirilir.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

Burada, basit dikişler ve bir kelepçe kullanarak geçici bilateral ortak karotis arter tıkanma ile retina iskemisinin bir fare modelini tarif ediyoruz. Bu model, kardiyovasküler anormalliklerin neden olduğu retina iskemisinin patolojik mekanizmalarını anlamak için yararlı olabilir.

Geçici Bilateral Ortak Karotid Arter Tıkanması sonucu İndüklenen İskemik Retina Yaralanmasının Murine Modeli

Deneysel inme araştırmalarında orta serebral arter tıkanma (MCAo) farklı modelleri kullanılmaktadır. Burada, serebrovasküler trombüsin spontan pıhtı lizisi veya tedavisi nedeniyle çıkarıldığı insan inmesini taklit etmeyi amaçlayan dış karotis arter (ECA) yoluyla geçici MCAo'nun deneysel bir inme modeli tanımlanmıştır.

Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Bu protokol, orta büyüklükte bir enfarktüse ve mükemmel bir hayatta kalma oranına sahip benzersiz bir fare vuruşu modeli gösterir. Bu model, klinik öncesi inme araştırmacılarının iskemi süresini uzatmasına, yaşlı fareleri kullanmasına ve uzun vadeli fonksiyonel sonuçları değerlendirmesine olanak tanır.

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Bu protokol, orta serebral arterin intraluminal oklüzyonu yoluyla farelerde geçici fokal serebral iskemi modelini açıklar. Ek olarak, manyetik rezonans görüntüleme ve davranış testleri kullanılarak sonuç değerlendirme örnekleri gösterilmiştir.

İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Burada, C57BL/6J farelerde transkraniyal elektrokoagülasyon yoluyla distal orta serebral arter tıkanıklığı (dMCAO) modeli oluşturmak ve sonraki nörolojik davranışları ve histopatolojik özellikleri değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz.

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu

Keşfedin farelerde orta serebral arter oklüzyonu sonrası ensefalomiyosinanjiyoz cerrahisiyle iskemik beyin dokusunda anjiyogenezi artırma yöntemini. Bu teknik inme tedavisinde kan akışını iyileştirir.

Farelerde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Kaynaklı İnme Sonrası Ensefalomiyosinanjiyoz Tedavisi İçin Bir Model

Daha fazla video keşfet