RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/65386-v
Eridan Rocha-Ferreira1, Syam Nair1, Owen Herrock1, Erik Axel Andersson2, Carl Joakim Ek2, Carina Mallard2, Henrik Hagberg1
1Centre of Perinatal Medicine and Health, Institute of Clinical Sciences, Department of Obstetrics and Gynecology, Sahlgrenska Academy,University of Gothenburg, 2Centre of Perinatal Medicine and Health, Institute of Neuroscience and Physiology, Sahlgrenska Academy,University of Gothenburg
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol highlights a reproducible retro-orbital injection method for intravenous drug administration in neonatal rats and mice. The technique facilitates compound delivery into the venous circulation, which is particularly crucial for preclinical studies mimicking neonatal care unit conditions.
Bu protokol, yenidoğan dönemi boyunca sıçanlarda ve farelerde kullanılabilecek tekrarlanabilir bir venöz uygulama yolunu göstermeyi amaçlamaktadır. Bu prosedür, öncelikle intravenöz uygulama kullanarak yenidoğan bakım ünitelerinde ilaç uygulamasını yansıtmak isteyen klinik öncesi kemirgen çalışmaları için önemlidir.
Retro-orbital enjeksiyon, bileşikleri venöz dolaşıma uygulamak için kullanılan özel bir enjeksiyon yöntemidir. Hayvan araştırmaları, klinik çalışmalara doğru atılmış önemli bir adımdır. Hayvan araştırmalarının bir parçası olarak, farklı türdeki bileşiklerin farklı yollardan uygulanmasına ihtiyaç vardır.
Bu yollardan bazıları deri altı, intraperitoneal ve intravenözdür. Yenidoğan yoğun bakım ünitesinde yatan yenidoğanlarda en sık kullanılan yol intravenöz enjeksiyondur. Bununla birlikte, kemirgen araştırmalarında, özellikle yetişkin kemirgenlerde, IV enjeksiyonları rutin olarak kuyruk damarına yapılır.
Yenidoğanlarda, kuyruk damarı enjeksiyonunu başarılı ve tekrarlanabilir bir şekilde gerçekleştirmek son derece zordur. Bu nedenle, retro-yörünge rotası daha kolay bir alternatif olarak kullanılabilir. İlk olarak, izleyicinin venöz dolaşıma giren boyayı net bir şekilde görebilmesi için tripan mavisi adlı bir boya kullanmayı göstereceğiz.
Yenidoğan sıçanı, başı yan yatarak, bir ışık kaynağının üzerinde dinlenerek tam anestezi altına yerleştirilir, böylece göz ve lateral damar sistemi açığa çıkar ve görünür hale gelir. İğne, medial kantusun eşdeğeri olan göz yuvasının önüne yerleştirilir. Solüsyonu nazik, pürüzsüz ve akıcı bir hareketle enjekte edin.
Bu prosedürü daha iyi çoğaltmak için orbital venöz anatomiyi anlamak önemlidir. Sıçanlarda, gözün hemen altında, venöz pleksusa kolay ve doğrudan erişim sağlayan birkaç damardan oluşan bir ağ vardır. Yenidoğan albino sıçanlarda hem yüzeysel temporal hem de fasiyal damarlarda da görülebilir.
Bu prosedür aynı şekilde gerçekleştirilebilir. Yenidoğan farelerde. 29 milimetre civarında 31 ila 0.30 gauge bir iğne kullanın.
Doğru hacimler için, enjekte edilecek çözeltiyi pipetlenmiş bir hacimden hazırlayın. Hayvanları yanal yaslanmış olarak düz bir yüzeye yerleştirin. Tüm vücut İzofluran anestezisini indükleyin.
% 5 indüksiyon,% 3 bakım. Çekme çekme refleksi yöntemini kullanarak anestezi derinliğini kontrol edin. Başı sağa bakacak şekilde, enjeksiyonu sağ retro-orbital sinüse uygulayın.
İğne eğimini, orta kantusun eşdeğeri olan göz yuvasının ön tarafına, yaklaşık 40 derecelik bir açıyla aşağı doğru yerleştirin. Bu açı, iğnenin göz yörüngesinin arkasına yönlendirilmesini sağlar. Nazik, pürüzsüz ve akıcı bir hareketle enjekte edin.
Geri akışı önlemek için iğneyi yavaşça çekmeden önce kısa bir süre bekleyin. Kontaminasyonu önlemek için her hayvan için yeni bir steril şırınga kullanın. Yavruyu kurtarma kutusuna yerleştirin, korumalı bir ısıtma cihazında dinlendirin, yaklaşık 35 ila 37 santigrat derece.
İyileşmeyi bekleyin ve yavruyu baraja geri göndermeden önce herhangi bir sıkıntı belirtisi olup olmadığını kontrol edin. Bu teknik, izleyici biotin-dekstran'ı germinal matriks kanaması geçirmiş hayvanların beyninin damar sistemine uygulamak için kullanıldı. Kontrol olarak salin enjeksiyonu yapılan hayvanlar, beyindeki damar sisteminde gözle görülür bir lekelenme göstermez.
Biotin-dekstran izleyicinin başarılı retro-orbital enjeksiyonu, retro-orbital uygulamadan sonraki 10 dakika içinde beyin vaskülatüründeki varlığının değerlendirilmesine izin verdi. Bu teknik daha sonra GMH ile yaralanmış hayvanlarda bireysel kan damarı seviyesinde izleyicinin vasküler sızıntısını tespit etmek için kullanıldı. Bu sonuç, örneğin, GMH beyin hasarını takiben sızan kan damarlarının miktarını ölçerek yaralanmanın ölçülmesine izin verir.
Ek olarak, bu prosedür bir ışık kaynağı olmadan da gerçekleştirilebilir, bu da onu yenidoğan sıçanların ve farelerin doğrudan venöz dolaşımına bileşik uygulamaya izin veren basit, anlaşılır ve tekrarlanabilir bir teknik haline getirir. Doğru yapıldığında, bu prosedür herhangi bir olumsuz etkiye neden olmamalıdır. Bu uygulama kökü, antikorların, hücrelerin ve diğer bileşiklerin doğrudan yenidoğan hayvanların venal dolaşımına enjekte edilmesine izin verir.
Bu yol, intraperitoneal veya subkutan enjeksiyonlar gibi diğer yollarla karşılaştırıldığında daha fazla klinik öneme sahiptir.
Related Videos
05:09
Related Videos
34.3K Views
04:51
Related Videos
478 Views
04:13
Related Videos
642 Views
10:15
Related Videos
63.3K Views
05:17
Related Videos
61.5K Views
05:51
Related Videos
20.5K Views
09:28
Related Videos
9.4K Views
07:57
Related Videos
3.5K Views
02:39
Related Videos
2.6K Views
02:33
Related Videos
912 Views