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Environmental Microbiology

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Analyse de qualité de l’eau par l’intermédiaire de bactéries indicatrices
 

Analyse de qualité de l’eau par l’intermédiaire de bactéries indicatrices

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Analyse de qualité de l’eau est vitale pour préserver l’intégrité des ressources en eau. La présence de microorganismes indicateurs est corrélée avec la présence de matière fécale, pouvant contenir des agents pathogènes qui causent des maladies. Organismes indicateurs permet donc d’évaluer la sécurité des approvisionnements en eau.

La contamination fécale dans l’eau pose un risque important pour la santé des plantes, les animaux et les humains, comme les agents pathogènes gastro-intestinaux sont jetées dans un nombre très élevé dans les selles. Toutefois, le suivi des échantillons d’eau pour chaque type d’agent pathogène unique, associé à la pollution fécale n’est pas possible. Arpentage de micro-organismes indicateurs offre un moyen simple, rapid et rentable pour détecter la contamination fécale dans les ressources en eau.

Cette vidéo illustre les principes sous-jacents à l’aide de micro-organismes indicateurs pour évaluer la qualité de l’eau, comment faire pour tester les échantillons d’eau prélevés et l’interprétation et la quantification des données résultantes.

Pour être utilisé comme un indicateur de qualité de l’eau, les organismes doivent satisfaire à cinq critères spécifiques. Tout d’abord, il devrait être détectable dans l’eau où l’agent pathogène est présent, et absent lorsque l’agent pathogène est absent. En second lieu, le nombre de micro-organismes indicateurs doit correspondre avec les concentrations d’agents pathogènes. Il devrait également être plus sévères et persister plus longtemps dans l’environnement que l’agent pathogène. Enfin, la détection devrait être facile, sûre et peu coûteux et efficace pour tous les types d’eau.

Deux de chaque groupe d’indicateurs bactériens plus courantes sont les coliformes totaux et des coliformes fécaux, généralement e. coli. Coliformes totaux se trouvent dans l’intestin des mammifères, mais peuvent également se produire naturellement dans le sol et les eaux de surface. Les coliformes fécaux sont un sous-ensemble qui se trouvent entièrement à l’intérieur du tractus gastrointestinal de mammifères et d’oiseaux et sont continuellement excrétés dans les fèces. Les coliformes sont vulnérables aux mêmes contraintes comme de nombreux pathogènes courants de l’intestin, comme le traitement de l’eau ou le faible niveau des éléments nutritifs, leur présence dans un échantillon d’eau est un indicateur utile de la présence potentielle d’agents pathogènes. Les coliformes totaux et Escherichia coli sont facilement détectées dans l’environnement de laboratoire.

Pour la détection, les substrats chimiques sont ajoutés à l’échantillon qui métabolisent les coliformes, conduisant à un changement de couleur. Pour les coliformes totaux, ONPG ajouté est converti en nitrophénol, tournant l’eau jaune. Pour les coliformes fécaux, e. coli convertit MUG à un produit de méthyl-umbelliferone qui émet une fluorescence bleue-verte sous une lumière ultraviolette. Dans son application la plus simple, le test de substrat peut confirmer la présence ou l’absence de coliformes existant dans l’eau au moment de l’échantillonnage.

Contrairement à cette méthode qualitative, le nombre de coliformes totaux par exemple on peut estimer en utilisant un plateau partitionné spécialisé. Une fois le substrat réactif est dissoute, l’échantillon d’eau est ajouté à un plateau contenant les grands et les petits puits et puis incubé. Puits, montrant le changement de couleur sont comptés, et le ratio des petits et grands puits démontrant des signaux positifs colorimétriques est aligné sur un graphique qui indique une quantité. US d’eau potable doit contenir zéro coliformes totaux par 100 mL.

Maintenant que nous sommes familiers avec les principes de l’utilisation de micro-organismes indicateurs pour identifier et quantifier la contamination de l’eau, examinons un comment cela s’effectue en laboratoire.

Une fois que les échantillons ont été prélevés, mettez-les en laboratoire pour les essais. Pour commencer, ouvrez une bouteille en plastique de 100 mL. Bouteilles peuvent contenir une petite quantité de réactif de thiosulfate de sodium en poudre qui sert à s’assurer de la neutralisation de tout chlore qui peut-être être présente. Ajouter 100 mL d’échantillon d’eau dans la bouteille. Ouvrez un oreiller tube contenant le substrat nutritif et versez le contenu dans l’échantillon d’eau à l’intérieur de la bouteille. Cap et sceller la bouteille, puis secouez vigoureusement, à plusieurs reprises, inversant la bouteille jusqu'à ce que le substrat soit complètement dissout. Ensuite, incuber la bouteille d’échantillon-réactif à 35 ° C pendant 24 h.

Observez la couleur jaune changent dans le mélange échantillon-réactif. Couleur jaune indique que les coliformes fécaux est présents. Aucun changement de couleur n’indique que les coliformes fécaux est absentes. Enfin, exposer le mélange échantillon-réactif à la lumière ultraviolette et observer. Fluorescence bleue, en combinaison avec un changement de couleur jaune, indique qu’e. coli est présente. Aucune fluorescence n’indique absence.

La plupart du nombre Probable, ou NPP, peut aussi être déterminé pour les échantillons. Ouvrir une bouteille et ajouter 100 mL d’échantillon d’eau. Ouvrir le tube d’oreiller du substrat nutritif et versez le contenu dans l’échantillon d’eau dans la bouteille. Boucher et sceller la bouteille. Agiter vigoureusement, retournant à plusieurs reprises jusqu'à ce que le substrat soit complètement dissout. Avec précaution, ouvrir le tiroir en serrant les bords en haut et tirez le papier onglet. Exercez une pression constante pour garder le plateau ouvert. Versez le mélange échantillon-réactif dans le bac et le joint. Incuber le plateau à 35 ° C pendant 24 h.

Observez la couleur changent dans le bac de mélange échantillon-réactif. Compter le nombre de puits grands et petits puits qui ont jauni pour indiquer la présence de coliformes. Ensuite, ouvrir le tiroir de l’échantillon-réactif à la lumière ultraviolette et observer la fluorescence bleue. Compter le nombre de petits et grands puits que le signal positif présence d’Escherichia coli.

À l’aide de la feuille MPN fournie, quantifier la concentration pour chaque organisme indicateur présent dans 100 mL d’eau. Trouver le nombre de petits puits positifs sur le haut du tableau et le nombre de grands puits positifs sur l’axe du côté gauche. L’intersection des deux donnera un chiffre représentant le nombre le plus Probable, c'est-à-dire le nombre estimatif d’organismes par 100 mL.

Coliformes totaux et les tests de détection d’e. coli sont utilisés pour vérifier la contamination dans une variété d’échantillons d’eau.

L’eau qui est destiné à la consommation humaine, ou potable, est régulièrement testé pour la contamination. Afin que l’eau soit considéré comme sans danger, il doit contenir moins de 1 coliformes / 100 mL. Ici, l’eau d’un robinet a été recueillie et testé pour les coliformes totaux ou contamination par e.coli , comme précédemment démontré. Les résultats déterminés si une source d’eau était propre à la consommation.

Un autre échantillon communément testé est le traitement des eaux usées. L’eau doit être testé pour s’assurer que c’est sans danger pour le rejet dans l’environnement ou la réorientation à usage humain. Comme des niveaux élevés de contamination ont été prévus avant le traitement, l’échantillon d’eaux usées non traitées a été dilué au 1/100 000. Ces échantillons ont ensuite été soumis au NPP calculé et tests de détection d’e. coli et coliformes totaux. La valeur sûre après traitement doit être zéro détectable indicateurs bactériens.

Vous avez juste regardé introduction de JoVE au contrôle qualité de l’eau à l’aide de micro-organismes indicateurs. Vous devez maintenant comprendre comment tester des échantillons d’eau pour e. coli et autres coliformes et comment quantifier le degré de contamination. Merci de regarder !

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