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Filamentöse Pilze

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Filamentöse Pilze sind mehrzelligen, eukaryotische Organismen, die oft in großer Zahl im Boden, eine wichtige Rolle im Ökosystem gefunden. Pilze können isoliert, quantifiziert und im Labor untersucht werden.

Pilze sind reichlich in Oberböden und führen wichtige Rollen in Nährstoff Radfahren und Zersetzung von organischen Stoffen und Verunreinigungen. Nicht in der Lage, ihre eigene Nahrung zu synthetisieren ist als Heterotrophe eingestuft und sind aerobe und erfordern daher Sauerstoff.

Kultur-Pilze, Boden Proben sind bekannte Konzentrationen in sterilem Wasser verdünnt, dann vernickelt auf Agarplatten und inkubiert. Die daraus resultierende pilzartigen Kolonien können dann gezählt und identifiziert werden.

Dieses Video wird die Grundsätze hinter der Isolierung, Quantifizierung und Identifizierung von filamentösen Pilzen zu veranschaulichen.

Millionen von Pilzen pro Gramm enthalten in der Regel Böden; Daher sind Verdünnungsreihen gebräuchlich, Bodenproben zur Analyse vorzubereiten. Eine bestimmte Menge an Boden wird eine Dispergierung Lösung hinzugefügt. Aliquote der Suspension werden in einer Pufferlösung in Serie übertragen, bis die Suspension verdünnt ist genug, um diskret pilzartige Kolonien wachsen zu lassen.

Diese Verdünnungen sind dann vernickelt auf Agar-Medien und inkubiert. Sobald sie sichtbare pilzartige Kolonien gebildet haben, können sie gezählt werden. Da davon ausgegangen wird, dass ein einziger Organismus jede pilzartige Kolonie abgeleitet ist, wird der Begriff Kolonie Bildenden Einheiten oder KBE, verwendet, die Anzahl der Organismen berechnet pro Gramm trockene Erde zum Ausdruck zu bringen.

Die meisten Pilze wachsen als Hyphen, die sind lang, Verzweigung Strukturen, die den Hauptmodus des vegetativen Wachstums sind. Aggregationen von Hyphen sind als Myzel bezeichnet. Pilze können auch als einzellige Organismen, mit Hefe wird ein weithin bekanntes Beispiel vorhanden sein.

Pilz Reproduktion kann auf mehrere Arten auftreten. Hyphen-produzierende Pilze können ungeschlechtlich, durch Fragmentierung Hyphen oder von Stielen mit Samen-wie Sporen vermehren. Einzellige Pilze können asexuell durch Knospung vermehren.

Pilze können auch sexuell reproduzieren. Dies ist weniger verbreitet als asexuelle Reproduktion und tritt in der Regel als Reaktion auf ungünstige Umweltbedingungen. In der Herstellung von Hyphen Pilze, zwei reproduktiven Hyphen aus verschiedenen Pilzstämmen können verschmelzen, Erstellung einer Zygote. In einzelne einzellige Pilze werden zwei Zellen von anderen Stämmen verschmelzen.

Fruchtbare Böden enthalten in der Regel im Bereich von 106 Pilz "Einsammlung" pro Gramm Trockengewicht. Brutkörper sind Pilzsporen, Hyphen oder hyphal Fragmente. Mit kultivierbarer Platte zählt, ist eine schnelle, kostengünstige und reproduzierbare Technik, Pilz Inhalte aufzuklären. Ergebnisse können jedoch durch die Tatsache verzerrt werden, die nicht alle Organismen auf Medien Platten Kultur werden.

Rose-Bengal Agarplatten mit Antibiotika wie Streptomycin, dienen in der Regel für Pilzkulturen. Da Bakterien viel zahlreicher als die Pilze in den meisten Böden sind, wählt die ideale Pilzen Medien gegen Bakterienwachstum und gleichzeitig die Pilze zu überleben. Rose-Bengal Farbstoff hemmt das Wachstum der meisten Bakterien und reduziert die Größe der pilzartige Kolonien. Dies ist ideal, und verhindert übermäßiges Wachstum von Pilz Platten sowie controlling Bakterien.

Nun, da wir die Prinzipien hinter Kultivierung filamentöse Pilze kennen, werfen Sie einen Blick auf wie dies im Labor durchgeführt wird.

Sobald die Bodenproben gesammelt haben, bringen sie in das Labor zur Analyse. Berechnen Sie zunächst, den Feuchtigkeitsgehalt des Bodens. Fügen Sie deionisiertes Wasser um den Feuchtigkeitsgehalt auf 15 % zu bringen.

Die Behälter mit Plastikfolie abdecken und sichern mit einem Gummiband um Verdunstung zu begrenzen. Punktion des Films mehrere Male Belüftung zu ermöglichen.

Wiegen Sie die Bodenprobe und Container und Rekord. Inkubation bei Raumtemperatur für eine Woche, damit Wachstum der natürlich vorkommenden Pilze.

Wägen Sie die Bodenproben und Container neu ab und nehmen Sie das Gewicht. Gewichtsverlust durch den Feuchtigkeitsverlust von im Laufe der Woche zu berechnen. Fügen Sie Wasser auf den Boden, um das Gewicht wieder auf den ursprünglichen Wert zu bringen.

10 g für feuchten Boden zu 95 mL destilliertem Wasser hinzufügen und gut mischen. Dies ist die 10-1 -Verdünnung, da 10 g des Bodens ein Volumen von etwa 5 mL hat. Führen Sie vier serielle Verdünnungen von 1 mL zu 9 mL Rohlingen mit Wasser aus dieser Stammlösung.

Als nächstes sammeln Sie acht sterile Rose-Bengal-Streptomycin Agarplatten. Zwei der Platten fügen Sie 0,1 mL Verdünnung Röhre 10-2und verteilt die Agar-Oberfläche mit einem Ethanol-Flamme sterilisiert Glas Streuer. Weil eine Menge von 0,1 mL überzogen ist, macht dies die effektive Verdünnung 10-3.

Eine Woche inkubieren Sie diese Platten in einem dunklen Schrank bei Raumtemperatur.

Zählen Sie nach einer Woche die diskrete Kolonien auf jeder Platte. Platten mit 10 bis 20 pilzartige Kolonien sollten gezählt werden. Beachten Sie und beschreiben Sie Unterscheidungsmerkmale von Platten oder Kolonien zu.

Nehmen Sie einen sauberes Glas-Objektträger und hinterlegen Sie einen Tropfen Lactophenol Montage Flüssigkeit in die Mitte zu. Zange schneiden zur Vermeidung von Kontaminationen, Sie einen Streifen von klaren Tesafilm etwa 3 cm lang. Verwenden Sie ggf. eine sezierenden Nadel, um das Band von der Zange zu befreien.

Wenden Sie die Klebeseite des Bandes an der Oberfläche einer sporulating Pilz-Kolonie, kümmert sich um Überdruck zu vermeiden. Als nächstes wenden Sie die klebende Seite des Bandes mit Spore Probe auf die Montage-Flüssigkeit auf dem Objektträger. Reiben Sie das Band vorsichtig mit einer glatten, flachen Instrument, um Luftblasen zu entfernen.

Anbauträger Band unter einem leistungsstarken Objektiv zu prüfen.

Pilze können durch Prüfung der Fruchtkörper und Sporen mikroskopisch identifiziert werden. Ein Pilze Identifikationsschlüssel kann diesen Prozess unterstützen. Gängigen Pilze beobachtet gehören Penicillium und Aspergillus.

Unter Verwendung der Platten, können die Pilze mit der gleichen Technik wie bei bakteriellen Enumeration aufgelistet werden.

Identifizierung und Kultivierung von Pilzen eignet sich für eine Vielzahl von wissenschaftlichen Anwendungen.

Branchen wie Papier- und Herstellung von Anlagen können filamentöse Pilze verwenden, um Holz in ihrem besonderen Prozess in einer Technik bekannt als Biopulping zu degradieren. Pilze wie weiß-Rot können Hackschnitzel effizient, sich verschlechtern, führt zu verringerte Notwendigkeit für den Einsatz von chemischen oder mechanischen zerdrücken.

Pilze können auch zum Abbau von anderen Materialien, einschließlich bestimmter Arten von biologisch abbaubaren Kunststoffen verwendet werden. Dies kann nützlich sein für Landwirtschaft oder Gärtnerei Anwendungen, wo möglicherweise biologisch abbaubarer Mulchfolien verwendet werden, um temporäre Hindernisse für unerwünschte Pflanzenwachstum zu schaffen.

Pilze sind auch Produzenten von Antibiotika, Verbindungen, die Medizin des 20. Jahrhunderts revolutioniert und weiterhin eine Frontlinie Verteidigung in Infektion heute sein. Penicillin, eine weit verbreitete Antibiotikum wurde isoliert aus der gemeinsamen filamentöse Pilze Penicillium Rubens. Filamentöse Pilze sind bis zum heutigen Tag immer noch isoliert und studierte bei der Suche nach neuen Antibiotika.

Sie habe nur Jupiters Einführung in filamentöse Pilze beobachtet. Sie sollten jetzt verstehen, wie man Kultur filamentöse Pilze aus dem Boden, wie sie zu quantifizieren und Pilzarten allgemein gefunden im Boden zu identifizieren. Danke fürs Zuschauen!

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