Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
Environmental Microbiology

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

RT-PCR을 사용한 환경 검체의 RNA 분석
 
Click here for the English version

RT-PCR을 사용한 환경 검체의 RNA 분석

Overview

출처: 이안 페퍼 박사와 찰스 게르바 박사의 연구소 - 애리조나 대학교
시연 저자: 브래들리 슈미츠

역전사-폴리머라제 연쇄 반응(RT-PCR)은 기존의 PCR-사이클링 온도와 동일한 공정을 수반하여 핵산을 증폭시킵니다. 그러나, 기존의 PCR은 탈옥리보핵산(DNA)만 증폭되는 반면, RT-PCR은 보완적인 DNA(cDNA)의 형성을 통해 리보핵산(RNA)의 증폭을 가능하게 한다. 이를 통해 환경 내에서 발견되는 RNA 기반 유기체는 DNA를 위해 설계된 방법과 기술을 활용하여 분석할 수 있습니다.

환경에서 발견되는 많은 바이러스는 RNA를 유전 물질로 사용합니다. 노로바이러스와같은 여러 RNA 계 바이러스 병원체 및 고추 순온 기질 바이러스(PMMoV)와 같은 지표 유기체는 정량화를 위한 배양 기반 검출 방법이 없습니다. 토양, 물, 농업 등으로부터환경 샘플에서 이러한 RNA 바이러스의 존재를 검출하기 위해, 분자 검사는 DNA로 RNA를 변환하기 위해 RT-PCR에 의존한다. RT-PCR없이, 미생물학자는 인간과 환경 건강에 위험을 제기 수많은 RNA 기반의 바이러스를 분석하고 연구 할 수 없을 것입니다.

RT-PCR은 또한 환경에서 미생물 활성을 측정하는 도구로 사용될 수 있다. 메신저 RNA (mRNA)는 단백질 번역을 위한 단 하나 좌초 템플릿이고, 상이한 mRNA의 수준을 측정하는 것은 미생물이 환경 내에서 발현되고 있는 유전자를 나타냅니다. 유전자 발현을 분석하면 생물체가 다른 환경 조건에서 생존하기 위해 어떤 생물학적 경로를 사용하는지 에 대한 단서를 얻을 수 있습니다. 어떤 경우에는, 유전자 발현은 가혹한 조건에서 가장 잘 살아남을 수 있고 오염된 토양 또는 물의 생물 치료를 위한 기능을 가지고 있는 어떤 유기체를 결정하기 위하여 이용될 수 있습니다.

Principles

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

PCR은 DNA 템플릿의 증폭을 기반으로 하며, 이는 유기체로부터 RNA를 검출하는 데 그 사용을 제한합니다. 그러나 RT-PCR은 역전사(RT)라고 하는 특수 효소를 사용하여 RNA를 사용하여 cDNA를 생성하는 수단을 제공한다. 이러한 cDNA는 종래의 PCR(도1)을이용한 후속 증폭을 위한 시작 템플릿으로 사용될 수 있다.

역전사는 cDNA 합성을 템플릿화하는 데 사용되는 프라이머에 따라 환경 샘플 내에서 발견되는 원하는 제품 또는 전체 핵산 커뮤니티만 증폭하도록 제어될 수 있다. 이것은 중요 한, 토양과 물 샘플은 종종 특정 분석에 대 한 원하지 않는 다양 한 핵산으로 포화. 임의의 미생물에서 발견되는 RNA 서열에 결합할 수 있는 무작위 프라이머는 RT-PCR에서 대부분의 RNA를 검출할 수 있으므로 샘플은 환경에서 다중 유기체의 존재 및 상대적 풍부를 위해 분석될 수 있다. 다른 한편으로는, 서열 특정 프라이머는 하나 또는 몇몇 유기체에서 찾아낸 정확한 순서를 위한 cDNA 합성을 시작합니다. 이를 통해 인간에서 위장질환을 유발할 수 있는 노로바이러스가물 속에서 존재하는지 여부를 결정하는 등 특정 목적을 위해 환경 샘플을 검사할 수 있습니다.


Figure 1
그림 1. 환경 RNA 샘플의 RT-PCR 분석의 단계별 프로세스.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Procedure

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. 샘플 수집 : 토양 샘플

  1. GPS, 좌표 또는 시력을 통해 샘플 위치를 찾습니다.
  2. 무작위 샘플링의 경우, 미생물 서식지의 일반적인 인구 조사를 얻기 위해 지역 내에서 임의의 점을 선택합니다. Transect 샘플링은 스트림베드에 인접한 직선과 같은 지점에서 수집합니다. 그리드 샘플은 일정한 간격으로 지점에서 체계적으로 채취되며 알 수 없거나 가변 영역에서 미생물 커뮤니티를 매핑하는 데 유용합니다.
  3. 3-6 인치 (7.5-15cm) 깊이 내에서 샘플링하면 뿌리 권부체 (식물 뿌리 및 관련 미생물에 의해 직접 영향을받는 토양의 좁은 영역)에 가깝지만 그 안에있는 가장 풍부한 미생물 활성에 대한 액세스를 제공합니다.
  4. 토양 샘플을 수집하려면 손 오거를 땅에 밀어 넣고 미리 정해진 깊이로 비틀어 보냅니다.
  5. 오거를 들어 올립니다. 토양은 오거의 중공 줄기 내에서 발견된다.
  6. 오거 바닥의 토양을 토양 컬렉션 백으로 긁어 넣습니다. 토양을 만지거나 오염시키지 않도록 하십시오.
  7. 가방의 위치, 이름, 날짜 및 시간으로 적절하게 라벨을 지정합니다.
  8. 실험실에서 토양을 2mm 체로 통과하여 자갈과 바위를 제거합니다.
  9. 토양 수분 함량에 대한 토양의 일부를 분석합니다. 이 단계에 대한 자세한 내용은 토양 수분에 대한 JoVE 과학 교육 비디오를 참조하십시오.

2. 샘플 수집 : 물 샘플

  1. GPS, 좌표 또는 시력을 통해 샘플 위치를 찾습니다.
  2. 수납병에 물을 채집합니다. 수집된 물의 양을 기록합니다. 시료내의 미생물이 정량적으로 분석되면, 미생물 농도는 수집된 부피에 기초하여 결정될 수 있다.
  3. 적절한 전자 프로브를 사용하여 실험(온도, pH, 전도도, 염도, 질소 및 인 함량 등)에 필요한 모든 매개변수에 대해 즉시 물을 테스트합니다.
  4. 물 샘플이 들어 있는 병을 얼음이 있는 쿨러에 넣습니다. 쿨러를 실험실로 옮기십시오.

3. RNA 추출

  1. 환경 샘플에서 미생물을 수집하고 농축하려면 지역 사회 핵산 추출에 대한 JoVE 과학 교육 비디오를 참조하십시오.
  2. 제조업체의 지침에 따라 상용 추출 키트를 사용하여 바이러스에서 RNA를 추출합니다.
  3. 먼저 에탄올로 보완된 리시스 버퍼와 샘플을 혼합한 다음 샘플을 스핀 컬럼에 추가합니다.
  4. 약 12,000 x g의 컬럼을 원심분리하고 흐름을 폐기합니다. 열과 원심분리기에 버퍼를 다시 추가합니다.
  5. RNase 가없는 물을 컬럼과 원심분리기에 30 초 동안 RNA를 멸균 1.5mL 저접착 미세 분리 튜브에 넣습니다.

4. 역 전사 - PCR

  1. -20°C 냉동고에서 다음 시약을 검색: dNTP,농축(예를 들어,10x) 역전사 버퍼, 프라이머(이 예에서, 임의의 프라이머). 얼음이나 깨끗한 후드 내부의 실온에서 해동하고, 한 번 해동 얼음에 보관하십시오. 또한 역 전사및 RNase 억제제를 회수하고 얼음에 보관하십시오.
  2. 모든 반응 중 모든 시약을 일정하게 결합하는 "마스터 믹스"를 만드는 데 필요한 시약 볼륨을 계산합니다(샘플 반응의 경우 표 1 참조). 모든 샘플에 대한 충분한 마스터 믹스뿐만 아니라 긍정적 인 제어 (알려진 성적 증명서 템플릿 사용) 및 음성 제어(예 :역 전사없이, 템플릿으로만 물) 반응을 준비합니다. 볼륨에 10%를 추가로 포함합니다.
  3. 마스터 믹스를 1.5mL 저접착 마이크로퍼지 튜브에 조립합니다. 이것은 관의 플라스틱 벽에 시약 분자의 결합을 최소화합니다.
  4. 시약이 해동되면 계산된 볼륨을 미세 분리 튜브에 추가합니다. 부드럽게 소용돌이와 원심 분리기 각 튜브추가 전에. 오염을 방지하기 위해 각 시약을 추가하는 것 사이에 파이펫 팁을 변경해야 합니다.
  5. 모든 시약이 추가 된 후, 소용돌이와 원심 분리는 균일 한 혼합물을 보장하기 위해 마스터 믹스를 합니다. 시약을 -20°C에서 다시 저장에 넣습니다.
  6. 8튜브 PCR 스트립을 준비하고 라벨을 부착하여 각 샘플 또는 제어 반응에 대해 하나의 튜브를 지정합니다.
  7. 알리쿼트 각 튜브에 마스터 믹스의 동일한 볼륨. 이어서, RNA 추출물과 같은 반응 특이적 성분을 추가한다.
  8. 스트립 캡을 PCR 스트립에 단단히 놓고, 스트립 튜브 어댑터가 있는 미니센트심분리기에 원심분리기를 배치하여 모든 액체가 각튜브(그림 2)의바닥에 수집되도록 합니다.
  9. 온도 사이클러에 PCR 스트립을 안전하게 배치합니다. 튜브가 고정되도록 아래로 누릅니다.
  10. 사용 중인 RT에 적합한 프로그램을 실행하도록 열순환기를 설정합니다(샘플 프로토콜의 표 2 참조). 프로그램이 완료되면 튜브에는 cDNA 제품이 포함되어 있으며, 이 제품에는 PCR 증폭이 가능합니다. 자세한 내용은 PCR 및 정량PCR의 JoVE 과학 교육 비디오를 참조하십시오. 사용 전까지 cDNA를 -20°C에 저장합니다.

Figure 2
그림 2. 마스터 믹스와 추출물을 함유한 8튜브 스트립을 덮었다.

시약 반응 1회당 부피(μL)
10x RT 버퍼 2.0
25배 dNTP 0.8
10x 랜덤 프라이머 2.0
멀티스크리브 1.0
Rnase 억제제 1.0
분자 등급 H2O 3.2
총 볼륨 10

표 1. RT 마스터 믹스 성분.

1단계 2단계 3단계 4단계
25°C, 10분 37°C, 120분 85°C, 5분 4 °C, ∞

표 2. RT 반응 열순환기 프로그램.

역전사 폴리머라제 연쇄 반응 또는 RT-PCR은 환경에서 RNA 바이러스 및 미생물 유전자 발현의 검출을 가능하게 한다.

인간에서 박테리아에 세포 유기체와는 달리, 그들의 유전 물질로 DNA를 사용 하 여, 일부 바이러스는 RNA로 만든 게놈, 독감 등 많은 병원성 바이러스를 포함 하 여, 에볼라, 그리고 HIV. 일부 바이러스는 세포 배양에서 세포를 감염시키는 데 사용될 때 발생하는 병원성 표현형을 관찰함으로써 검출될 수 있지만, 대다수는 배양 기반 특성화 방법이없다. RT-PCR은 고감도를 가진 환경에서 이러한 바이러스의 존재를 감지하는 데 사용할 수 있습니다.

동시에 DNA 기반 게놈을 가진 유기체는 DNA 게놈에 인코딩된 유전 정보를 메신저 또는 "m"RNA로 "전사"하여 "표현"한 다음 세포에서 효소 또는 구조적 기능을 수행하기 위해 단백질로 "변환"될 수 있습니다. 미생물이 다양한 유전 적 경로를 켜거나 끄면 환경의 변화에 반응하고 적응함에 따라 RT-PCR을 사용하여 잠재적 인 생태계 평가자로 봉사하기 위해 유전자 발현의 이러한 변화를 모니터링 할 수 있습니다.

이 비디오는 RT-PCR뒤에 있는 원리를 통해 갈 것입니다, 이 기술을 능력을 발휘하기 위하여 일반화된 절차를 설명하고, 마지막으로, 이 방법이 오늘 환경 미생물학에서 적용되고 있는 방법의 몇몇을 검토합니다.

이 절차에는 두 가지 핵심 부분이 있습니다: 생물학적 샘플에서 RNA를 추출한 다음 DNA로의 역전사가 뒤따릅니다.

RNA의 격리는 지질과 단백질을 분해하는 세제를 추가하여 샘플에 있는 세포를 리징하고 기계적 중단을 포함합니다. 바이러스에서 RNA를 추출하는 것은 일반적으로 바이러스의 capsids - 바이러스 입자를 형성하는 힘든 단백질 코트를 분해하기 위해 단백질 소화 효소인 단백질효소를 첨가해야 합니다. 한편, 세포 유기체로부터 RNA를 얻을 때, 리스는 화학적으로 유사한 DNA의 존재에 의해 혼동되는 다운스트림 결과를 피하기 위해 DNA 분해 효소, 또는 DNAases로 취급될 필요가 있을 수 있습니다.

RNA는 그 때 두 가지 방법 중 하나에 있는 lysates에서 정제될 수 있습니다. 산과니디늄 티오시네이트-페놀 클로로폼 추출로 알려진 한 가지 방법에서, 리자테는 그 후 원심분리된 유기 수성 혼합물과 혼합되어 위상을 분리한다. 단백질은 유기 상으로 분할되고, 흐린 중간 단계로 세포 이물질을, 핵산은 수성 상으로 분할됩니다. 상부 수성 상은 그 때 수집될 수 있고, RNA는 물에 있는 핵산의 용해도를 감소시키는 이소프로판올과 같은 알콜의 첨가에 의해 침전됩니다.

컬럼 계 RNA 절연에서, 용액은 알코올과 혼합된 다음 실리카와 같은 음전하 수지와 함께 젤 여과 컬럼을 통과한다. 용액은 핵산의 음전하 인산염 중추가 수지에 결합할 수 있도록 완충 형태로 양전하 이온이 "소금 다리"되도록 준비됩니다. 다른 모든 오염 물질은 씻어. 핵산은 저염 완충제 또는 물을 사용하여 컬럼에서 "용출"됩니다. 단일 좌초 RNA는 이중 좌초 된 DNA보다 음전하가 적기 때문에 특정 농도의 완충액을 사용하여 우선적으로 용출 될 수 있습니다.

일단 고립되면, RNA는 더 화학적으로 안정된 DNA로 변환됩니다. 과학자들은 HIV와 같은 레트로 바이러스에 의해 자연적으로 인코딩 된 효소를 활용했습니다. 이 효소는 역 전사, 또는 "RT"로 알려져 있습니다.

RT는 프라이머로 알려진 뉴클레오티드의 짧은 스트레칭에서 보완 또는 "c"DNA를 합성합니다. 이 프라이머는 실험의 목적에 따라 다른 시퀀스를 가질 수 있습니다. 예를 들어, 프라이머는 특정 유전자 또는 유기체를 검출하기 위해 특정 서열을 갖도록 설계될 수 있다. 일단 합성되면, 이 "첫 번째 가닥" cDNA는 일반 PCR에 의해 증폭될 수 있습니다.

이제 RT-PCR의 원리에 대한 이해를 갖게 되었으므로 환경에서 수집된 RNA 샘플에서 이 기술을 수행하기 위한 프로토콜을 살펴보겠습니다.

절차를 시작하려면 GPS 좌표 또는 시력을 사용하여 샘플 수집 위치를 찾습니다. 지역 내에서 무작위 점을 선택하여 미생물 서식지에 대한 일반적인 조사를 받으십시오.

고체 샘플을 수집하려면 손 오거를 접지 토양으로 밀어 넣고 소정의 깊이로 비틀어보세요. 오거를 들어 올릴 때, 토양은 오거의 중공 줄기 내에서 찾을 수 있습니다.

이 토양은 토양 수집 가방에 직접 긁어 내고 가방은 위치, 이름, 날짜, 수집 시간 및 기타 필요한 정보로 표시되어 있습니다.

토양을 실험실로 옮기고 2mm 체를 통과하여 자갈과 바위를 제거합니다. 토양내 미생물 활성 수준에 대해 유익할 수 있는 수분 함량을 위해 토양샘플을 분석한다. 이렇게 하려면 이 컬렉션의 동영상 "토양의 수분 함량 측정"을 참조하십시오.

물 샘플 수집의 경우 토양 수집과 유사한 관심 있는 장소를 선택하고 물을 멸균 두꺼운 벽으로 된 플라스틱 병에 수집합니다. 수집된 물의 양을 기록하십시오. 온도, pH 및 염분과 같은 매개 변수에 대해 즉시 물을 테스트하여 샘플에서 예상되는 미생물 수준에 대한 중요한 정보를 제공할 수 있습니다. 그런 다음 병을 쿨러에 넣고 실험실로 옮습니다.

바이러스와 같은 미생물은 환경 샘플로부터 수집 및 농축된다.

RNA는 제조업체의 지시에 따라 상용 RNA 추출 키트를 사용하여 스핀 컬럼 방법에 의해 수집된 바이러스로부터 추출될 수 있다. 에탄올로 보충된 리시스 버퍼는 먼저 샘플과 혼합됩니다. 적절한 스핀 컬럼 수를 수집 튜브에 넣은 다음 샘플을 컬럼 행렬에 적용합니다. 핵산이 컬럼에 결합하고 액체 흐름을 폐기할 수 있도록 1-2 분 동안 약 12,000 x g의 컬럼을 원심 분리합니다.

열과 원심분리기에 버퍼를 다시 추가합니다. 컬럼을 새로운 멸균 1.5mL 저유착 마이크로퍼지 튜브에 넣습니다. 그런 다음 RNA를 저하시키는 효소인 RNases가 없는 물을 30초 동안 컬럼과 원심분리기에 추가하여 RNA를 엘로우시합니다. 용출된 RNA는 사용 전까지 -80°C로 저장할 수 있다.

실험 전에, 적절한 프라이머는 특정 미생물의 존재에 대한 마커 역할을 할 수있는 관심의 순서를 감지하기 위해 설계되어야한다.

-20°C에 저장된 RT 시약을 꺼내 얼음(또는 실온)에 냉동 시약을 해동합니다. 이들은 뉴클레오티드, 역전사 완충제 및 프라이머를 포함한다. 해동되면 시약을 얼음 위에 두십시오. 역전사 효소및 RNase 억제제는 항상 얼음 위에 보관되어야 합니다.

시약이 해동하는 동안 반응의 구성 요소의 부량과 농도를 계산합니다. 시약이 해동되면 각 튜브를 부드럽게 소용돌이치게 하여 내용이 잘 섞이도록 합니다.

오염을 방지하기 위해 라미나르 플로우 후드에서 작업하여 마스터 믹스에 구성 요소를 조립하여 각 PCR 튜브에 추가합니다. Eppendorf 튜브에서 마스터 믹스를 조립할 때 각 시약 사이에 파이펫 팁을 변경하여 오염을 방지해야 합니다. 모든 시약이 Eppendorf 튜브에 추가 된 후, 부드럽게 소용돌이와 균일 한 혼합물을 보장하기 위해 마스터 믹스 튜브아래로 회전.

PCR 튜브 세트에 레이블을 지정하여 컨트롤을 포함해야 합니다. 각 튜브에 마스터 믹스의 동일한 볼륨을 알리쿼트. 이어서, RNA 추출물 또는 물과 같은 반응 특이적 성분을 추가하여 음의 대조를 이에 부릅니다.

모든 구성 요소가 추가되면 튜브를 열순환에 배치하고 역전사 프로그램을 실행하도록 설정합니다. 그 때 cDNA는 PCR 증폭을 실시할 수 있다. 이 단계에 대한 자세한 설명은 PCR에서 이 컬렉션의 비디오를 참조하십시오.

PCR이 완료되면 일부 PCR 제품을 아가로즈 젤에 분리하고 시각화할 수 있습니다. 예를 들어, 유전자 특이적 프라이머는 RNA 바이러스의 존재를 검출하기 위해 여기에서 사용되었다. 예상 된 크기의 밴드는 RT-PCR 반응에서 얻을 수 있지만 음의 대조군에서, 테스트되는 물 샘플에서이 바이러스의 존재를 나타내는.

RT-PCR에 의한 RNA 기반 미생물의 식별은 생태 건강, 환경 위험 및 생물 다양성의 보존에 대한 분석을 가능하게 합니다.

오염된 토양과 물에서 탄화수소와 용매를 정화하기 위해 미생물을 사용하는 것은 생태학적 개선 대안을 나타냅니다. 네이티브 미생물 유전자 발현을 이해하면 이러한 조건 하에서 오염 물질을 분해하는 특정 미생물 경로를 강조 할 수 있습니다. RT-PCR은 종종 이러한 환경 샘플에서 mRNA를 증폭하는 데 활용됩니다.

공중 위생 측정은 수시로 환경에 있는 감염의 바이러스성 근원의 급속한 감시를 요구합니다. 예를 들어, 조류 인플루엔자는 전염성이 매우 높으며 가금류, 가축, 심지어 인간까지 빠르게 퍼질 수 있습니다. 이 특별한 예에서, 연구원은 야생 조류에 의해 퍼진 조류 인플루엔자의 위협을 찾아냈습니다.

휴대용 RT-PCR 설정 및 장치를 사용하여, 그들은 조기에 감염을 감지하고 전송을 방지하기 위해, 심지어 원격 지역에서 야생 조류의 범위를 선별.

마지막으로 RT-PCR은 북미의 포도나무를 심각하게 손상시키는 질병의 호스트인 유리 날개 날카로운 사수, 호팔로디스카 비트리페스타 와 같은 해충을 대상으로 개발중인 "생체 살충제"를 특성화하는 데 사용할 수 있습니다. 이 곤충을 감염시키기 위한 에이전트로서 새로운 단일 좌초 RNA 바이러스가 개발되고 있습니다. 호발로디스크 세포 배양과 바이러스 부하의 RT-PCR 확인의 조합을 사용하여, 이 저자는 생물학적 통제제로 사용하기 위하여 바이러스의 고농도를 전파할 수 있었습니다.

RT-PCR에 의한 RNA 기반 환경 유기체 분석에 대한 JoVE의 소개를 방금 시청했습니다. 이제 프로토콜의 이론, 연구에 기술을 적용하는 방법 및 오늘날 현장에서 사용되는 몇 가지 방법을 이해해야 합니다. 시청해 주셔서 감사합니다!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

RT-PCR이 완료되면 일부 PCR 제품을 아가로즈젤(그림 3)에분리하고 시각화할 수 있다. 이 예에서, 유전자 특이적 프라이머는 RNA 바이러스의 존재를 검출하기 위해 사용되었다. 예상 된 크기의 밴드는 두 개의 샘플과 양성 제어 반응에서 얻어지지만 음의 대조군에서 얻어지며, 테스트중인 두 개의 물 샘플에서이 바이러스의 존재를 나타냅니다.

Figure 3
그림 3. RT-PCR 제품의 젤 전기전도. M: DNA 크기 마커; P: 긍정적인 제어; N: 음수 제어. 4개의 물 샘플에서 RNA를 이용한 반응은 차선 1, 2, 3 및 5에서 실행되었다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Applications and Summary

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

RT-PCR은 RNA 템플릿에서 cDNA를 만드는 데 필요합니다. 이를 통해 RNA 기반 미생물은 DNA를 위해 개발된 분자 분석을 활용하여 분석할 수 있습니다. CDNA가 합성되면 PCR 어약은 환경 샘플 내에서 RNA 기반 미생물의 존재 또는 부재를 결정할 수 있습니다. 이를 통해 추가 다운스트림 분석을 통해 미생물 생태학, 건강 위험 및 환경 위험을 파악할 수 있습니다.

RT-PCR은 또한 어떤 유전자가 환경에서 발현되고 있는지 관찰하는 수단으로 mRNA를 분석하는 데 활용될 수 있다. 이것은 미생물이 특정 환경 조건에서 살아남기 위하여 의지하는 단백질 및 통로에 관하여 정보를 제공합니다. 유전자 발현 분석은 탄화수소 또는 염소 용매와 같은 환경 오염 물질을 분해하는 미생물 경로를 식별할 수 있으며, 이러한 경로를 가진 미생물은 생체 교정을 위해 활용될 수 있습니다.

위험 평가는 인간 및 환경 건강 위험을 분석하기 위해 RT-PCR을 통합합니다. RT와 정량적 PCR을 결합하면 RNA 바이러스를 샘플 내에서 열거할 수 있으므로 정량적 미생물 위험 평가(QMRA)를 위해 인간 및 환경 노출을 계산할 수 있습니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter