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Enumeración de las algas mediante metodología cultivable
 

Enumeración de las algas mediante metodología cultivable

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Las algas son organismos fotosintetizadores que viven en una variedad de ambientes. Suelo vivienda algas puede cultivarse en el laboratorio y su concentración enumerados mediante cálculos sencillos.

Las algas son un grupo muy heterogéneo de organismos que tienen un rasgo común, es decir, la posesión de pigmentos fotosintéticos, clorofila comúnmente. La gran mayoría de las algas es microscópica, sin embargo, la definición exacta del grupo es controvertida y también incluye algas marinas, que son típicamente macroscópicos.

En el entorno de las algas pueden causar problemas en las aguas superficiales como lagos o embalses, formando floraciones algales que agotan los nutrientes del agua, bloqueando la luz pasando más allá de la superficie del agua y liberación de toxinas. La capacidad de enumerar las algas en muestras permite a los científicos evaluar la salud de un ecosistema y el potencial riesgo de crecimiento excesivo de algas.

Las poblaciones de algas en los suelos ocurren con frecuencia en unos 10 mil células por gramo. Estos números son generalmente inferiores a las correspondientes concentraciones de bacterias, hongos o actinomicetos, como las algas necesitan luz solar para la fotosíntesis, que no pueden penetrar por debajo de la superficie del suelo.

Este video ilustra cómo algas del suelo en el laboratorio de la cultura y cómo la concentración de algas en la muestra de suelo a partir de enumerar.

Las algas tienen efectos beneficiosos sobre los ecosistemas. Algas verde-azules o cianobacterias, tienen la capacidad de fijar nitrógeno de la atmósfera, haciéndolos útiles en el aumento de nitrógeno del suelo en ambientes semiáridos y también como una herramienta potencial para la producción de biocombustibles.

Otras algas son eucariotas y van desde unicelulares hasta organismos multicelulares complejos, como algas. Estos incluyen algas, euglenoides, dinoflagelados y diatomeas, algas pardas y algas rojas.

Las algas son fototróficas, obtención de energía de la fotosíntesis y el carbono de la biomasa a partir de dióxido de carbono. Como resultado, se puede cultivar en medios constituidos totalmente de nutrientes inorgánicos, sin un sustrato de carbono orgánico añadido. Esta falta de sustrato orgánico evita el crecimiento de bacterias heterotróficas, que dependen del exterior carbono orgánico para el crecimiento.

A las algas de la cultura para la enumeración, suelo en serie se diluyen las muestras diez veces a 10-6 g suelo / mL, cultivadas en medios de crecimiento. Se hacen varias repeticiones para cada dilución. Luego se incuban en un área bien iluminada durante 4 semanas permitir el crecimiento de las algas.

La presencia de algas en cualquier dilución es determinada por un signo positivo de crecimiento en el medio, que normalmente aparecerá como una baba verde. Por último, se consultan las tablas MPN empíricamente desarrolladas diseñadas para el crecimiento de las algas, lo que permite al usuario determinar la concentración de algas original basada en el crecimiento en dilución repeticiones. El método MPN se basa en la dilución seriada de muestras tal que las algas se diluyen a la extinción, lo que significa que a cierta dilución, no crecimiento de las algas sobreviene.

Ahora que estamos familiarizados con los conceptos de crecimiento y enumeración de las algas de las muestras, vamos a echar un vistazo a cómo esto se lleva a cabo en el laboratorio.

Para empezar el experimento, primero peso 10 g de suelo húmedo o bien han recogido húmedos del campo, o rehidratado y permanecía húmedo durante 2 a 3 días. El suelo debe pero no saturados.

A continuación, preparar una serie de dilución multiplicado agregando 10 gramos de suelo a 95 mL de solución de Bristol modificado, o MBS. Esta etiqueta como suspensión A.

Después de agitar vigorosamente, seguir con la serie de dilución mediante la adición de 1 mL de la suspensión A 9 mL de MBS en un tubo de ensayo. Seguir esta serie de diluciones multiplicado otra 4 veces dando diluciones hasta 10-6 g / mL.

A continuación, inocular 5 tubos replicados, cada que contiene 9 mL de MBS con 1 mL de cada una de las diluciones 10-1 a 10-5. Esto resulta en 5 tubos de repeticiones para cada dilución de 10-2 a 10-6. Tapa los tubos libremente.

Por último, incubar los tubos por un completo 4 semanas en un área expuesta a la luz solar. Observar los tubos para el crecimiento de las algas una vez cada 7 días. Tubos de exponer el crecimiento de las algas aparecerá verdes.

Análisis número Probable o MPN, la mayoría es un método matemático utilizado para enumerar microorganismos cultivados de dilución de un sustrato inicial concentrado. Teniendo en cuenta los factores de dilución de las soluciones y el número de tubos que muestran signos positivos de crecimiento en cada dilución, el número más probable de organismos por gramo de muestra de suelo original puede calcularse mediante una fórmula simple y tabla MPN.

Para calcular el MPN, la dilución más alta con el mayor número de tubos positivos de la replicación se asigna la etiqueta de p1, en este caso, las repeticiones del tubo C. En contraste, algunos de los tubos de D & E son negativos sin signos de crecimiento de las algas.

El número de tubos en las dos diluciones mayores que muestran un crecimiento positivo se etiqueta como p2 y p3. Aquí, p2 = D y p3 = E.

El valor de p1 puede encontrarse mirando hacia abajo de la primera columna de la tabla de la MPN. El mismo debe realizarse con la columna p2 . Finalmente, el valor de p3, en la parte superior, se utiliza para intersectar dos definido por p1 y p2, para dar un valor del número más probable de organismos por mL.

A continuación, para calcular la concentración de organismos por gramo de la muestra original de suelo, este valor es dividido por la concentración del suelo en la dilución a la que fue asignada p2 . La siguiente ecuación se utiliza para definir el número de organismos por gramo de suelo.

MPN análisis y enumeración de algas tienen una amplia gama de aplicaciones, algunas de las cuales son exploradas aquí.

Este método de cultivo de algas enumeración puede utilizarse en una variedad de ajustes. Se puede aplicar a ríos o lagos para determinar niveles de algas y evaluar los riesgos de las floraciones de algas nocivas. Alternativamente, puede utilizarse para evaluar la limpieza y la seguridad de las aguas más directamente utilizados por los seres humanos, incluyendo piscinas, fuentes de agua u otras fuentes de agua potable. Idealmente, en muestras de agua potable y piscinas, no hay algas presentes.

El análisis de la MPN para enumeración puede aplicarse también a otros microorganismos no algas. Por ejemplo, calidad del agua puede ser evaluada utilizando organismos indicadores tales como coliformes o e. coli. Aquí, las muestras pueden cultivarse con medios que contienen productos químicos que se encuentran alterados para producir color o fluorescencia en presencia de los organismos indicadores. Mediante la realización de múltiples pequeñas réplicas de este experimento en celdas individuales, con las muestras diluidas a una concentración conocida, la proporción de células positivas puede hacer referencia a una tabla MPN para el organismo indicador específico y la concentración inicial en las muestras determinada.

También se pueden cultivar algas para aplicaciones comerciales. Por ejemplo, algunos tipos de biofertilizantes utilizan las algas verdiazul, que puede actuar como simbiontes con plantas, ayudando a su accesorio y asimilación de nitrógeno, que es particularmente útil en ayudar al crecimiento del cultivo en áreas con suelos pobres. Del mismo modo, se pueden cultivar algas para biocombustibles, o como una fuente de nutrientes rico alimento para el ganado.

Sólo ha visto introducción de Zeus cultura algas y enumeración. Ahora debería entender cómo diluir las muestras de suelo para el crecimiento de las algas, cómo cultivar las algas en el laboratorio y cómo la concentración de algas de sus muestras a partir de enumerar. ¡Gracias por ver!

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