Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
Lab Animal Research

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

 
Click here for the English version

זיהוי מכרסמים II

Overview

מקור: קיי סטיוארט, RVT, RLATG, CMAR; ואלרי א. שרודר, אר.די.ג'י, אר-אל-ג'י. אוניברסיטת נוטרדאם, IN

רשומות בעלי חיים חייבות להישמר במדויק כדי להבטיח שאיסוף הנתונים נכון. הרשומות נעות בין שמירה על מידע על כרטיסי כלוב לבין מסד נתונים מפורט עם כל המידע הרלוונטי על כל בעל חיים. המרכיב העיקרי של תיעוד הוא זיהוי אישי של חיות מחקר. ישנן מגוון שיטות המתאימות לזיהוי עכברים וחולדות. סרטון זה מתאר את הטכניקות הפרוצדורליות לקעקוע, מיקום שבבים ושיטות זיהוי זמניות, וגם בוחן את היתרונות של כל אחד מהם.

Principles

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

השימוש בקעקוע זנב מועיל בפרוטוקולי מחקר רבים. קעקועי זנב הם אידיאליים עבור בעל חיים כי הוא להיות בתמונה במכונת MRI, או אחד כי הוא נטייה גנטית דרמטיטיס כיבית. לזיהוי מהיר של בעל חיים בכלוב, מבלי לרסן אותו, קעקוע הזנב הוא דמיוני בקלות. עם זאת, טכניקה זו דורשת מיומנות, תרגול, ויד יציבה; ציוד מיוחד נדרש גם כן. 1

פרוטוקולים ניסיוניים עשויים לדרוש גנוטיפינג של יילודים כבר ביום הראשון. כתוצאה מכך, חיוני כי גורים אלה להיות מזוהה לצמיתות. בגיל צעיר זה, הפינה האוזן אינם מפותחים מספיק כדי להכניס תג אוזן, ועדיין לא ניתן להשתמש באגרוף אוזניים עליהם. בעבר, זה היה נפוץ עבור חוקר להשתמש בקוד הסרת בוהן כדי לזהות יילודים. עם זאת, זה היה מלחיץ הן את החיה הצעירה ואת הסכר, ולכן נחשב לא אנושי. 2 השימוש בקעקוע בוהן מאפשר לבעלי החיים להיות מזוהים לצמיתות עד שהם גדולים מספיק לתיוג אוזניים או אגרוף באוזן. 3

למרות תהליך ההשתלה של שבב הוא קל יחסית, ישנם מספר גורמים המגבילים את התועלת שלה לזיהוי בעכברים. השבבים הסטריליים הם בגודל של גרגר גדול של אורז, ודורשים מחט 10 עד 12 מד למשלוח. לכן, הם גדולים מאוד עבור עכבר. העלות של שבבים ומכשיר הקריאה יכול גם להיות אוסר, כמו תוחלת החיים של העכבר הוא קצר מספר בעלי החיים הוא בדרך כלל נרחב. בעלי חיים המיועדים להידמו במכונת MRI אינם יכולים להיות בהם שתלים. עם זאת, אם יש קבוצה של בעלי חיים יקרי ערך שיש לזהות לצמיתות, ניתן להשתמש בשבבים זעירים. 4

מחקרים אקוטיים הדורשים זיהוי בעלי חיים במשך שעות, או כמה ימים, אינם מחייבים שימוש בזיהוי קבוע. סמנים לא טוקסיקיים מיוצרים במיוחד לצביעת פרוות בעלי החיים, והם זמינים במספר צבעים. צבעי סמן אלה יכולים להישאר גלויים במשך מספר שבועות. ניתן להשתמש בסמנים גם בשילוב עם שיטות אחרות כדי לזהות בקלות בעלי חיים ספציפיים בקבוצה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Procedure

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. קעקוע זנב

קעקועי זנב נקראים בקלות ללא צורך לטפל בחיה.

Figure 1
איור 1. קעקוע זנב על עכברים בוגרים

  1. הכן את ציוד הקעקוע בהתאם להוראות היצרן. נדרשת כמות קטנה של דיו. צבע שחור צריך לשמש לעכברים לבקן או חולדות, וצבע ירוק לעכברים פיגמנטיים או חולדות.
  2. הכן את החיות לזיהוי.
    הערה: כדי למזער את החשש או המצוקה, קעקוע זנב צריך להתבצע בחדר הליך ולא באזור דיור לבעלי חיים.
    1. לרסן כראוי את החיה לקעקוע כך שהתנועה היא מינימלית.
    2. חולדות גנג מרוסנות באמצעות מחורצת מפלסטיק, כאשר שפת הכוס מאובטחת מתחת לברגים על משטח הקעקוע, והזנב מתרחב דרך החריץ.
    3. עכברים בוגרים יכולים להיות מרוסנים באמצעות מרסן, עם הזנב משך מתוח מן הפתח ואת אוגן של הכוס מוחזק במקום באמצעות פלטפורמה או מכשיר אחר.
    4. נקו את הזנב עם כמות קטנה של מנקה רקמות מדולל מוחל עם צמר גפן. חולדות מבוגרות בדרך כלל יש הצטברות של קנה מידה ופסולת על הזנב כי יש לנקות לפני החלת הקעקוע. קרצוף סבון ומים של הזנב יסיר את רוב הלכלוך והפסולת. ייבשו את הזנב היטב לפני שתמשיכו.
    5. יש למרוח שמן רקמות על העור עם ספוגית עם קצה כותנה ממש לפני הקעקוע. שמן הרקמות נחוץ כדי למזער את נזקי הרקמות על ידי ריכוך העור ושמן מחט הקעקוע. בנוסף, השמן ממיס כל לכלוך שלא הוסר על ידי תהליך הניקוי ומונע כתמי דיו של עור nontattooed.
  3. החל את הקעקוע.
    1. טובלים את קצה המחט בפיגמנט כשהמכונה כבויה.
    2. תביא את קצה המחט לאתר הקעקועים כשהאקדח מופעל על ידי דוושת הרגל.
    3. הפוך קצר, אפילו משיכות בכיוון אחד. ספרות ואותיות צריכות להיות מקועקעות באופן כזה, כך שהם בנויים במקטעים עם זוויות ועיקולים מינימליים (במידת האפשר).
    4. לחדור עמוק מספיק לתוך הדרמיס עם המחט לתצהיר פיגמנט קבוע. שינוי בצליל המחט הפעילה יכול לעזור להבחין בעומק.
    5. גש לעור עם המחט בזווית של 90o לתצהיר הולם של פיגמנט.
  4. ניקוי וטיפול לאחר קעקועים
    1. כתם (לא לנגב) את הקעקוע הושלם של פיגמנט עודף עם מגבת נייר.
    2. נוכחות של דם על הקעקוע או מגבת הנייר מצביעה על כך הקעקוע נעשה עמוק מדי, ולכן לא סביר להיות קבוע.
    3. לחזק אזורים דקים של דמויות קעקוע עם פיגמנט נוסף. הדמויות מחוזקות בפיגמנט המופקד במקביל לפיגמנט שכבר הופקד, אך לא על גבי הפיגמנט שכבר הופקד.
    4. כדי להוסיף פיגמנט נוסף, לטבול את קצה המחט לתוך מאגר הצבע עבור כל שני תווים עבור עכברים וכל תו אחד עבור חולדות.
    5. הסיבות לקעקועים דוהים כוללות כמויות לא מספקות של פיגמנט, קעקועים רדודים מדי, קעקועים שנעשו עמוק מדי, זווית לא הולמת של המחט לעור, מחטים קהות או מכורות בשימוש, או הקעקוע שנעשה מהר מדי.
    6. לנקות ביסודיות את ציוד הקעקוע לאחר כל שימוש על פי הוראות היצרן.

2. קעקוע בוהן של יילודים

פרוטוקולים ניסיוניים יכולים לדרוש genotyping של יילודים כבר ביום הראשון, מה שהופך את זה חיוני כי גורים אלה להיות מזוהה לצמיתות. השימוש בקעקוע בוהן מאפשר לבעלי החיים להיות מזוהים עד שהם גדולים מספיק עבור תיוג אוזניים או אגרוף באוזן.

Figure 2
איור 2. טכניקת האיפוק המתאימה לקעקוע עכבר ניאון. לרומח יש את הצבע הירוק על הקצה.

  1. לרסן גורים מרוסנים.
    1. הניאון ביד על כרית גזה. מקם את כף הרגל בין האגודל לבין הנוכל של האצבע המורה כדי לחשוף את הבוהן הנבחרת, או בהונות, לקעקוע.
    2. החזק את כף הרגל קרוב לבהונות כך שהבוהן יש משטח מוצק מאחוריו, מניעתו להתכופף.
    3. אין לתגרות את הרגל בעת מיקום כף הרגל. גורים מאופקים עשויים להתנועע, אך לא נשמע בהכרח קול.
  2. הכינו את הציוד.
    1. בחר רומח בעלי חיים גולדן רוד 4.5 מ"מ.
    2. מניחים נקודה קטנה של משחת קעקוע ירוק על משטח לא נקבובי; רדיד אלומיניום עובד טוב.
    3. טובלים רק את קצה הרומח במשחה לקעקועים.
    4. השתמש בכמות קטנה בלבד של הדבקה.
  3. החל את הקעקוע.
    1. תקע את הבוהן הרצויה עם הרומח גולדן רוד על פי קוד זיהוי.
    2. לנקב את העור כדי להציג את הדבק לתוך העור, משאיר סימן.
    3. תדקור את אותה נקודה שלוש פעמים כדי להבטיח חדירה נכונה.
    4. הימנע לחטט כל כך עמוק כי בוהן מדממת; זה יכול לגרום לקעקוע חלש יותר.
  4. ניקוי וטיפול לאחר קעקועים
    1. מכותים בעדינות את המקום עם מגבת/מגבת סופגת להסרת הדבק עודף.
    2. אין לנסות לנקות עודף הדבק מהרגל או מהגוף.
    3. החזירו את החיה לכלוב שלה.
    4. כאשר גורים מניקה מקועקעים, מומלץ גם לקעקע את הסכר. זה עשוי למנוע ממנה מתגובה מוגזמת הדבק על הגורים, אשר יכול להוביל טיפוח מוגזם של הקעקוע.
    5. השתמש lancet חדש לכל המלטה.
    6. הקעקועים צריכים להיות מאומתים ביום שלאחר ההליך. בצעו מחדש את הקעקוע אם הנקודות חלשות או לא נראות לעין. אם הנקודות גלויות יום לאחר הקעקוע, הם צריכים להישאר גלויים לכל החיים של החיה.

3. קעקוע בוהן של חולדות ועכברים בוגרים

כאשר המלטה של יילודים מקועקעת, מוצע כי האם גם להיות מקועקע, כך הדבק על גוריה אינו זר לה.

  1. איפוק של החיה.
    1. לרסן את החיה באמצעות חרוט פלסטיק או מרסן פרספקס המאפשר גישה לרגליים האחוריות.
    2. תרחיב את הרגל ממכשיר האיפוק.
    3. מקם את כף הרגל בין האגודל לנוכל של האצבע המורה כדי לחשוף את הבוהן הנבחרת, או בהונות, לקעקוע
    4. החזק את כף הרגל קרוב לבהונות כך שהבוהן יש משטח מוצק מאחוריו, מניעת בוהן להתכופף.
    5. אין לתגרות את הרגל בעת מיקום כף הרגל. מבוגרים מרוסנים עשויים לנסות למשוך את כף הרגל.
  2. הכינו את הציוד.
    1. בחר רומח בעלי חיים גולדן רוד 5 מ"מ.
    2. מניחים נקודה קטנה של משחת קעקוע ירוק על משטח לא נקבובי; רדיד אלומיניום עובד טוב.
    3. טובלים רק את קצה הרומח במשחה לקעקועים.
    4. השתמש בכמות קטנה בלבד של הדבקה.
  3. החל את הקעקוע.
    1. תקע את הבוהן הרצויה עם הרומח גולדן רוד על פי קוד זיהוי.
    2. לנקב את העור כדי להציג את הדבק לתוך העור, משאיר סימן.
    3. תדקור את אותה נקודה שלוש פעמים כדי להבטיח חדירה נכונה.
    4. הימנע לחטט כל כך עמוק כי בוהן מדממת; זה יכול לגרום לקעקוע חלש יותר.
  4. ניקוי וטיפול לאחר קעקועים
    1. מכתימים בעדינות את הנקודה על מגבת/מגבת סופגת כדי להסיר עודף הדבק.
    2. אין לנסות לנקות עודף הדבק מהרגל או מהגוף.
    3. החזירו את החיה לכלוב שלה.
    4. השתמש lancet חדש לכל חיה.
    5. הקעקועים צריכים להיות מאומתים ביום שלאחר ההליך. בצעו מחדש את הקעקוע אם הנקודות חלשות או לא נראות לעין. אם הנקודות גלויות יום לאחר הקעקוע, הם צריכים להישאר גלויים לכל החיים של החיה.

4. שבבים זעירים

ההשתלה של שבב RFID היא שיטה נפוצה לזיהוי בעלי חיים.

  1. טענו את השבב לתוך ההחלמה, או בחרו מזרק טעון מראש.
  2. לרסן את החיה באמצעות צינור ריסון פרספקס המאפשר אחיזה של העור על הכתפיים.
  3. אוהל העור, יצירת כיס.
  4. מניחים את המחט דרך העור, משופעים ומקבילים לעמוד השדרה, ומפנים אותה לכיוון הזנב.
  5. פלט את השבב בתת עור.
  6. למשוך את המחט ולצבוט את העור סגור בנקודת ההזרקה. זה מונע השבב מלעקוב אחר המחט מתוך העור. המשך להפעיל לחץ כדי לספק hemostasis עבור כל דימום בעור.
  7. הסר את החיה ממכשיר האיפוק ולסרוק את השבב כדי לאשר את קוד הזיהוי.

Figure 3
איור 3. מיקום שבבים בחולדות בוגרות.

5. זיהוי זמני לעכברים

צבעים לא טוקסיקיים וסמנים בעלי חיים יכולים לשמש לזיהוי זמני של עכברים.

  1. ריסנו את העכבר כך שהאזור שבין השכם נגיש לסימונים על הפרווה.
  2. הנח סמן, נקודה או פס של צבע על הפרווה באזור זה. אזור זה משמש כדי למנוע את החיה להסיר את הסימון בזמן הטיפוח.
  3. בדוק את הסימון מעת לעת אם אתה משתמש בו כמזהה היחיד במשך יותר מכמה ימים.
  4. הזנב יכול לשמש גם עבור משכי זמן קצרים. עם זאת, החיה עשויה להסיר ממנה סימן בזמן הטיפוח.

6. זיהוי זמני לחולדות

  1. ריסנו את החולדה כך שהאזור ליישום צבע או סימון יהיה נגיש בקלות. במקרים מסוימים, כאשר יש צורך רק פס או נקודה, החיה לא תצטרך להיות מרוסנת אבל מותר לנוע בחופשיות בכלוב.
  2. איפוק ידני על ידי אחיזת הזנב והחזקתו מתוחה בעת החלת הזיהוי נעשה בדרך כלל.
  3. אימוביליזציה זמנית באמצעות הרדמה משאיפה יכולה להיעשות עבור בעלי חיים שבירים.
  4. בדוק את הסימון מעת לעת אם אתה משתמש בשיטה זו כמזהה היחיד במשך יותר מכמה ימים.

היכולת לזהות חיות מחקר בודדות היא היבט חיוני של תיעוד מדעי ואיסוף נתונים. הבחנה בין בעלי חיים מבטיחה כי הנושא הנכון משמש להליך הניסויי המיועד.

ישנן מספר שיטות קבועות וזמניות שבהן מדענים משתמשים כדי לזהות חיות מעבדה בודדות. בסרטון זה, נדון בשיטות הכוללות קעקוע זנב מכרסם בוגר, בהונות ניאון ובהונות בוגרות. לאחר מכן, נגע בטכניקת מיקום השבבים המבוצעת בדרך כלל בחולדות בוגרות, ואחריה שיטת הזיהוי הזמנית האוניברסלית המשתמשת בצבעים לא רעילים.

לפני שנתעמק בפרוטוקולים של שיטות אלה, הבה נסקור את השיקולים, היתרונות והחסרונות של כל אחת מהטכניקות הללו. קעקוע זנב מועיל בפרוטוקולי מחקר רבים, כגון ניסויים הכוללים הדמיית MRI או אלה שבהם בעלי חיים נוטים גנטית לתנאי עור כולל דרמטיטיס כיבית. יתרון נוסף של קעקועי זנב הוא שהם דמיינו בקלות מבלי לרסן את החיה באופן ידני.

פרוטוקולים ניסיוניים מסוימים דורשים genotyping של יילודים כבר ביום הראשון, מה שהופך אותו חיוני כי גורים אלה להיות מזוהה לצמיתות. השימוש בקעקוע בוהן מאפשר לבעלי חיים כאלה להיות מזוהים עד שהם גדולים מספיק עבור תיוג אוזניים או אגרוף באוזן. מומלץ למרוח קעקוע בוהן דומה על האם הבוגרת כדי למנוע ממנה להגיב יתר על המידה ולטפח יתר על המידה את הקעקוע החדש של הגור שלה. למרות שיש מספר יתרונות לשימוש בשיטה זו, החיסרון הוא כי ההליך דורש מיומנות, בפועל, יד יציבה וציוד מיוחד.

שיטת הזיהוי הקבועה הבאה הנדונה היא שבבים זעירים. אמנם, השתלת שבבים היא תהליך קל יחסית, ישנם מספר גורמים המגבילים את התועלת שלה. ראשית, שבבים אלה הם בערך בגודל של גרגר גדול של אורז ודורשים מחט 10-12 מד להשתלה, שהוא גדול מדי עבור עכבר, ובכך להגביל את השיטה לחולדות מבוגרות. שנית, שבבים הם יקרים ולכן אינם אידיאליים לזיהוי מספר גדול של בעלי חיים. לבסוף, שבבים לא ניתן להשתמש בניסויים מעורבים MRI. עם זאת, אם יש קבוצה של בעלי חיים יקרי ערך כמו בעלי חיים מגדלים עם גנטיקה ייחודית שיש לזהות לצמיתות, ניתן להשתמש במיקרו-שבבים.

השיטה האחרונה שנדון בה היא זיהוי זמני באמצעות סמנים לא רעילים. הסמנים הלא רעילים נועדו לצביעת פרוותם של חיות מחקר. שיטה זו אידיאלית למחקרים קצרי טווח הדורשים זיהוי בעלי חיים רק כמה שעות או ימים, אם כי הצבעים יכולים להישאר גלויים במשך מספר שבועות. חלק מהחוקרים משתמשים בסמנים אלה בשילוב עם שיטות זיהוי אחרות כדי לזהות בקלות בעלי חיים ספציפיים בקבוצה.

עכשיו כשדיברנו על הרקע, בואו נלמד את הנהלים, החל מקעקוע זנב. כאן, אנו להדגים את ההליך על עכברים בוגרים, אבל אותו הדבר ניתן להחיל על גמד וחולדות מבוגרות.

כדי למזער כל חשש או מצוקה לבעלי החיים, קעקוע זנב צריך להתבצע בחדר ההליך ולא באזור דיור בעלי חיים. לפני החלת הקעקוע, לרסן את העכבר באמצעות מרסן, עם הזנב משך מתוח מהפתח. האוגן של הכוס מוחזק במקום באמצעות פלטפורמת זכוכית מיוחדת. לאחר מכן, לנקות את הזנב עם כמות קטנה של מנקה רקמות מדולל על ספוגית כותנה. שלב זה חשוב כדי להסיר כל הצטברות של קנה מידה ופסולת שעלולה להפריע לקעקוע. לאחר מכן, להחיל שמן רקמות על העור הזנב עם ספוגית אחרת. זה ממזער את הנזק לרקמות על ידי ריכוך העור ומתן שימון למחט הקעקוע. בנוסף, השמן ממיס לכלוך שלא הוסר על ידי תהליך הניקוי ומונע כתמי דיו על העור הלא מקועקע. עכשיו אתה מוכן ליישם את הקעקוע.

בזמן שהמכונה כבויה, טובלים את קצה מחט הקעקוע, שהיא או מחט לאנסט או תת עורית, לתוך הפיגמנט. לאחר מכן, להפעיל את האקדח באמצעות דוושת הרגל, למקם את כלי הקעקוע על הזנב, ולהביא את קצה המחט לאתר הקעקוע. התקרבו לעור עם המחט בזווית של 90 מעלות וחדרו עמוק מספיק לתוך הדרמיס כך שהפיגמנט מופקד לצמיתות. שינוי בצליל המחט המופעלת יכול לעזור להבחין בעומק. הפוך קווים שווים קצרים בכיוון אחד, יצירת ספרות ואותיות. נסה להשתמש בעקומות וזוויות מינימליות בעת החלת הקעקוע.

כדי להוסיף פיגמנט נוסף, לטבול את קצה המחט לתוך מאגר הצבע עבור כל אחד-שני תווים עבור עכברים וכל תו אחד עבור חולדות. כתם הקעקוע הושלם עם מגבת נייר כדי להסיר פיגמנט עודף. נוכחות של דם על הקעקוע או מגבת הנייר מצביעה על כך הקעקוע נעשה עמוק מדי, ולכן לא סביר להיות קבוע. לחזק תווים דקים עם פיגמנט נוסף על ידי הצבת המחט במקביל, לא על החלק העליון של, הפיגמנט כבר הופקד. לנקות ביסודיות את ציוד הקעקוע לאחר כל שימוש, מחט חדשה או מעוקרת ואספקה חדשה של דיו צריך לשמש בין כלובים כדי למנוע העברת מחלות.

לאחר מכן, נלמד כיצד להחיל קעקועי בוהן על יילודים ומבוגרים. כאן, אנו להדגים את ההליך בעכברים, אבל אותם צעדים ישימים לחולדות.

היונים מקועקעים על בהונותיהם מכיוון שעם הזנב אינן מאובן ואורך הזנב קטן מדי. כמו כן, ככל שהזנב גדל, העור היה נמתח והמספרים עלולים להיות מעוותים, קלושים ובלתי קריאים. התחל על ידי הצבת כתם של משחת קעקוע ירוק על משטח לא נקבובי כגון רדיד אלומיניום. לאחר מכן, יש לגנוז את הגור שנגאל מראש בידך באמצעות כרית גזה. מקם את כף הרגל בין האגודל שלך לבין הנוכל של האצבע המורה שלך כדי לחשוף את בהונות הנבחרות לקעקוע. החזק את כף הרגל קרוב לבהונות כך שהבהן שנבחרה יש משטח מוצק מאחוריו כדי למנוע ממנו להתכופף.

עכשיו, לטבול את הקצה של lancet 4.5 מ"מ לתוך הדבק קעקוע. לאחר מכן, לתקוע את בוהן הרצוי לפי הקוד שנקבע מראש. כדי להבטיח חדירה נכונה, לתקוע את אותה נקודה שלוש פעמים. לחדור את העור מספיק, כך הדבק משאיר סימן, אבל להימנע לחטט כל כך עמוק כי בוהן מדממת. בעדינות כתם את הקעקוע החדש עם גזה כדי להסיר כל משחת קעקועים עודף, ולהחזיר את החיה לכלוב שלה. השתמש lancet חדש עבור המלטה הבאה. יום אחד לאחר ההליך, ודא כי הקעקוע גלוי.

כאשר גורים מניקה מקועקעים, מומלץ גם לקעקע את הסכר. זה עשוי למנוע ממנה להגיב יתר על המידה ולטפח יתר על המידה את הקעקועים של הגור שלה. כדי להחיל קעקוע בוהן על מבוגר, שוב, במקום הראשון נקודה קטנה של משחת קעקוע ירוק על רדיד אלומיניום. לאחר מכן, לרסן את החיה באמצעות חרוט פלסטיק או מרסן פרספקס המאפשר גישה לרגליים האחוריות. הרחב את כף הרגל ממכשיר האיפוק והצב את כף הרגל בין האגודל לבין הנוכל של האצבע המורה שלך כדי לחשוף את בהונות הנבחרות לקעקוע.

עכשיו, לטבול את הקצה של lancet 5mm בדבק הקעקוע. וכמו בעבר, להחיל את הקעקוע על ידי דקירה ונקב את העור של בוהן הרצוי לפחות שלוש פעמים כדי להבטיח חדירה נכונה. לאחר מכן, בעדינות כתם את הקעקוע כדי להסיר כל הדבק עודף, ולהחזיר את החיה לכלוב שלה. כמו עם היולידים, לאמת את הקעקוע יום אחד לאחר ההליך. אם הסימן נראה יום לאחר הקעקוע, זה צריך להישאר גלוי לכל החיים של החיה. אם הוא קלוש או לא גלוי, ואז לעשות מחדש את הקעקוע כמתואר קודם לכן.

שיטת הזיהוי הבאה שנדון בה כוללת השתלת שבבים במכרסמים. השבב המשמש בדרך כלל לתיוג חיות מעבדה הוא שבב זיהוי תדר רדיו, או RFID. בדרך כלל, השבב נטען מראש במחטים, אשר לאחר מכן ניתן להציב לתוך המימר. להכנסת שבב, השתמש בצינור פרספקס כדי לרסן את החיה ולוודא שאתה עדיין יכול לתפוס את העור מעל הכתפיים. ראשית, אוהל העור כדי ליצור כיס. לאחר מכן מניחים את המחט דרך העור, משופעים, במקביל לעמוד השדרה, ומפנים לכיוון הזנב. הוציאו את השבב בתת עור ונסוגו את המחט. צבוט את העור סגור באתר ההזרקה כדי למנוע מהשבב לעקוב אחר המחט מהעור. המשך להפעיל לחץ כדי לספק hemostasis עבור כל דימום בעור. הסר את החיה ממכשיר האיפוק ולסרוק את השבב באמצעות הקורא המסופק על ידי הייצור כדי לאשר את קוד הזיהוי.

לבסוף, בואו ללמוד כיצד להחיל צבעים זמניים על מכרסמים לזיהוי. בואו נתחיל עם עכברים. ראשית, לרסן את החיה כך שהאזור שבין השכמות נגיש. חלק זה של הגוף מוגן מטיפוח עצמי. מניחים נקודה או פס של הצבע על הפרווה באזור זה ומניחים את החיה בחזרה לכלוב שלה.

עבור חולדות, לרסן את החיה באופן ידני על ידי אחיזת הזנב והחזקתו מתוח. זה מבטיח כי האזור עבור יישום צבע נגיש בקלות, אשר יכול להיות ראש, כתפיים, או ישבן. מניחים נקודה או פס של הצבע על הפרווה. לפעמים אפשר להחיל צבע לא רעיל מבלי לרסן את החיה. בדוק את הסימנים על בעלי חיים אלה מעת לעת, במיוחד אם אתה משתמש בהם כמזהה היחיד במשך יותר מכמה ימים.

כעת, לאחר שבדקנו את הנהלים של שיטות הזיהוי השונות הללו, בואו נראה כיצד מדענים משתמשים בהן במחקרים שונים כיום.

השימוש במכרסמים בניסויי התנהגות הוא די נפוץ. כאן, החוקרים השתמשו בקעקוע הזנב כדי לסמן את בעלי החיים לצמיתות ואז צפו בהם במשך כמה ימים בסביבה בנויה באופן מלאכותי של כלוב ביתי. הנתונים שנאספו חשפו הבדלים בהתנהגויות, כמו מרחק שהוזז, בין השליטה לבין בעלי החיים הניסיוניים, במשך תקופה של 10 ימים לאחר הניתוח.

בניסוי התנהגות אחר, החוקרים ביצעו קעקוע בוהן ביילודים והניחו אותם בתיבת הקלטה עם מיקרופונים מיוחדים להקלטת קולות קוליים. מטרת הניסוי הזה הייתה לבחון את ההבדלים בקצב השיחות, כלומר מספר הקולות לדקה, בסוג פראי ועכברים לקויי Shank2 - מודל של אוטיזם מעל תקופת יילודים של 12 יום ומכסה המנוע למבוגרים.

לבסוף, כפי שנדון קודם לכן, השימוש בצבע לא רעיל הוא דרך יעילה לסמן בעלי חיים לניסויים לטווח קצר. כאן, המדענים התעניינו בביטוי חולף של חלבון פלזמה. אז הם סימנו את בעלי החיים עם סמנים זמניים, הזריקו את הדנ"א הפלסמיד דרך ורידי, ואספו את דגימת הדם יומיים לאחר מכן כדי לקבוע את ביטוי החלבון בטכניקת הכתם המערבי.

הרגע צפיתם בהקדמה של JoVE לקעקוע, מיקום שבבים ושיטות זיהוי זמניות לעכברי מעבדה וחולדות. זיהוי בעלי חיים הוא מרכיב עיקרי בהקלטה במחקר. לכן, בעת בחירת שיטת הזיהוי המתאימה, יש לדון בגורמים רבים. זה כולל את רמת אי הנוחות לחיה, את קלות הטכניקה, את הצרכים הניסיוניים, ולבסוף את העלות הקשורה לשיטה. כמו תמיד, תודה שצפית!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Applications and Summary

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

בעת בחירת שיטת הזיהוי המתאימה, יש לדון בגורמים רבים. לכל טכניקה יש יתרונות וחסרונות שיש לקחת בחשבון ביחס לצרכים ניסיוניים. בעוד העלויות חייבות להישקל יחד עם גורמים אחרים, הקלות של הטכניקה ואת רמת אי הנוחות לבעלי החיים צריך להיות השיקולים העיקריים. 4,5

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

References

  1. Robinson, V., Morton, D.B., Anderson, D., Carver, J.F.A., Francis, R.J., Hubrecht, R., Jenkins, E., Mathers, K.E., Raymond, R., Rosewell, I., Wallace, J., and Wells, D.J. 2003. Refinement and reduction in production of genetically modified mice. Laboratory Animals. 37:S1-S50.
  2. Schaefer, D.C., Asner, I.N., Seifert, B., Bürki, K., and Cinelli, P. 2010. Analysis of physiological and behavioural parameters in mice after toe clipping as newborns. Laboratory Animals. 44:7-13
  3. Castelhano-Carlos, M.J., Sousa, N., Ohl, F., and Baumans, V. 2010. Identification methods in newborn C57BL/6 mice: a developmental and behavioural evaluation. Laboratory Animals. 44: 88-103.
  4. Danneman, P.J., Suckow, M.A., and Brayton, C.F. 2013. The laboratory mouse. Second edition. New York, NY: CRC Press.
  5. Institute for the Laboratory Animal Research. 2011. Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. Washington (DC): National Academies Press.

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter