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Nagetier Identifikation ich

Overview

Quelle: Kay Stewart, RVT, RLATG, Anus; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. University of Notre Dame, IN

Eine grundlegende Voraussetzung der biomedizinischen Forschung ist die ordnungsgemäße Kennzeichnung von Versuchstieren. Es ist wichtig, dass das richtige Tier für Verfahren und Datenerfassung genutzt wird. Labormäuse und Ratten mit den folgenden ständigen Methoden identifiziert werden können: Ohrmarken, Ohr Punch Codes Mikrochip Implantation, Heck-Tattoos für Erwachsene Mäuse und Fuß Tattoos für Neugeborene. Temporäre Methoden von Farbstoffen und Kennzeichnung Stifte können auch für akute Studien verwendet werden. Dieses Video behandelt die technischen Aspekte des Ohres tagging und Stanzen für Mäuse und Ratten sowie die Vorteile der einzelnen in Bezug auf die Art der Untersuchungen an den Tieren. Kenntnis der grundlegenden manuellen Zurückhaltung Techniken für jedes Tier (abgedeckt in einem anderen Video) ist erforderlich für diese Identifizierungsmethoden ordnungsgemäß durchgeführt werden.

Principles

Ohrmarken sind kostengünstig und einfach durchzuführen, und infolgedessen werden häufig verwendet, für die Identifizierung von einzelnen Mäusen und Ratten. Tags können mit einer Reihe von Ziffern und/oder Buchstaben nach Maß sein. Spezielle Codes zuweisen, um eine Maus/Ratte Belastung oder zu einem Prinzip Investigator (PI), Helfer in Dokumentation und Datenbank-Management, vor allem in großen Brutkolonien wo gibt es mehrere Stämme und PIs. Darüber hinaus gibt es eine Vielzahl von Tags im Handel erhältlich. Metall-Tags haben Zeichen auf sie geätzt. Obwohl diese Radierung klar, beim Arbeiten mit einer Maus es oft notwendig, um ihn abzuholen, um den Code auf die Tags aufgrund der geringen Größe der Tags zu lesen ist. Weitere Optionen sind Kunststoff-Tags mit entweder Zahlen und/oder Buchstaben auf bunten Hintergründen oder Kunststoff Stichwörter mit einem Barcode auf der Vorderseite. Beide Optionen können die Tags gelesen werden, ohne die Tiere zu behandeln. Ein weiterer Vorteil der Kunststoff-Tags ist ihre Kompatibilität mit MRT-Bildgebung.

Die Positionierung des Tags am Ohr ist kritisch, da unsachgemäße Positionierung mehrere unglückliche Folgen haben kann. Tags müssen platziert werden, so dass sie nicht dazu führen, eine Biegung in der Pinna dass, das Tier Mobilität stören oder an jeder beliebigen Stelle der Käfighaltung fangen. Wenn der Tag steht zu nahe an den Rand des Ohres, es leicht aus dem Gewebe der Ohrmuschel abgerissen werden kann. Wenn zu nah am Kopf positioniert, kann die Haut von der Hals-Bereich in den Tag, fangen die Reizung, Schmerzen und Bewegungseinschränkungen verursachen wird. Dies führt dann zu selbst-Trauma vom Tier kratzt an den Tag, zerreißt es aus dem Ohr, oder immer einen Fuß in das Tag gefangen. Training für die richtige Platzierung und Technik ist wichtig. 1

Während Tags individuelle Bezeichner für Mäuse oder Ratten bieten, sind sie nicht unfehlbar. Tags können aufgrund von kämpfen, über Pflege, Dermatitis in anfälligen Sorten, Infektion oder selbst-Trauma verloren sein. 2 Erwachsene Ratten sind vor allem weniger tolerant von Ohrmarken und oft entfernen, selbst-Trauma zuzufügen. Aggressivere Zucht-Verhalten bei Ratten führt auch zu einer Ohrmarke zerrissen von der Ohrmuschel. Wenn Mäuse oder Ratten gepaarte oder Gruppe untergebracht sind, kann der Verlust einer Ohrmarke auf mehr als ein Tier lästig sein. Zur Umgehung dieses Problems, eine sekundäre Form der Identifikation, wie z. B. ein Punsch-Code verwendet auf dem Ohr gegenüber den Tag oder ein Schweif oder Fuß Tattoo-sollten genutzt werden. Eine Anlage sollte die Wahl des Ohres, die markiert werden und der Code auf dem anderen Ohr oder an den Zehen verwendet werden zu standardisieren. Alle Codes sind auf den Käfig-Karte anzugeben.

Die Verwendung von Ohr Punch Codes ermöglicht eine schnelle und einfache Methode zur Identifizierung, aber die Technik hat Grenzen. Häufigsten verwendeten Codes haben eine Obergrenze für Nummern zur Verfügung, in der Regel ein Maximum von 100 bis 399. Um die Ohr-Punsch-Codes zu lesen, müssen die meisten Tiere auf das Genick begriffen werden. Der Stempel können als Gewebeproben für die PCR-Genotypisierung, verdoppeln die Tierkennzeichnung und Genotyp Probenahme ermöglicht gleichzeitig erreicht werden. Dies führt zu weniger Stress für die Tiere durch wiederholte Behandlung. 3

Es gibt drei Arten von Ohr Schläge: die Schere Punch, den Daumen-Stempel und den Hebel-Stempel. Obwohl alle gleich wirksam sind, gibt es vor- und Nachteile jeder. Zum Beispiel als Ratten Alter verdickt die Haut ihrer Ohren. Es empfiehlt sich, die Ohr-Schläge an jungen Ratten durchführen, wie sie entwöhnt sind. Bei erwachsenen Ratten, die Identifikation erfordern, ist die Verwendung von Schnüffelstoffen Anästhesie berücksichtigen. Ergonomisch, ist die Ebene Punch einfacher zu bedienen als ein Daumen-Schlag, vor allem für die dickeren Ohren von älteren Ratten. Beide diese Schläge erfordern jedoch eine kneifen Bewegung der Finger. Die Schere Punch hat den ergonomischen Vorteil, dass eine kneifen Bewegung, wodurch Karpal-Tunnel-Ermüdung und Verletzungen. Im Gegensatz dazu ist der Daumen Punch vorteilhaft für das Sammeln von Genotypisierung Proben, als die Spitzen mit dem Gewebematerial passt in ein Eppendorf-Röhrchen. Der Stil der Schlag zu verwenden sollte durch die Personen, die Aufgaben der Aufgabe und dem Alter der Ratten ermittelt werden.

Für Ratten Obwohl Metall Tags am häufigsten verwendet werden, haben Studien gezeigt, dass es Konsequenzen mit ihnen. Entzündungen, neoplastische Veränderungen und sogar chronische Schmerzen wurden bei Tieren beobachtet, die Metall Ohrmarken für mehrere Monate getragen haben. 3,4,5,6 Tags sollte umgehend aus dem Ohr entfernt werden wenn es eine negative Reaktion, und die nachfolgende Verletzung sollte untersucht und behandelt wird, falls erforderlich, von den Tierärzten.

Richtige Pflege und Wartung von Schlägen werden ihren Verbrauch zu verlängern. Alle Arten von Schlägen werden wenn autoklaviert, stumpf, so ist es empfehlenswert, mit einem Desinfektionsmittel reinigen und spülen Sie sie mit Alkohol. Dann müssen sie gründlich getrocknet werden, um Rostbildung zu verhindern. Wenn die Schläge für die PCR verwendet werden, sollten sie getränkt für 3 Minuten in eine Lösung sein, die restliche DNA oder RNA entfernt. Sie sind vor der Verwendung in Alkohol gespült und trocken abgewischt.

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Procedure

1. Ohr Punch Identifikation

Ohr-Punsch-Codes entstanden als eine schnelle und kostengünstige Methode, um einzelne Tiere zu kennzeichnen. Es gibt drei Arten von Ohr Schläge: die Schere Punch, den Daumen-Stempel und den Hebel-Stempel. Rechtes Ohr des Tieres wird für einzelne Ziffern, das linke Ohr für die ten und die Mitte der Ohren für Hunderte verwendet.

  1. Zurückzuhalten Sie das Tier, so dass die Ohren leicht zugänglich sind. Die meisten Mäuse sind Ohr für individuelle Kennzeichnung bei der Entwöhnung getaggt. Dies erfordert eine schonende Behandlung aufgrund ihrer kleineren, schwächeren Größe. Einige Mäuse sind weniger wahrscheinlich zu kämpfen, wenn die Hinterbeine auf einer Oberfläche wie ein Käfig-Spitze oder eine Gegenoberseite ausruhen kann.
  2. Bestimmen Sie das Ohr Schläge benötigt experimentelle Zahl des Tieres zu entsprechen oder um es in einem Käfig zu identifizieren.
    1. Schläge werden Kerben oder Löcher je nach den verwendeten Code.
    2. Die letzte Nummer auf der Ohrmarke wird oft als Ohr Punch Bezeichner verwendet, wenn es die sekundäre Methode der Identifizierung ist.
    3. Wenn Tiere auf eine Kurzzeitstudie in stabilen Käfig Gruppen sind, können sie laufende Nummern aufgeführt. Dies geschieht häufig, wenn es keine Ohrmarken vorhanden gibt.
  3. Machen Sie das Ohr lochen.
    1. Um eine Kerbe machen, wird der Stempel am Rande der Pinna Ohr platziert.
    2. Um ein Loch zu machen, legen Sie das Ohr im Stempel, so dass das Loch des Stempels entfernt am Rand der Ohrmuschel in der gewünschten Position befindet.
    3. Üben Sie Druck auf den Daumen Hebel Punsch oder schließen die Schere Stanzen schnell und fest, durch die Haut des Ohres zu schneiden.
    4. Heben Sie vorsichtig den Stempel vom Ohr, wenn der Daumen oder Hebel Schläge zu verwenden. Öffnen Sie die Schere Punch aus dem Ohr entfernen.
    5. Vermeiden Sie ziehen oder Verdrehen des Stempels um zu verhindern, dass das Ohr reißen.
    6. Schläge nach der Zeit langweilig. Ein Schlag nicht durch das Ohr geschnitten, lassen Sie den Stempel und wählen Sie einen neuen Ohr-Schlag. Positionieren Sie den neuen Schlag an der gleichen Stelle.
  4. Die Schläge nach jedem Gebrauch zu reinigen.
    1. Punsch alle dull wenn autoklaviert. Es wird empfohlen, dass sie mit einem Desinfektionsmittel gereinigt und mit Alkohol gespült werden. Trocknen Sie sie gründlich, um Rostbildung zu verhindern.
    2. Ohr-Schläge für PCR verwendet werden sind routinemäßig getränkt für 3 Minuten in einer Lösung, restliche DNA oder RNA zu entfernen. Sie sind vor der Verwendung in Alkohol gespült und trocken abgewischt.

Figure 1
Abbildung 1. Ohr bei Mäusen mit Schere Stanzen.

(2) Ohr Tagerkennung

Individuelle Ohrmarken können von Herstellern mit alphabetischen oder numerischen Codes, bestellt werden, wodurch für die Differenzierung von Mausstämme oder Ermittler. Ohrmarken können aus Metall oder Kunststoff bestehen.

  1. Wählen Sie die Ohrmarken für die Tiere identifiziert werden. Es gibt einige Arten der Anwender von Ohr-Tag-Herstellern angeboten. Achten Sie darauf, die Klammer zu bestellen, die für die spezifische Größe und Stil der Ohrmarken verwendet wird.
  2. Vorsichtig entfernen Sie eine Markierung aus dem Karton Halter und in die Klammer zu orientieren Sie, so dass das Ende mit dem Loch gekerbten Treffzone aus der Klammer positioniert ist. Das Spitze Ende des Tags sollte gegenüber der Kerbe.
  3. Zurückzuhalten Sie das Tier, so dass die Ohren leicht zugänglich sind. Tiere können werden seltener zu kämpfen, wenn die Hinterbeine auf einer Oberfläche, wie ein Käfig-Spitze oder eine Gegenoberseite ausruhen kann.
  4. Die Ohrmarke für Platzierung richtig zu positionieren.
    1. Positionieren Sie den Punkt der Ohrmarke, wie tief in der Concha des Ohres wie möglich, also das Tag Gesicht den Rücken des Tieres zahlen.
    2. Um die Ohr-Tag-Nummern mit Blick auf die Nase des Tieres haben, platzieren Sie den Punkt des Tags an der Basis der Ohrmuschel auf der Rückseite des Ohres.
  5. Der Tag anwenden.
    1. Drücken Sie fest die Klammer geschlossen. Die Ohrmarke wird das Ohr und Schloss zusammen durchbohren.
    2. Lassen Sie die Klammer, und tagged Ohr fällt aus der Klammer.

Figure 2
Abbildung 2. Eine Maus mit einer Ohrmarke, die richtig an der Ohrmuschel positioniert ist.

  1. Entfernen Sie die Metall-Ohr-Tags.
    Hinweis: gelegentlich können Metall Ohrmarken Entzündung und Schwellung des Ohres führen. Die Schwellung und Reizung häufig führt zu Infektionen der Ohrmuschel. Behandlung sollte das Entfernen des Tags enthalten; in Fällen von schweren Reizungen oder Infektionen müssen das Tier jedoch betäubt werden.
    1. Entfernen Sie Fremdkörper aus rund um den Tag mit einem Baumwoll-gespitzten Applikator mit einer antiseptischen Lösung befeuchtet.
    2. Schneiden Sie am oberen Rand der Tag-Schleife von Kante zu Kante mit Drahtschneider. Schneiden Sie nicht auf der glatten Oberfläche, da dies das Tag zu komprimieren, das Ohr kneifen, und weiteren Schaden anrichten.
    3. Vermeiden Sie die Anwendung Drehmoment beim Schneiden, reißen das Ohr zu verhindern.
  2. Verwenden Sie Hämostatika, um die abgeschnittenen Enden der Ohrmarke auseinander zu verbreiten.
    1. Sanft die Ohrmarke durch zu führen- und aus dem Ohr mit Arterienklemmen. Reduzieren Sie Trauma durch die Erweiterung der piercing Loch zu vermeiden und Rutschen Tag heraus, dass die gekräuselte Ende nicht durch das Ohr verläuft.
    2. Sobald der Tag vorbei ist, wischen Sie das Ohr mit einem Antiseptikum-getränkten Baumwoll-Applikator-Stick.
    3. Besteht eine eitrige Ausfluss aus dem Ohr, Follow-up-Behandlung kann erforderlich sein und Beratung mit den Tierärzten für Bewertung wird empfohlen.

Korrekte Identifizierung von Labortieren ist eine grundlegende Voraussetzung der biomedizinischen Forschung. Es ist wichtig für die Ermittler, dass man zwischen den einzelnen Tieren zu unterscheiden, so dass das richtige Tier für experimentelle Verfahren und Erhebung von Daten verwendet wird. Wissenschaftler haben mehrere permanente und temporäre Methoden zur Identifizierung einzelner Labortieren entwickelt. Hier werden wir diskutieren die beiden am häufigsten verwendeten Methoden: Ohr-tagging und Ohr zu stanzen.

Vor dem Eintauchen in das Verfahren für das Ohr Lochen, lassen Sie uns vorstellen Ohr Punch Code, die Arten von Schlägen zur Verfügung, und diskutieren die vor- und Nachteile dieser Methode. Wie Sie schon erraten haben vielleicht, beinhaltet Ohr Stanzen lochen ein Loch oder eine Kerbe in das Tier Ohrmuschel oder Ohrmuschel. Um diese Methode zu standardisieren, haben universal Ohr Punch Codes entwickelt.

Abhängig von der Position Kerben auf dem rechten Ohr repräsentieren einzelne Ziffern, wie 1, 3 und 5, und eine doppelte Kerbe repräsentiert 2. Verschiedene Kombinationen von diesen Kerben, und fasst den Wert für jede Markierung, können Sie das Tier von 1 bis 9 beschriften. Ebenso stellen die gleichen Kerben auf dem linken Ohr ten dar. Und wieder werden verschiedene Kombinationen decken den Bereich von 10 bis 90. Löcher in der Mitte des rechten und linken Ohrmuschel darstellen 100 und 200, beziehungsweise. Und Löcher in den beiden zeigen 300. Daher, wenn Sie das Tier 173 beschriften möchten, zum Beispiel sollten Sie ein Loch in der Mitte des rechten Ohr für 100, drei Kerben im linken Jahr summieren der insgesamt 70 und eine einzelne Kerbe in der oberen rechten Ohr repräsentieren die Einheit Ort "drei" Punsch.

Jetzt sprechen wir über die drei Arten von handelsüblichen Ohr Schläge: die Schere Punch, den Daumen-Stempel und den Hebel-Stempel. Jede davon hat ihre vor- und Nachteile.

Die Daumen-Punch eine kneifen Bewegung erfordert, aber ist klein genug, um in ein Eppendorf-Röhrchen passen, so dass das Ohr Gewebe leichter erfasst werden kann. Hebel-Stanze ist ergonomisch, einfacher zu bedienen als Daumen Punsch, vor allem für die dickeren Ohren der älteren Ratten. Die Schere Punch erfordert keine kneifen Bewegung, wodurch Karpal-Tunnel-Ermüdung und Verletzungen.

Trotz des Seins eine schnelle und einfache Methode zur Identifizierung, muss die Ohr Lochen einige Einschränkungen. Erstens hat der Ohr Punch Code oben diskutierten eine Obergrenze von 399, die wodurch die Verwendung dieser Methode in einigen groß angelegten Studien eingeschränkt werden kann. Eine weitere Einschränkung ist, dass die meisten Tiere auf das Genick begriffen werden müssen, um den Code zu lesen, wodurch sich die Zeiten, die sie behandelt werden. Da Ratten Alter, die Haut ihrer Ohren verdickt und es schwierig ist, Ohr Punch durchzuführen, ohne das Tier zu bedeutende Bedrängnis verursachen. Daher empfiehlt es sich, die Ohr-Schläge an jungen Ratten durchführen, wie sie entwöhnt sind. Bei erwachsenen Ratten, die Identifikation erfordern, ist die Verwendung von Schnüffelstoffen Anästhesie berücksichtigen beim Ohr Schläge ausführen.

Jetzt haben Sie einige Hintergrundinformationen über das Ohr Lochen Sie Code und die Arten von Tools zur Verfügung, lassen Sie uns lernen, wie man diese Technik bei Mäusen durchführen.

Bevor Sie die Schritte ausführen, es wird empfohlen, dass Stanzen Werkzeuge mit einer Desinfektionslösung gereinigt, mit Alkohol gespült und gründlich getrocknet werden. Vermeiden Sie Autoklavieren das Ohr schlägt, wie es ihnen irgendwann langweilig wird.

Um zu beginnen, entscheiden Sie das Tier experimenteller Code und den Stempel verwendet werden. Lassen Sie uns den Code 173 und Scheren Stempel als Beispiele hier. Das gleiche Verfahren gilt für alle anderen Code oder Punsch. Wenn Sie bereit sind, zurückhalten Sie, das Tier durch greifen sie auf das Genick, so dass die Ohren leicht zugänglich sind. Beginnen Sie mit dem Loch für 100. Legen Sie das rechte Ohr im Stempel, so dass das Loch des Stempels entfernt am Rand der Ohrmuschel positioniert ist. Als nächstes wenden Sie Druck, die Schere schnell zu schließen und fest, durch die Haut zu schneiden. Dann lassen Sie den Stempel und entfernen Sie sie aus dem Ohr. Vermeiden Sie ziehen oder Verdrehen des Stempels um zu verhindern, dass das Ohr reißen. Um eine Kerbe zu machen, platzieren den Stempel auf den Rand der Ohrmuschel Ohr an der richtigen Stelle, in diesem Fall an der Spitze der rechten Ohr für die "drei" in der Code-Einheit statt, und das gleiche tun - schnell und fest andrücken und dann öffnen der Schere um ihn zu entfernen. Wiederholen Sie den Vorgang auf dem anderen Ohr schlagen drei Kerben - zwei für "20" in der Nähe der äußeren Ecke und eine für "50" in der Nähe der inneren Augenwinkel, insgesamt den Code auf "70".

Bestätigen Sie, dass der richtige Code gestanzt wurde, bevor Sie hinzufügen die Tiere zurück in den Käfig. Wieder, reinigen Sie den Schlag mit einem Desinfektionsmittel zu, mit Alkohol spülen Sie und trocknen Sie sie gründlich, um Rostbildung zu verhindern.

Nun gehen wir zu Ohr tagging, das ist eine andere kostengünstig und einfach durchzuführen Methode für die individuelle Kennzeichnung von Mäusen und Ratten. Es gibt eine Vielzahl von im Handel erhältlichen Ohrmarken. Dazu gehören: Metall-Tags, die eine Reihe von Ziffern und/oder Buchstaben auf sie geätzt und Kunststoff Tags mit Zeichen oder Barcodes auf bunten Hintergründen.

Ein Nachteil von Metall-Tags ist, dass es oft notwendig, das Tier abholen, um den Code zu lesen. Im Gegensatz dazu sind Kunststoff Tags einfach zu lesen, ohne die Tiere zu behandeln. Ein weiterer Vorteil der Kunststoff-Tags ist ihre Kompatibilität mit MRT-Bildgebung. Während die Tags eine individuelle Kennung für eine Maus oder Ratte bieten, sind sie nicht unfehlbar. Tags können durch übermäßige Pflege, Dermatitis oder Infektion verloren sein, selbst-Trauma zugefügt Tags durch Intoleranz entfernen wollen, kämpfen und aggressive Zucht Verhalten. Wenn mehrere Tiere im gleichen Käfig untergebracht werden, kann der Verlust einer Ohrmarke lästig sein. Um dieses Problem zu umgehen, sollte eine sekundäre Form der Identifikation wie ein Schlag-Code auf dem Ohr gegenüber des Tags verwendet werden. Eine Anlage sollte die Wahl des Ohres, die markiert werden und der Code auf dem anderen Ohr verwendet werden zu standardisieren, und alle Codes anzugeben, auf die Käfig-Karte.

Jetzt lassen Sie uns lernen, wie man richtig eine Ohrmarke anzuwenden wie falsche Positionierung mehrere unglückliche Folgen haben kann. Nach Anwendung diskutieren wir auch Entfernung der Ohrmarke, die in der Regel im Falle einer Infektion durch die Taganwendung ausgeführt wird.

Der erste Schritt ist, wählen einen geeigneten Tag für die Tiere identifiziert werden. Hier verwenden wir einen Metall-Tag, das Verfahren an Mäusen zeigen. Achten Sie darauf, die Klammer zu bestellen, die für die spezifische Größe und Stil der Ohrmarken verwendet wird. Vorsichtig entfernen Sie die Markierung aus dem Karton Halter und in die Klammer zu orientieren Sie, so dass das Ende mit dem Loch gekerbten Treffzone aus der Klammer positioniert ist. Das Spitze Ende des Tags sollte gegenüber der Kerbe.

Wenn Sie bereit sind die Ohrmarke anwenden, zurückhalten Sie das Tier, so dass die Ohren leicht zugänglich sind. Tiere können werden seltener zu kämpfen, wenn die Hinterbeine auf einer Oberfläche wie die Käfig-Spitze oder eine Gegenoberseite ausruhen kann. Sobald das Tier zurückgehalten wird, positionieren Sie den Punkt der Ohrmarke tief in der Concha des Ohres also das Tag Gesicht dem Rücken des Tieres zahlen. Drücken Sie fest die Klammer geschlossen; die Ohrmarke wird das Ohr und Schloss zusammen durchbohren. Wenn Sie loslassen, wird die Klammer tagged Ohr herausfallen. Bestätigen Sie, dass der Tag richtig positioniert und angewendet hat. Wenn Sie die Ohr-Tag-Nummern mit Blick auf die Nase des Tieres haben lieber, platzieren Sie den Punkt des Tags an der Basis der Ohrmuschel auf der Rückseite des Ohres und dann drücken Sie, um das Tag in Platz zu verriegeln.

Tags müssen platziert werden, so dass sie nicht dazu führen, einen Knick im Ohr dass, das Tier Mobilität stören oder an jeder beliebigen Stelle der Käfighaltung fangen. Wenn der Tag steht zu nahe an den Rand des Ohres, kann es leicht zerrissen. Wenn zu nah am Kopf positioniert, kann die Haut der Halsbereich fangen in den Tag, erstellen, Reizung, Schmerzen und Bewegungseinschränkungen, die dann zu selbst-Trauma führen kann. Gelegentlich können Metall Tags Reizung und Schwellung des Ohres führen. Dies führt oft zu Infektionen der Ohrmuschel und die sofortige Behandlung sollte das Entfernen des Tags.

Um die Markierung zu entfernen, befeuchten Sie einen Baumwoll-gespitzten Applikator mit einer antiseptischen Lösung und verwenden Sie, um jeglichen Schmutz von rund um den Tag zu entfernen. In schweren Fällen von Infektion kann das Tier betäubt werden müssen. Dann, schneiden Sie Drahtschneider am oberen Rand der Tag-Schleife von Kante zu Kante. Schneiden Sie wichtig ist, nicht auf der glatten Oberfläche, wie das komprimieren das Tag, das Ohr kneifen, und Schäden an das Ohr verursachen. Führen Sie mit Hämostatika, sanft die Ohrmarke durch und aus dem Ohr. Rutschen Sie das Tag aus, so dass gekräuselte Ende nicht passieren Trauma und Erweiterung der piercing Loch verursacht. Sobald der Tag vorbei ist, wischen Sie das Ohr mit einer antiseptischen getränkten Baumwoll-Applikator-Stick, und das Tier in seinen Käfig zurück. Besteht eine eitrige Ausfluss aus dem Ohr, Follow-up-Behandlung kann erforderlich sein und Beratung mit den Tierärzten für Bewertung wird empfohlen.

Nun, da Sie wissen, wie anlässlich der Labortiere mit Ohrmarken und Schläge, betrachten wir einige Experimente, in denen diese Methoden nützlich sein können. Ein großer Vorteil der Verwendung von Ohr Punch Code ist, dass die Schläge als Gewebeproben für die Genotypisierung, wodurch Stress für die Tiere verursacht durch wiederholte Handhabung verdoppeln können. Jedoch wenn Sie die Stempel für PCR Proben verwenden möchten, denken Sie daran, zuerst Einweichen der Apparat in einer Oberfläche Dekontaminationsmittel Lösung für mindestens 3 Minuten, um restliche DNA oder RNA zu entfernen, und dann mit Alkohol vor Gebrauch abspülen.

Identifikation-Technik Bedeutung weiter erhöht, wenn das Experiment über mehrere Tage dauert. Zum Beispiel in diesem Experiment der Wissenschaftler bezeichnet zunächst die Tiere mit einem Metall-Tag und dann injizierten sie den Ischiasnerv mit einer Suspension von transgenen Tumorzellen Luciferase Protein zum Ausdruck zu bringen. Als nächstes um Tumorprogression zu quantifizieren, sie die Tiere ein, zehn und achtzehn Tage Post Injektion Biolumineszenz mit abgebildet.

Sie habe nur beobachtet, Jupiters Präsentation demonstrieren die beiden häufigsten verwendeten Methoden zum Nachweis der bei Nagern: Ohr-Tags und Ohr Schläge. Sie sollten jetzt verstehen das Ohr Lochen Code, kennen die verschiedenen Arten von handelsüblichen Nagetier Ohrmarken und sollen genau diese Eingriffe ohne Tier erhebliche Beschwerden verursachen.

Denken Sie daran, jede Technik hat ihre vor- und Nachteile, die im Zusammenhang mit Ihren experimentellen Anforderungen berücksichtigt werden müssen. Neben der Betrachtung von Kosten, sollte die Einfachheit der Technik und das Niveau der Schmerz, um die Tiere einige der wichtigsten Überlegungen bei der Auswahl der entsprechenden Kennzeichnung-Methode. Wie immer vielen Dank für das ansehen!

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Applications and Summary

Wenn Sie die entsprechende Kennzeichnung Methode wählen, müssen viele Faktoren beraten. Jede Technik hat vor- und Nachteile, die in Bezug auf die experimentelle Bedürfnisse berücksichtigt werden müssen. Während die Kosten zusammen mit anderen Faktoren abgewogen werden müssen, sollte die Einfachheit der Technik und das Niveau des Unbehagens zu den Tieren die wichtigsten Überlegungen. 3,4

Ohr Lochen/ausklinken wird häufig bei Mäusen und Ratten verwendet, denn es wenig Kosten gibt, und das Verfahren ist leicht getan. Es gibt eine begrenzte Anzahl von Codes, die verwendet werden können, wobei die meisten Codes mit einer Obergrenze von 100 bis 399. Um die Ohr-Punsch-Codes zu lesen, müssen die meisten Tiere auf das Genick begriffen werden. Jedoch können die Schläge verdoppeln als Gewebeproben für die PCR-Genotypisierung, die Identifikation und Genotyp Probenahme ermöglicht gleichzeitig erreicht werden, wodurch sich weniger Stress für die Tiere aus einer wiederholten Handhabung. 5

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References

  1. Robinson, V., Morton, D.B., Anderson, D., Carver, J.F.A., Francis R.J., Hubrecht, R., Jenkins, E., Mathers, K.E., Raymond, R., Rosewell, I., Wallace, J., and Wells, D.J. 2003. Refinement and reduction in production of genetically modified mice. Laboratory Animals. 37:S1-S50.
  2. Cover, C.E., Keenan, C.M., and Bettinger, G.E. 1989. Ear tag-induced Staphylococcus infection in mice. Laboratory Animals. 23:229-233.
  3. Kitagaki, M., Suwa, T., Yanagi, K., and Shiratori, K. 2003. Auricle chondritis in young ear-tagged Crj:CD(SD)IGS rats. Laboratory Animals. 37:249-253.
  4. Kasanen, H.E., Voipio, H.M., Leskinen, H., Luodonpää, M., and Nevalainen, T.O. 2011. Comparison of ear tattoo, ear notch and microtattoo in rats undergoing cardiovascular telemetry. Laboratory Animals. 45:154-159.
  5. Dalhborn, K., Bugnon, P., Nevalainen, T., Raspa, M., Verbost, P., and Spangenberg, E. 2013. Report of the Federation of European Laboratory Animal Science Associations Working Group on animal identification. Laboratory Animals. 47:2-11.
  6. Waalkes, M.P., Rehm, S., Kasprzak, K.S., et al. 1987. Inflammatory, proliferative, and neoplastic lesions at the site of metallic identification ear tags in Wistar [Crl:(WI)BR] rats. Cancer Research. 47:2445-2450.

Transcript

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