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Overview

출처: 케이 스튜어트, RVT, RLATG, CMAR; 발레리 A. 슈뢰더, RVT, RLATG. 노틀담 대학교, IN

생물 의학 연구의 근본적인 요구 사항은 연구 동물의 적절한 식별입니다. 올바른 동물이 절차 및 데이터 수집에 사용되는 것이 필수적입니다. 실험실 마우스와 쥐는 다음과 같은 영구적 인 방법으로 식별 할 수 있습니다 : 귀 태그, 귀 펀치 코드, 마이크로 칩 이식, 성인 마우스에 대한 꼬리 문신, 신생아를위한 발가락 문신. 염료 및 마킹 펜의 임시 방법은 급성 연구에도 사용할 수 있습니다. 이 비디오는 마우스와 쥐에 대한 귀 태깅 및 펀칭의 기술적 측면뿐만 아니라 동물에 실시되는 연구의 유형에 관한 각의 이점을 다룹니다. 이러한 식별 방법을 제대로 수행하기 위해서는 각 동물(별도의 비디오로 덮여 있음)에 대한 기본 수동 구속 기술에 대한 지식이 필요합니다.

Principles

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귀 태그는 저렴하고 수행하기 쉽고, 결과적으로 개별 마우스와 쥐의 식별에 일반적으로 사용된다. 태그는 일련의 숫자 및/또는 문자로 맞춤 제작할 수 있습니다. 마우스/쥐 변형또는 원칙 조사자(PI)에 특정 코드를 할당하거나, 기록 보관 및 데이터베이스 관리의 보조, 특히 여러 균주와 피처가 있는 대규모 사육 식민지에 할당합니다. 또한, 다양한 태그가 시판되고 있습니다. 금속 태그에는 문자가 새겨져 있습니다. 이 에칭은 명확하지만 마우스로 작업할 때 태그의 크기가 작기 때문에 태그의 코드를 읽기 위해 선택해야 하는 경우가 많습니다. 다른 옵션은 밝은 색상의 배경에 숫자 및 / 또는 문자가있는 플라스틱 태그 또는 전면에 바코드가있는 플라스틱 태그입니다. 이 두 옵션을 모두 사용하면 동물을 처리하지 않고도 태그를 읽을 수 있습니다. 플라스틱 태그의 또 다른 장점은 MRI 이미징과의 호환성입니다.

부적절한 위치 지정이 몇 가지 불행한 결과를 초래할 수 있기 때문에 귀에 태그의 위치 지정이 중요합니다. 태그는 피나에 구부러지지 않도록 배치하거나, 동물의 기동을 방해하거나, 코이징의 어떤 부분에서든 잡히지 않도록 배치해야 합니다. 태그가 귀 가장자리에 너무 가깝게 놓이면 피나 조직에서 쉽게 찢어질 수 있습니다. 머리에 너무 가깝게 위치하면 목 부위의 피부가 태그에서 잡을 수 있어 자극, 통증 및 제한된 움직임을 유발합니다. 그러면 동물이 태그에 긁히거나 귀에서 찢어지거나 태그에 발을 붙이는 것으로 이어질 수 있습니다. 적절한 배치 및 기술에 대한 교육은 필수적입니다. 1

태그는 마우스 또는 쥐에 대한 개별 식별자를 제공하지만, 그들은 틀림없다. 태그는 싸움, 과다 손질, 취약한 긴장, 감염 또는 자기 외상으로 인해 손실 될 수 있습니다. 2 특히 성인 쥐는 귀 태그에 덜 관대하고 종종 자기 외상을 입히고 제거합니다. 쥐에 있는 더 공격적인 사육 행동은 또한 피나에서 찢어지는 귀 꼬리표로 이끌어 낼 수 있습니다. 마우스 또는 쥐가 짝을 이루거나 그룹 으로 보관하는 경우, 둘 이상의 동물에 대한 귀 꼬리표의 손실은 번거로올 수 있습니다. 이 문제를 우회하려면 태그 반대쪽 귀에 사용되는 펀치 코드 또는 꼬리 또는 발가락 문신과 같은 보조 형태의 식별을 활용해야 합니다. 시설은 태그할 귀선택과 다른 귀 또는 발가락에 사용할 코드를 모두 표준화해야 합니다. 모든 코드는 케이지 카드에 표시되어야 합니다.

귀 펀치 코드를 사용하면 빠르고 간단한 식별 방법을 사용할 수 있지만 이 기술에는 한계가 있습니다. 일반적으로 사용되는 코드에는 사용할 수 있는 숫자에 대한 상한이 있으며, 일반적으로 최대 100에서 399까지입니다. 귀 펀치 코드를 읽으려면 대부분의 동물을 스크러프에서 파악해야합니다. 펀치는 PCR 유전자 인식에 대한 조직 샘플로 두 배가 될 수 있으며, 이를 통해 동물 식별 및 유전자형 샘플링을 동시에 수행할 수 있습니다. 이로 인해 반복 처리로 동물에 대한 스트레스가 줄어듭니다. 3

가위 펀치, 엄지 펀치, 레버 펀치의 세 가지 스타일이 있습니다. 모든 것이 똑같이 효과적이지만 각각의 장점과 단점이 있습니다. 예를 들어, 쥐가 나이가 들면서 귀의 피부가 두꺼워집니다. 어린 쥐가 짜릿할 때 귀 펀치를 수행하는 것이 가장 좋습니다. 식별을 필요로 하는 성인 쥐의 경우 흡입성 마취의 사용을 고려해야합니다. 인체 공학적으로, 레벨 펀치는 엄지 손가락 펀치보다 사용하기 쉽습니다, 특히 오래된 쥐의 두꺼운 귀에 대한. 그러나, 이 펀치의 둘 다 손가락의 꼬집는 움직임이 필요합니다. 가위 펀치는 꼬집는 동작을 필요로하지 않는 인체 공학적 이점이 있으므로 손목 터널 피로와 부상을 피할 수 있습니다. 대조적으로, 엄지 펀치는 조직 재료와 끝이 Eppendorf 튜브에 들어갈 것이기 때문에 지평 샘플을 수집하는 데 유리합니다. 사용할 펀치의 스타일은 작업을 수행하는 개인과 쥐의 나이에 의해 결정되어야한다.

쥐의 경우 금속 태그가 가장 자주 사용되지만 연구에 따르면 이를 사용하는 데 결과가 있다는 것이 나타났습니다. 염증, 신생물 변화, 심지어 만성 통증은 몇 달 동안 금속 귀 태그를 착용한 동물에서 관찰되었습니다. 3,4,5,6 태그는 불리한 반응이있는 경우 귀에서 즉시 제거되어야하며, 후속 부상은 필요한 경우 수의 직원에 의해 검사되고 치료되어야합니다.

적절한 관리 및 펀치의 유지 보수는 사용을 확장합니다. 모든 유형의 펀치는 자동 으로 사용하면 지루하므로 소독제로 청소하고 알코올로 헹두는 것이 좋습니다. 그런 다음 녹슬지 않도록 철저히 건조해야합니다. 펀치가 PCR에 사용되는 경우 잔류 DNA 또는 RNA를 제거하는 용액에서 3 분 동안 담가야합니다. 사용하기 전에 그들은 알코올에 헹구고 건조 닦아.

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Procedure

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1. 귀 펀치 식별

귀 펀치 코드는 개별 동물에 라벨을 붙이는 빠르고 저렴한 방법으로 개발되었습니다. 가위 펀치, 엄지 펀치, 레버 펀치의 세 가지 스타일이 있습니다. 동물의 오른쪽 귀는 한 자릿수, 수십 개의 왼쪽 귀, 수백 개의 귀 중간에 사용됩니다.

  1. 귀에 쉽게 접근할 수 있도록 동물을 억제합니다. 대부분의 마우스는 위닝시 개별 식별을 위해 귀 태그가 지정됩니다. 이렇게 하려면 작고 깨지기 쉬운 크기로 인해 부드러운 취급이 필요합니다. 일부 마우스는 뒷사지가 케이지 상단이나 카운터 상단과 같은 표면에 휴식을 취할 수 있다면 어려움을 겪을 가능성이 적습니다.
  2. 동물의 실험 수에 대응하거나 케이지 내에서 식별하는 데 필요한 귀 펀치를 결정합니다.
    1. 사용된 코드에 따라 펀치가 노치 또는 구멍이 됩니다.
    2. 이어 태그의 마지막 숫자는 보조 식별 방법일 때 이어 펀치 식별자로 자주 사용됩니다.
    3. 동물이 안정적인 케이지 그룹에서 단기 연구에 있는 경우 순차적인 숫자를 부여할 수 있습니다. 이어 태그가 없을 때 종종 수행됩니다.
  3. 귀 펀치를 만드세요.
    1. 노치를 만들기 위해 펀치는 귀 피나 가장자리에 배치됩니다.
    2. 구멍을 만들기 위해, 펀치의 구멍이 원하는 위치에 피나 마진에서 멀리 위치되도록 펀치에 귀를 배치합니다.
    3. 엄지 손가락이나 레버 펀치에 압력을 가하거나 가위 펀치를 빠르고 단단히 닫아 귀의 피부를 잘라냅니다.
    4. 엄지 손가락이나 레버 펀치를 사용할 때 펀치를 귀에서 부드럽게 들어 올립니다. 가위 펀치를 열어 귀에서 제거합니다.
    5. 귀가 찢어지는 것을 방지하기 위해 펀치를 당기거나 비틀지 마십시오.
    6. 펀치는 시간이 지남에 따라 둔합니다. 펀치가 귀를 잘라하지 못하면 펀치를 풀어 새 귀 펀치를 선택합니다. 같은 장소에서 새로운 펀치를 재배치합니다.
  4. 사용 후 펀치를 청소하십시오.
    1. 모든 펀치 유형은 자동 으로 분류하면 둔해집니다. 소독제로 청소하고 알코올로 헹신 것이 좋습니다. 녹슬지 않도록 철저히 건조하십시오.
    2. PCR에 사용되는 귀 펀치는 잔류 DNA 또는 RNA를 제거하는 용액에 3 분 동안 일상적으로 담가 둡니다. 사용하기 전에 그들은 알코올에 헹구고 건조 닦아.

Figure 1
그림 1. 가위 펀치를 사용하여 마우스에서 귀 펀치.

2. 귀 태그 식별

사용자 지정된 귀 태그는 마우스 균주 또는 구도자의 분화를 허용하는 알파벳 및/또는 숫자 코드가 있는 제조업체에서 주문할 수 있습니다. 귀 태그는 금속 또는 플라스틱으로 만들 수 있습니다.

  1. 동물을 식별할 수 있는 데 적합한 귀 태그를 선택합니다. 이어 태그 제조업체에서 사용할 수 있는 여러 가지 스타일의 어플리케이션이 있습니다. 사용 중인 이어 태그의 특정 크기와 스타일에 맞는 어플라이어를 주문해야 합니다.
  2. 골판지 홀더에서 태그를 부드럽게 제거하고 구멍이있는 끝이 applier의 노치 영역에 위치되도록 applier로 방향을 지정합니다. 태그의 뾰족한 끝은 노치 맞은편에 있어야 합니다.
  3. 귀에 쉽게 접근할 수 있도록 동물을 억제합니다. 뒷사지가 케이지 상단이나 카운터 탑과 같은 표면에 놓일 수 있다면 동물은 어려움을 겪을 가능성이 적을 수 있습니다.
  4. 배치를 위해 이어 태그를 올바르게 배치합니다.
    1. 이어 태그의 점을 귀의 콘카에 가능한 한 깊게 배치하여 태그 번호가 동물의 뒷면을 향합니다.
    2. 동물의 코를 향한 귀 꼬리표 숫자를 갖기 위해 태그의 점을 귀 뒤쪽에 있는 피나 기슭에 놓습니다.
  5. 태그를 적용합니다.
    1. 단단히 아플리케이션을 닫습니다. 이어 태그는 귀를 관통하고 함께 잠급됩니다.
    2. 어플리케이션을 해제하면 태그된 귀가 applier에서 떨어집니다.

Figure 2
그림 2. 피나에 제대로 배치된 귀 태그가 있는 마우스입니다.

  1. 금속 귀 태그를 제거합니다.
    참고: 경우에 따라 금속 귀 태그는 귀의 자극과 붓기를 유발할 수 있습니다. 팽윤과 자극은 수시로 피나의 감염으로 이끌어 냅니다. 치료는 태그의 제거를 포함해야한다; 그러나, 가혹한 자극 또는 감염의 경우에, 동물은 마취될 필요가 있을 지도 모릅니다.
    1. 방부제 용액으로 촉촉한 면 팁 어플리케이터로 태그 주변에서 이물질을 제거합니다.
    2. 와이어 커터로 태그 루프의 상단을 가로질러 와이어 커터로 가장자리에서 가장자리까지 잘라냅니다. 태그를 압축하고 귀를 꼬집어 추가 손상을 일으키므로 평평한 표면을 가로 질러 자르지 마십시오.
    3. 귀를 찢는 것을 방지하기 위해 절단하는 동안 토크를 바르지 마십시오.
  2. hemostats를 사용하여 귀 태그의 절단 끝을 분리합니다.
    1. 귀 태그를 헤모스트로 사용하여 귀 꼬리표를 부드럽게 안내합니다. 피어싱 구멍의 확대를 피하고 태그를 미끄러져 크럼프 끝이 귀를 통과하지 않도록 하여 외상을 줄입니다.
    2. 태그가 사라지면 방부제에 젖은 면 어플리케이터 스틱으로 귀를 닦으십시오.
    3. 귀에서 화농성 방전이 있는 경우 후속 치료가 필요할 수 있으며 수의과 상의하여 평가를 권장합니다.

실험실 동물의 적절한 식별은 생물 의학 연구의 기본 요구 사항입니다. 올바른 동물이 실험 절차 및 데이터 수집에 사용되도록 조사관이 개별 동물을 구별할 수 있어야 합니다. 과학자들은 개별 실험실 동물을 식별하는 몇 가지 영구적이고 일시적인 방법을 개발했습니다. 여기서는 귀 태깅과 귀 펀칭이라는 두 가지 가장 일반적으로 사용되는 방법에 대해 논의할 예정입니다.

귀 펀칭 절차를 자세히 탐구하기 전에 이어 펀치 코드, 사용 가능한 펀치 유형을 소개하고이 방법의 장점과 단점에 대해 설명해 보겠습니다. 짐작할 수 있듯이 귀 펀칭에는 동물의 외부 귀 나 피나에 구멍이나 노치를 펀칭하는 것이 포함됩니다. 이 방법을 표준화하기 위해 범용 이어 펀치 코드가 개발되었습니다.

위치에 따라 오른쪽 귀의 노치는 1, 3 및 5와 같은 한 자릿수를 나타내며 이중 노치는 2를 나타냅니다. 이러한 노치의 다른 조합을 사용하고 각 노치의 값을 합산하면 1에서 9까지 동물의 레이블을 지정할 수 있습니다. 마찬가지로 왼쪽 귀에서 동일한 노치가 수십 개의 노치를 나타냅니다. 그리고 다시, 다른 조합은 10에서 90의 범위를 커버할 것입니다. 오른쪽 피나 중앙과 왼쪽 피나 의 중앙에 구멍은 각각 100과 200을 나타냅니다. 그리고 둘 다의 구멍은 300을 나타냅니다. 따라서, 예를 들어, 동물(173)에 라벨을 붙이려면, 100, 왼쪽 연도에 3개의 노치가 합계를 합산하여 오른쪽 귀의 중앙에 구멍을 뚫어야 하며, 우측 귀의 한 단계는 유닛의 장소 "3"을 나타냅니다.

지금, 시판되는 귀 펀치의 세 가지 스타일에 대해 논의 하자: 가위 펀치, 엄지 펀치, 그리고 레버 펀치. 이들 각각은 그들의 장점과 단점이 있습니다.

엄지 손가락 펀치는 꼬집기 동작이 필요하지만 귀 조직을 보다 쉽게 수집 할 수 있도록 Eppendorf 튜브에 들어갈 만큼 작습니다. 인체 공학적으로 레버 펀치는 엄지 손가락 펀치보다 사용하기 쉽고, 특히 오래된 쥐의 두꺼운 귀를 위해 사용하기가 쉽습니다. 가위 펀치는 꼬집는 동작이 필요하지 않으므로 손목 터널 피로와 부상을 피합니다.

빠르고 간단한 식별 방법임에도 불구하고 귀 펀칭에는 몇 가지 제한이 있습니다. 먼저 위에서 설명한 귀 펀치 코드는 399의 상한을 가지며, 이는 일부 대규모 연구에서 이 방법의 사용을 제한할 수 있다. 또 다른 제한사항은 대부분의 동물이 코드를 읽기 위해 스크러프에서 파악해야 하므로 처리되는 시간을 증가시킨다는 것입니다. 쥐가 나이가 들어감에 따라 귀의 피부가 두꺼워지고 동물에게 상당한 고통을 주지 않으면서 귀 펀치를 수행하기가 어렵습니다. 따라서, 그들은 짜기로 어린 쥐에 귀 펀치를 수행하는 것이 가장 좋습니다. 식별이 필요한 성인 쥐의 경우 귀 펀치를 수행 할 때 흡입 마취를 고려해야합니다.

이제 귀 펀치 코드와 사용 가능한 도구 유형에 대한 배경 정보가 있으므로 마우스에서이 기술을 수행하는 방법을 알아보겠습니다.

시술을 시작하기 전에, 펀칭 공구는 소독제 용액으로 청소하고, 알코올로 헹고, 철저히 건조하는 것이 좋습니다. 결국 귀 펀치를 무디게 할 수 있으므로 자동 적으로 사용하지 마십시오.

먼저 동물의 실험 코드와 사용할 펀치를 결정합니다. 코드 173및 가위 펀치를 예로 사용해 보겠습니다. 동일한 절차는 다른 코드 또는 펀치에 적용됩니다. 준비가 되면 귀에 쉽게 접근할 수 있도록 동물을 스크러프에서 잡아서 동물을 제지하십시오. 100의 구멍으로 시작합니다. 펀치의 구멍이 피나 마진에서 멀리 위치되도록 펀치에 오른쪽 귀를 배치합니다. 다음으로 압력을 가위를 빠르고 단단히 닫아 피부를 잘라냅니다. 그런 다음 펀치를 해제하고 귀에서 제거합니다. 귀가 찢어지는 것을 방지하기 위해 펀치를 당기거나 비틀지 마십시오. 노치를 만들려면, 올바른 자리에 귀 피나 가장자리에 펀치를 배치,이 경우 코드의 단위 장소에서 "세"에 대한 오른쪽 귀의 상단에 배치하고, 같은 작업을 수행 - 신속하고 단단한 압력을 적용한 다음 그것을 제거하기 위해 가위를 엽니 다. 다른 귀에서 동일한 절차를 반복하여 3개의 노치를 펀치합니다 - 두 개의 바깥 쪽 모서리 근처의 "20"과 내부 모서리 근처의 "50"에 대해 "70"으로 코드를 합산합니다.

동물을 케이지에 다시 추가하기 전에 올바른 코드가 펀치된지 확인합니다. 다시 말하지만, 소독제로 펀치를 청소하고, 알코올로 헹구고 녹슬지 않도록 철저히 건조하십시오.

이제 마우스와 쥐의 개별 식별을 위한 또 다른 저렴하고 수행하기 쉬운 방법인 귀 태깅으로 이동해 보겠습니다. 시판되는 다양한 귀 태그가 있습니다. 여기에는 일련의 숫자 및/또는 문자가 새겨진 금속 태그와 밝은 색상의 배경에 문자 또는 바코드가 있는 플라스틱 태그가 포함됩니다.

금속 태그의 한 가지 단점은 코드를 읽기 위해 동물을 데리러 갈 필요가 있다는 것입니다. 대조적으로, 플라스틱 태그는 동물을 처리할 필요 없이 쉽게 읽을 수 있습니다. 플라스틱 태그의 또 다른 장점은 MRI 이미징과의 호환성입니다. 태그는 마우스 또는 쥐에 대한 개별 식별자를 제공하지만 틀림없는 것은 아닙니다. 태그는 과다 손질, 피부염 또는 감염으로 인해 손실 될 수 있습니다, 자기 외상은 편협으로 인해 태그를 제거하려고, 싸움, 공격적인 번식 행동. 여러 동물이 같은 케이지에 보관되어 있는 경우 귀 태그의 손실은 번거로다. 이 문제를 해결하려면 태그 반대쪽 귀에 펀치 코드와 같은 보조 형태의 식별을 사용해야 합니다. 시설은 태그할 귀 선택과 다른 귀에 사용할 코드를 모두 표준화해야 하며 모든 코드를 케이지 카드에 표시해야 합니다.

이제 잘못된 위치 지정이 몇 가지 불행한 결과를 초래할 수 있기 때문에 귀 태그를 올바르게 적용하는 방법을 알아봅니다. 다음 응용 프로그램, 우리는 또한 일반적으로 태그 응용 프로그램으로 인해 감염의 경우에 수행되는 귀 태그의 제거에 대해 논의 할 것이다.

첫 번째 단계는 동물을 식별할 수 있는 적절한 태그를 선택하는 것입니다. 여기서는 금속 태그를 사용하여 마우스에 대한 절차를 시연할 것입니다. 사용 중인 이어 태그의 특정 크기와 스타일에 적합한 어플라이어를 주문해야 합니다. 골판지 홀더에서 태그를 부드럽게 제거하고 구멍이있는 끝이 applier의 노치 영역에 위치되도록 applier로 방향을 지정합니다. 태그의 뾰족한 끝은 노치 맞은편에 있어야 합니다.

귀 태그를 적용할 준비가 되면 귀에 쉽게 접근할 수 있도록 동물을 제지하십시오. 뒷사지가 케이지 상단이나 카운터 탑과 같은 표면에 휴식을 취할 수 있다면 동물은 어려움을 겪을 가능성이 적을 수 있습니다. 동물이 구속되면 귀 꼬리표의 점을 귀의 콘카에 깊게 배치하여 태그 번호가 동물의 뒤쪽을 향하게 합니다. 그런 다음, 단단히 닫혀 있는 어플리케이션을 짜내십시오. 귀 태그가 귀를 관통하고 함께 잠급됩니다. 해제하면 태그가 지정된 귀가 applier에서 떨어집니다. 태그의 위치가 제대로 배치되고 적용되었는지 확인합니다. 동물의 코를 향한 귀 태그 번호가 있는 것을 선호하는 경우 태그 의 뒷면의 피나 베이스에 태그 점을 놓고 태그를 제자리에 고정시하십시오.

태그는 귀에 구부러지지 않도록 배치하거나, 동물의 기동을 방해하거나, 코이징의 어떤 부분에서든 잡히지 않도록 배치해야 합니다. 태그가 귀 가장자리에 너무 가깝게 놓으면 쉽게 찢어질 수 있습니다. 머리에 너무 가깝게 위치하면 목 부위의 피부가 태그에서 잡을 수 있어 자극, 통증 및 제한된 움직임을 만들어 자기 외상으로 이어질 수 있습니다. 때때로 금속 태그는 귀의 자극과 붓기를 일으킬 수 있습니다. 이것은 수시로 피나의 감염으로 이끌어 내고, 즉각적인 처리는 태그의 제거를 포함해야 합니다.

태그를 제거하기 위해 면에 기울어진 어플리케이터를 방부제 용액으로 적시고 태그 주위에서 이물질을 제거하는 데 사용합니다. 감염의 가혹한 케이스에서, 동물은 마취될 필요가 있을 지도 모릅니다. 그런 다음 와이어 커터를 사용하여 태그 루프의 상단을 가로질러 가장자리에서 가장자리로 잘라냅니다. 중요한 것은 태그를 압축하고 귀를 꼬집어 귀에 손상을 입히기 때문에 평평한 표면을 가로 질러 자르지 마십시오. 헤모스타츠를 사용하여 귀 꼬리표를 귀밖으로 부드럽게 안내합니다. 꼬리표를 끄면 압착 된 끝이 관통 구멍의 외상과 확대를 유발하지 않도록합니다. 태그가 사라지면 방부제에 젖은 면 어플리케이터 스틱으로 귀를 닦고 동물을 케이지로 되돌려 놓습니다. 귀에서 화농성 방전이 있는 경우 후속 치료가 필요할 수 있으며 수의과 상의하여 평가를 권장합니다.

이제 귀 태그와 펀치를 사용하여 실험실 동물을 표시하는 방법을 알고 있으므로 이러한 방법이 유용할 수 있는 몇 가지 실험을 살펴보겠습니다. 이어 펀치 코드를 사용하는 한 가지 주요 장점은 펀치가 지노티핑을 위한 조직 샘플로 두 배가 될 수 있으므로 반복 처리로 인한 동물에 대한 스트레스를 줄일 수 있다는 것입니다. 그러나 PCR 샘플을 수집하기 위해 펀치를 사용할 계획이라면 먼저 표면 데쿤타미넌트 용액에 장치를 담그고 잔류 DNA 또는 RNA를 제거한 다음 사용하기 전에 알코올로 헹구십시오.

실험이 며칠 동안 지속되는 경우 식별 기술의 중요성이 더욱 높아집니다. 예를 들어, 이 실험에서 과학자들은 먼저 금속 태그를 사용하여 동물을 표지한 다음 루시파아제 단백질을 표현하는 형질종양 세포의 현탁액으로 좌골 신경을 주입했습니다. 다음으로, 암 진행을 정량화하기 위해, 그들은 1, 10 및 18 일 사후 주입에 생물 발광을 사용하여 동물을 이미지.

당신은 단지 설치류에서 식별의 두 가지 일반적으로 사용되는 방법을 보여주는 JoVE의 프리젠 테이션을 보았다 : 귀 태그와 귀 펀치. 이제 귀 펀치 코드를 이해하고, 시판되는 다양한 유형의 설치류 귀 태그를 알고 있으며, 상당한 동물 불편을 일으키지 않고 이러한 절차를 정확하게 수행할 수 있어야 합니다.

각 기술은 실험적 요구사항과 관련하여 고려해야 하는 장점과 단점을 가지고 있습니다. 비용을 고려하는 것 외에도, 기술의 용이성과 동물에 대한 고통의 수준은 적절한 식별 방법을 선택할 때 주요 고려 사항 중 일부여야합니다. 언제나처럼, 시청주셔서 감사합니다!

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Applications and Summary

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적절한 식별 방법을 선택할 때는 여러 가지 요소를 고려해야 합니다. 각 기술은 실험적 요구와 관련하여 고려해야 할 장점과 단점이 있습니다. 비용은 다른 요인과 함께 무게를 달아야하지만, 기술의 용이성과 동물에 대한 불편의 수준은 주요 고려 사항이어야합니다. 3,4

귀 펀칭 /노칭은 비용이 거의 없기 때문에 쥐와 쥐에서 일반적으로 사용되며 절차가 쉽게 수행됩니다. 대부분의 코드는 100에서 399의 상한을 갖는, 사용할 수있는 코드의 제한된 수가 있습니다. 귀 펀치 코드를 읽으려면 대부분의 동물을 스크러프에서 파악해야합니다. 그러나, 펀치는 PCR 유전자 측정을 위한 조직 견본으로 두 배로 할 수 있습니다, 이는 식별 및 유전자형 샘플링이 동시에 달성될 수 있게 해주므로, 따라서 반복 취급에서 동물에 대한 적은 응력의 결과로. 5

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References

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  2. Cover, C.E., Keenan, C.M., and Bettinger, G.E. 1989. Ear tag-induced Staphylococcus infection in mice. Laboratory Animals. 23:229-233.
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Transcript

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