Fuente: Laboratorio del Dr. B. Jill Venton - Universidad de Virginia
Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis) es uno de las más populares técnicas analíticas porque es muy versátil y capaz de detectar casi cualquier molécula. Con espectroscopía UV-Vis, la luz de UV-Vis se pasa a través de una muestra y se mide la transmitancia de la luz por una muestra. De la transmitancia (T), la absorbancia se puede calcular como A =-log (T). Un espectro de absorbancia se obtiene que muestra la absorbancia de un compuesto en diferentes longitudes de onda. La cantidad de la absorbancia a cualquier longitud de onda es debido a la estructura química de la molécula.
UV-Vis se puede utilizar de una manera cualitativa, para identificar grupos funcionales o confirmar la identidad de un compuesto haciendo coincidir el espectro de absorbancia. También puede ser utilizado de manera cuantitativa, como concentración del analito se relaciona la absorbancia con la ley de Beer. Espectroscopía UV-Vis se utiliza para cuantificar la cantidad de ADN o proteínas en una muestra, para análisis de aguas y como un detector para muchos tipos de cromatografía. Cinética de las reacciones químicas se miden también con espectroscopía UV-Vis tomando medidas repetidas de UV-Vis con el tiempo. UV-Vis son generalmente mediciones con un espectrofotómetro. UV-Vis es también un detector muy popular para otras técnicas analíticas como la cromatografía, pueden detectar muchos compuestos.
Por lo general, UV-Vis no es la técnica de espectroscopia más sensible, porque no mucha luz es absorbida sobre una longitud de ruta corta. Otras técnicas de espectroscopia tales como de fluorescencia tienen mayor sensibilidad, pero no son como generalmente aplicables, como la mayoría de las moléculas no es fluorescente. UV-Vis tiene una sensibilidad similar a otras mediciones de absorbancia, tales como espectroscopia de infrarrojo.
La espectroscopia ultravioleta-visible, o UV-Vis, es una de las técnicas analíticas más populares en el laboratorio.
En la espectroscopia UV-Vis, la luz pasa a través de una muestra a una longitud de onda específica en el espectro UV o visible. Si la muestra absorbe parte de la luz, no toda la luz pasará a través de ella ni se transmitirá. La transmisión es la relación entre la intensidad de la luz transmitida y la luz incidente y está correlacionada con la absorbancia. La absorbancia se puede utilizar de manera cuantitativa, para obtener la concentración de una muestra. También se puede utilizar de manera cualitativa, para identificar un compuesto haciendo coincidir la absorbancia medida en un rango de longitudes de onda, llamado espectro de absorbancia, con los datos publicados. Este video presentará la espectroscopia UV-Vis y demostrará su uso en el laboratorio para determinar la concentración de muestras y la cinética de reacción.
Cuando un fotón golpea una molécula y es absorbido, la molécula es promovida de su estado fundamental a un estado de energía más alto. La diferencia de energía entre los dos es la banda prohibida. La energía del fotón debe coincidir exactamente con la