Source : Laboratoire du Dr B. Jill Venton - University of Virginia

Spectroscopie ultraviolet-visible (UV-Vis) est une des techniques analytiques plus populaires, car il est très polyvalent et capable de détecter presque chaque molécule. Avec la spectroscopie UV-Vis, la lumière UV-Vis est passée à travers un échantillon et la transmission de la lumière par un échantillon est mesurée. De la transmission (T), l’absorption peut être calculée comme une =-log (T). Un spectre d’absorbance qui montre l’absorbance d’un composé à différentes longueurs d’onde est obtenu. Le montant de l’absorbance à une longueur d’onde est due à la structure chimique de la molécule.

UV-visible peut être utilisé de manière qualitative, pour identifier les groupes fonctionnels ou de confirmer l’identité d’un composé en comparant le spectre d’absorbance. Il peut également être utilisé de manière quantitative, comme concentration de l’analyte est liée à l’absorption à l’aide de la Loi de Beer. Spectroscopie ultraviolet-visible est utilisée pour quantifier la quantité d’ADN ou de protéines dans un échantillon pour analyse de l’eau et comme un détecteur pour de nombreux types de chromatographie. Cinétique des réactions chimiques sont également mesurée par spectroscopie UV-visible en prenant des mesures répétées de l’UV-visible au fil du temps. UV-Vis sont généralement pris avec un spectrophotomètre. UV-Vis est également un détecteur très populaire pour les autres techniques d’analyse, comme la chromatographie, parce qu’il peut détecter de nombreux composés.

En général, UV-Vis n’est pas la technique de spectroscopie plus sensible, car pas beaucoup de lumière est absorbée sur une longueur de chemin d’accès court. Autres techniques de spectroscopie comme la fluorescence ont une sensibilité plus élevée, mais ils ne sont pas généralement applicables, comme la plupart des molécules ne sont pas fluorescentes. UV-Vis a une sensibilité similaire aux autres mesures d’absorbance, telles que la spectroscopie infrarouge.