מקור: המעבדה של ד"ר .B ג'יל וטון - אוניברסיטת וירג'יניה

ספקטרוסקופיה אולטרה סגולה (UV-Vis) היא אחת הטכניקות האנליטיות הפופולריות ביותר מכיוון שהיא רב-תכליתית מאוד ומסוגלת לזהות כמעט כל מולקולה. עם ספקטרוסקופיית UV-Vis, אור UV-Vis מועבר דרך מדגם והעברת האור על ידי מדגם נמדדת. מהמשדר (T), ניתן לחשב את הספיגה כ- A=-log (T). ספקטרום ספיגה מתקבל המציג את הספיגה של תרכובת אורכי גל שונים. כמות הספיגה בכל אורך גל נובעת מהמבנה הכימי של המולקולה.

UV-Vis יכול לשמש באופן איכותי, לזהות קבוצות פונקציונליות או לאשר את זהותו של תרכובת על ידי התאמת ספקטרום הספיגה. ניתן להשתמש בו גם באופן כמותי, שכן ריכוז הניתוח קשור לספיגה באמצעות חוק הבירה. ספקטרוסקופיית UV-Vis משמשת לכימות כמות הדנ"א או החלבון במדגם, לניתוח מים וכגלאי לסוגים רבים של כרומטוגרפיה. קינטיקה של תגובות כימיות נמדדת גם עם ספקטרוסקופיית UV-Vis על ידי לקיחת מדידות UV-Vis חוזרות לאורך זמן. מדידות UV-Vis נלקחות בדרך כלל עם ספקטרופוטומטר. UV-Vis הוא גם גלאי פופולרי מאוד עבור טכניקות אנליטיות אחרות, כגון כרומטוגרפיה, כי זה יכול לזהות תרכובות רבות.

בדרך כלל, UV-Vis אינה טכניקת הספקטרוסקופיה הרגישה ביותר, כי לא הרבה אור נספג על פני אורך נתיב קצר. טכניקות ספקטרוסקופיות אחרות כגון פלואורסצנטיות יש רגישות גבוהה יותר, אבל הם אינם ישימים בדרך כלל, כמו רוב המולקולות אינן פלואורסצנטיות. ל-UV-Vis רגישות דומה למדידות ספיגה אחרות, כגון ספקטרוסקופיית אינפרא-אדום.

ספקטרוסקופיה אולטרה סגולה גלויה, או UV-Vis, היא אחת הטכניקות האנליטיות הפופולריות ביותר במעבדה.

בספקטרוסקופיה UV-Vis, האור מועבר דרך דגימה באורך גל מסוים בספקטרום ה-UV. אם הדגימה סופגת חלק מהאור, לא כל האור יעבור או יועבר. שידור הוא היחס בין עוצמת האור המועבר לאור הפוגע, והוא מתואם לספיגה. ניתן להשתמש בספיגה בצורה כמותית, כדי להשיג את ריכוז הדגימה. זה יכול לשמש גם בצורה איכותית, כדי לזהות תרכובת על ידי התאמת הספיגה הנמדדת על פני טווח של אורכי גל, הנקרא ספקטרום הספיגה, לנתונים שפורסמו. סרטון זה יציג ספקטרוסקופיה של UV-Vis, וידגים את השימוש בה במעבדה בקביעת ריכוז הדגימה וקינטיקה של התגובה.

כאשר פוטון פוגע במולקולה ונספג, המולקולה מקודמת ממצב הקרקע שלה למצב אנרגיה גבוה יותר. הפרש האנרגיה בין השניים הוא פער הלהקה. האנרגיה של הפוטון חייבת להתאים בדיוק לפער הפס על מנת שהפוטון ייקלט. המבנה הכימי קובע את פער הלהקה; לכן לכל מולקולה יש ספקטרום ספיגה ייחודי.

הספיגה עוקבת אחר חוק ביר, הקובע כי הספיגה שווה למקדם ההנחתה המולרי כפול אורך הנתיב והריכוז. מקדם ההנחתה המולרי קשור ליכולתה של התרכובת הבודדת לספוג אור באורך גל מסוים. אורך הנתיב מתייחס למרחק שעובר האור דרך הדגימה, שהוא בדרך כלל 1 ס"מ עבור קובטות סטנדרטיות. ניתן להשתמש בחוק באר לחישוב ריכוז הדגימה, אם הספיגה ידועה, או שניתן להשתמש בעקומת