출처: 박사의 실험실.B 질 벤턴 - 버지니아 대학
자외선가 시동(UV-Vis) 분광법은 매우 다재다능하고 거의 모든 분자를 검출할 수 있기 때문에 가장 인기 있는 분석 기술 중 하나입니다. UV-Vis 분광법을 사용하면 UV-Vis 광이 샘플을 통과하고 샘플에 의한 빛의 투과를 측정합니다. 송신(T)에서 흡광도는 A=로그(T)로 계산할 수 있다. 흡광도 스펙트럼은 상이한 파장에서 화합물의 흡광도를 나타낸다. 모든 파장에서의 흡광도의 양은 분자의 화학 적 구조에 기인한다.
UV-Vis는 질적 방식으로 사용될 수 있으며, 기능성 군을 식별하거나 흡광도 스펙트럼을 일치시킴으로써 화합물의 정체성을 확인할 수 있다. 또한 분석물의 농도가 맥주법을 사용하여 흡수와 관련이 있기 때문에 정량적 방식으로 사용될 수 있습니다. UV-Vis 분광법은 샘플, 물 분석 및 많은 유형의 크로마토그래피에 대한 검출기로 DNA 또는 단백질의 양을 정량화하는 데 사용됩니다. 화학 반응의 운동학은 또한 시간이 지남에 따라 반복UV-Vis 측정을 취하여 UV-Vis 분광법으로 측정됩니다. UV-Vis 측정은 일반적으로 분광계로 촬영됩니다. UV-Vis는 또한 많은 화합물을 검출할 수 있기 때문에 크로마토그래피와 같은 다른 분석 기술에 매우 인기 있는 검출기입니다.
일반적으로 UV-Vis는 가장 민감한 분광법이 아니며, 많은 빛이 짧은 경로 길이에 흡수되지 않기 때문입니다. 형광과 같은 그밖 분광법은 더 높은 감도가 있습니다, 그러나 대부분의 분자가 형광이 아니기 때문에 일반적으로 적용되지 않습니다. UV-Vis는 적외선 분광법과 같은 다른 흡광도 측정에 유사한 민감성을 가집니다.
자외선 가시광선 또는 UV-Vis, 분광법은 실험실에서 가장 널리 사용되는 분석 기법 중 하나입니다.
UV-Vis 분광법에서 빛은 UV™ 또는 가시광선 스펙트럼의 특정 파장에서 샘플을 통과합니다. 샘플이 빛의 일부를 흡수하면 모든 빛이 통과하거나 투과되는 것은 아닙니다. 투과율은 입사광에 대한 투과광의 강도의 비율이며 흡광도와 상관관계가 있습니다. 흡광도는 샘플의 농도를 얻기 위해 정량적 방식으로 사용할 수 있습니다. 또한 정성적 방식으로 사용하여 흡광도 스펙트럼이라고 하는 다양한 파장에서 측정된 흡광도를 게시된 데이터와 일치시켜 화합물을 식별할 수 있습니다. 이 동영상은 UV-Vis 분광법을 소개하고 실험실에서 시료 농도 및 반응 역학을 결정하는 데 UV-Vis 분광법이 어떻게 사용되는지를 보여줍니다.
광자가 분자에 부딪혀 흡수되면 분자는 바닥 상태에서 더 높은 에너지 상태로 승격됩니다. 둘 사이의 에너지 차이는 밴드 갭입니다. 광자의 에너지는 광자가 흡수되기 위해 밴드 갭과 정확히 일치해야 합니다. 화학 구조는 밴드 갭을 결정합니다. 따라서 분자는 각각 고유한 흡광도 스펙트럼을 가지고 있습니다.
흡광도는 Beer의 법칙을 따르며, 이 법칙에 따르면 흡광도는 몰 감쇠 계수에 경로 길이 및 농도를 곱한 값과 같습니다. 몰 감쇠 계수는 특정 파장의 빛을 흡수하는 개별 화합물의 능력과 관련이 있습니다. 경로 길이는 빛이 샘플을 통해 이동한 거리를 나타내며, 일반적으로 표준 큐벳의 경우 1cm입니다. Beer의 법칙은 흡수율이 알려진 경우 시료 농도를 계산하는 데 사용할 수 있거나 보정 곡선을 사용할 수 있습니다.
UV-Vis는 대부분의 분자가 UV 가시광선 파장 범위의 빛을 흡수하기 때문에 종종 일반 기술이라고 합니다. UV 범위는 100μm 400nm, 가시 스펙트럼 범위는 400μm 700nm입니다. 그러나 대부분의 분광 광도계는 100?200nm의 깊은 자외선 범위에서 작동하지 않습니다.이 범위의 광원은 비싸기 때문입니다. 대부분의 UV-Vis 분광 광도계는 170?375nm의 빛을 생성하는 UV 범위의 경우 중수소 램프를 사용하고, 가시 범위의 경우 350-2,500nm의 빛을 생성하는 텅스텐 필라멘트 램프를 사용합니다.
광원은 일반적으로 넓은 파장 범위를 가진 램프이기 때문에 특정 흡광도 파장은 필터 또는 모노크로메이터를 사용하여 선택합니다. 모노크로메이터(monochromator)는 빛의 파장을 공간적으