Źródło: Laboratorium dr B. Jill Venton - Uniwersytet Wirginii
Spektroskopia ultrafioletowo-widzialna (UV-Vis) jest jedną z najpopularniejszych technik analitycznych, ponieważ jest bardzo wszechstronna i jest w stanie wykryć prawie każdą cząsteczkę. W przypadku spektroskopii UV-Vis światło UV-Vis jest przepuszczane przez próbkę i mierzona jest przepuszczalność światła przez próbkę. Na podstawie transmitancji (T) absorbancję można obliczyć jako A=-log (T). Uzyskuje się widmo absorbancji, które pokazuje absorbancję związku przy różnych długościach fal. Wielkość absorbancji przy dowolnej długości fali wynika ze struktury chemicznej cząsteczki.
UV-Vis może być stosowany w sposób jakościowy, do identyfikacji grup funkcyjnych lub potwierdzania tożsamości związku poprzez dopasowanie widma absorbancji. Może być również stosowany w sposób ilościowy, ponieważ stężenie analitu jest związane z absorbancją za pomocą prawa Beera. Spektroskopia UV-VIS jest stosowana do ilościowego określania ilości DNA lub białka w próbce, do analizy wody oraz jako detektor w wielu typach chromatografii. Kinetyka reakcji chemicznych jest również mierzona za pomocą spektroskopii UV-VIS poprzez wykonywanie powtarzających się pomiarów UV-Vis w czasie. Pomiary UV-Vis są zazwyczaj wykonywane za pomocą spektrofotometru. UV-Vis jest również bardzo popularnym detektorem do innych technik analitycznych, takich jak chromatografia, ponieważ może wykrywać wiele związków.
Zazwyczaj UV-Vis nie jest najbardziej czułą techniką spektroskopii, ponieważ nie pochłania dużo światła na krótkim odcinku ścieżki. Inne techniki spektroskopowe, takie jak fluorescencja, mają wyższą czułość, ale nie mają tak ogólnego zastosowania, ponieważ większość cząsteczek nie jest fluorescencyjna. UV-Vis ma podobną czułość do innych pomiarów absorbancji, takich jak spektroskopia w podczerwieni.
Spektroskopia w ultrafiolecie widzialnym lub UV-Vis jest jedną z najpopularniejszych technik analitycznych w laboratorium.
W spektroskopii UV-VIS światło jest przepuszczane przez próbkę o określonej długości fali w widmie UV lub widzialnym. Jeśli próbka pochłonie część światła, nie całe światło zostanie przez nie przepuszczone lub przepuszczone. Transmisja to stosunek intensywności światła przepuszczanego do światła padającego i jest skorelowany z absorbancją. Absorbancję można wykorzystać w sposób ilościowy, w celu uzyskania stężenia próbki. Może być również używany w sposób jakościowy, do identyfikacji związku poprzez dopasowanie zmierzonej absorbancji w zakresie długości fal, zwanym widmem absorbancji, do opublikowanych danych. W tym filmie przedstawiono spektroskopię UV-VIS i zademonstrowano jej zastosowanie w laboratorium do określania stężenia próbki i kinetyki reakcji.
Kiedy foton uderza w cząsteczkę i jest absorbowany, cząsteczka jest przenoszona ze stanu podstawowego do wyższego stanu energetycznego. Różnica energii między nimi to przerwa energetyczna. Energia fotonu musi dokładnie odpowiadać przerwie energetycznej, aby foton został pochłonięty. Struktura chemiczna określa