Fonte: Laboratório da Dra.B. Jill Venton - Universidade da Virgínia
A espectroscopia ultravioleta visível (UV-Vis) é uma das técnicas analíticas mais populares porque é muito versátil e capaz de detectar quase todas as moléculas. Com espectroscopia UV-Vis, a luz UV-Vis é transmitida através de uma amostra e a transmissão da luz por uma amostra é medida. A partir da transmissão (T), a absorvância pode ser calculada como A=-log (T). Um espectro de absorvência é obtido que mostra a absorvência de um composto em diferentes comprimentos de onda. A quantidade de absorvância em qualquer comprimento de onda é devido à estrutura química da molécula.
UV-Vis pode ser usado de forma qualitativa, para identificar grupos funcionais ou confirmar a identidade de um composto, combinando com o espectro de absorvância. Também pode ser usado de forma quantitativa, pois a concentração do analito está relacionada à absorvância utilizando a Lei da Cerveja. A espectroscopia UV-Vis é usada para quantificar a quantidade de DNA ou proteína em uma amostra, para análise de água, e como detector para muitos tipos de cromatografia. Cinéticas de reações químicas também são medidas com espectroscopia UV-Vis, tomando repetidas medições UV-Vis ao longo do tempo. As medições UV-Vis são geralmente tomadas com um espectotômetro. UV-Vis também é um detector muito popular para outras técnicas analíticas, como a cromatografia, porque pode detectar muitos compostos.
Normalmente, UV-Vis não é a técnica de espectroscopia mais sensível, porque pouca luz é absorvida por um curto comprimento de caminho. Outras técnicas de espectroscopia, como a fluorescência, têm maior sensibilidade, mas não são tão geralmente aplicáveis, já que a maioria das moléculas não são fluorescentes. UV-Vis tem sensibilidade semelhante a outras medidas de absorção, como espectroscopia infravermelha.
A espectroscopia ultravioleta-visível, ou UV-Vis, é uma das técnicas analíticas mais populares no laboratório.
Na espectroscopia UV-Vis, a luz é passada através de uma amostra em um comprimento de onda específico no espectro UV ou visível. Se a amostra absorver parte da luz, nem toda a luz passará ou será transmitida. A transmissão é a razão entre a intensidade da luz transmitida e a luz incidente e está correlacionada com a absorbância. A absorbância pode ser usada de forma quantitativa, para obter a concentração de uma amostra. Também pode ser usado de maneira qualitativa, para identificar um composto, combinando a absorbância medida em uma faixa de comprimentos de onda, chamada espectro de absorbância, com os dados publicados. Este vídeo apresentará a espectroscopia UV-Vis e demonstrará seu uso em laboratório na determinação da concentração da amostra e da cinética da reação.
Quando um fóton atinge uma molécula e é absorvido, a molécula é promovida de seu estado fundamental para um estado de energia mais alto. A diferença de energia entre os dois é o intervalo de banda. A energia do fóton deve corresponder exatamente ao intervalo de banda para que o fóton seja absorvido. A estru