Источник: Лаборатория доктора Б. Джилл Вентон - Университет Вирджинии
Ультрафиолетово-видимая спектроскопия (УФ-Видимая) является одним из самых популярных аналитических методов, поскольку она очень универсальна и способна обнаруживать практически каждую молекулу. С помощью УФ-ВИД спектроскопии УФ-ВИД свет пропускается через образец и измеряется коэффициент пропускания света образцом. Исходя из коэффициента пропускания (Т), поглощение можно рассчитать как A=-log (Т). Получается спектр поглощения, показывающий поглощение соединения на разных длинах волн. Величина поглощения на любой длине волны обусловлена химической структурой молекулы.
УФ-ВИД может быть использован качественным образом, для идентификации функциональных групп или подтверждения идентичности соединения путем сопоставления спектра поглощения. Его также можно использовать в количественном отношении, так как концентрация аналита связана с абсорбцией по закону Пива. УФ-ВИД спектроскопия используется для количественного определения количества ДНК или белка в образце, для анализа воды, а также в качестве детектора для многих видов хроматографии. Кинетика химических реакций также измеряется с помощью УФ-ВИД спектроскопии путем проведения повторных измерений УФ-ВИД с течением времени. Измерения УФ-ВИД обычно проводятся с помощью спектрофотометра. УФ-ВИД также является очень популярным детектором для других аналитических методов, таких как хроматография, поскольку он может обнаруживать многие соединения.
Как правило, УФ-ВИД спектроскопия не является самым чувствительным методом спектроскопии, потому что на короткой длине пути поглощается не так много света. Другие методы спектроскопии, такие как флуоресценция, имеют более высокую чувствительность, но они не так широко применимы, так как большинство молекул не являются флуоресцентными. УФ-ВИД имеет схожую чувствительность с другими измерениями поглощения, такими как инфракрасная спектроскопия.
Ультрафиолетовая спектроскопия или УФ-видимая спектроскопия является одним из самых популярных аналитических методов в лаборатории.
При УФ-ВИД спектроскопии свет пропускается через образец на определенной длине волны в УФ-или видимом спектре. Если образец поглощает часть света, не весь свет будет пропускаться или пропускаться. Пропускание — это отношение интенсивности проходящего света к падающему свету, которое коррелирует с поглощением. Абсорбция может быть использована количественным образом, чтобы получить концентрацию образца. Он также может быть использован в качественном качестве для идентификации соединения путем сопоставления измеренного поглощения в диапазоне длин волн, называемого спектром поглощения, с опубликованными данными. В этом видеоролике будет представлена УФ-ВИД спектроскопия и продемонстрировано ее использование в лаборатории для определения концентрации образца и кинетики реакции.
Когда фотон попадает на молекулу и поглощается, молекула переходит из основного состояния в состояние с более высокой энергией. Разница энергий между ними и есть запрещенная зона. Энергия фотона должна точно соответствовать запрещенной зоне, чтобы фотон был поглощен. Химическая стру