Kaynak: Dr. B. Jill Venton'un Laboratuvarı - Virginia Üniversitesi
Ultraviyole görünür (UV-Vis) spektroskopi, çok yönlü olması ve neredeyse her molekülü tespit edebilmesi nedeniyle en popüler analitik tekniklerden biridir. UV-Vis spektroskopisi ile UV-Vis ışığı bir numuneden geçirilir ve ışığın bir numune tarafından geçirgenliği ölçülür. Geçirgenlikten (T), absorbans A=-log (T) olarak hesaplanabilir. Bir bileşiğin farklı dalga boylarında absorbansını gösteren bir absorbans spektrumu elde edilir. Herhangi bir dalga boyundaki absorbans miktarı, molekülün kimyasal yapısından kaynaklanmaktadır.
UV-Vis, fonksiyonel grupları tanımlamak veya absorbans spektrumunu eşleştirerek bir bileşiğin kimliğini doğrulamak için kalitatif bir şekilde kullanılabilir. Analitin konsantrasyonu, Beer Yasası kullanılarak absorbans ile ilişkili olduğundan, kantitatif bir şekilde de kullanılabilir. UV-Vis spektroskopisi, bir numunedeki DNA veya protein miktarını ölçmek için, su analizi için ve birçok kromatografi türü için bir dedektör olarak kullanılır. Kimyasal reaksiyonların kinetiği de UV-Vis spektroskopisi ile zaman içinde tekrarlanan UV-Vis ölçümleri alınarak ölçülür. UV-Vis ölçümleri genellikle bir spektrofotometre ile alınır. UV-Vis, kromatografi gibi diğer analitik teknikler için de çok popüler bir dedektördür, çünkü birçok bileşiği tespit edebilir.
Tipik olarak, UV-Vis en hassas spektroskopi tekniği değildir, çünkü kısa bir yol uzunluğu boyunca çok fazla ışık emilmez. Floresan gibi diğer spektroskopi teknikleri daha yüksek hassasiyete sahiptir, ancak çoğu molekül floresan olmadığı için genel olarak uygulanabilir değildir. UV-Vis, kızılötesi spektroskopi gibi diğer absorbans ölçümlerine benzer bir hassasiyete sahiptir.
Ultraviyole görünür veya UV-Vis spektroskopisi, laboratuvardaki en popüler analitik tekniklerden biridir.
UV-Vis spektroskopisinde ışık, UV veya görünür spektrumda belirli bir dalga boyunda bir numuneden geçirilir. Numune ışığın bir kısmını emerse, ışığın tamamı geçmeyecek veya iletilmeyecektir. İletim, iletilen ışığın yoğunluğunun gelen ışığa oranıdır ve absorpsiyon ile ilişkilidir. Absorbans, bir numunenin konsantrasyonunu elde etmek için kantitatif bir şekilde kullanılabilir. Ayrıca, absorbans spektrumu adı verilen bir dalga boyu aralığında ölçülen absorbansı yayınlanan verilerle eşleştirerek bir bileşiği tanımlamak için kalitatif bir şekilde de kullanılabilir. Bu videoda UV-Vis spektroskopisi tanıtılacak ve laboratuvarda numune konsantrasyonu ve reaksiyon kinetiğinin belirlenmesinde kullanımı gösterilecektir.
Bir foton bir moleküle çarptığında ve emildiğinde, molekül temel durumundan daha yüksek bir enerji durumuna terfi eder. İkisi arasındaki enerji farkı bant aralığıdır. Fotonun emilmesi için fotonun enerjisinin bant aralığıyla tam olarak eşleşmesi gerekir. Kimyasal yapı bant aralığını belirler; bu nedenle moleküllerin her biri benzersiz absorbans spektrumlarına sahiptir.
Abs