Overview
ソース: 研究所博士 b. ジル Venton - ヴァージニアの大学の
試料は、分析用の準備をサンプルを処理する方法です。注意サンプル準備、化学計測のための標準または不明なサンプルを正確に生成する分析化学で重要です。分析化学的手法でのエラーは、ランダムまたは体系的に分類されます。ランダムなエラーによる変更とはしばしば楽器のノイズによるエラーです。系統誤差は調査官または測定値でオフセットを紹介するインストゥルメンタルのバイアスが原因です。サンプル準備のエラーは、不確実性や不適切な校正曲線を誤り原因の分析を通じて伝達が体系的なエラーです。体系的なエラーは、適切なサンプル調製と計測器の適切な使用を排除できます。貧しいサンプル準備計測器に害を及ぼすを可能性もあります。
Principles
ソリューションをするためには、1 つは、測定対象物質の溶解度を考慮しなければなりません。興味の化合物を溶媒中で溶液を作成するために消滅させなければなりません。溶解性溶媒と試料の分子間相互作用の要因であるし、しばしば溶媒または pH の種類を変更することによって操作できます。
サンプルを作るの最初のステップは、適切なガラスを選択して、ソリューションをです。液相でのほとんどのサンプルは、メスフラスコで作られています。メスフラスコ (通常 20 ° C)、特定の温度で液体量を含むとクラス A ガラス製品である場合は 0.02% 未満が正確に調整されています。メスフラスコ、メスシリンダーより液体を測定するためにはるかに正確。
固体の解決をするためは、固体変更が校正スケールで正確に集結最初する必要があります。ただし、いくつかの試薬と沈殿物の質量は、吸湿性、水を吸着するために変更できます。試薬は水を吸着した場合モルの正しい数を取得する非水和分子の重量を使用することはないです。~ 110 ° C のオーブンで乾燥、熱安定性は、固体吸着水を削除するには固体試薬と沈殿物水の存在を吸着乾燥剤を含むデシケータに保存されます。
希釈するサンプルが液体である場合は、それを測定するピペットは通常使用します。ガラス転送ピペットは通常 1 つの正確なボリュームを提供する校正と最後の一滴、ピペットにとどまり、吹き飛ばされないする必要があります。測定のピペットはそれを複数のマーキングがあります-ビュレット-と同様、転送ピペットよりも汎用性が少なく正確な。小さい使い捨てプラスチック チップと変数 micropipetters を使用してボリュームを測定することができます 1-5,000 μ L. Micropipetters からのボリュームで利用可能とする必要がありますキャリブレーション精度を維持するために 6 ヶ月毎。プラスチックに問題がある場合、小さなシリンジは 1 マイクロリットル範囲内のボリュームを測定するため使用もできます。
解決策が行われた後、可能性があります適切なサンプル準備の他の要素があります。液体に固体残りすべてのサンプルはフィルター処理が必要です。伝統的なろ過は、ろ紙上に真空を引っ張ることができる腕とフィルター フラスコ ガラスフリット ガラス漏斗に座っているとセットアップを使用します。この種類のフィルターは、重量分析などの実験で沈殿物を収集するために使用されます。シリンジ フィルター サンプルが注射器に読み込まれるし、0.2 nm の分解能を持つポリマー フィルターを介して渡されますを介して分析することをより小さいサンプルをクリーンアップできます。さらに、サンプルは、フィルターで微量遠心チューブに装着されて、管は、遠心分離機で置かれ、フィルターの液体は遠心分離後、下部にスピン フィルターがあります。スピン フィルターも、タンパク質などの大きな検体を集中する使用されます。注射器とスピン フィルター汚染物質および計器または測定を妨げる可能性があります他の固体を除外する役に立ちます。ろ過の種類は、サンプルの量、および除外される必要がある固体のサイズによって異なります。
試料は、抽出またはサンプルを preconcentrating もあります。金属イオンを勉強して、キレートは選択的抽出に使用できます。金属イオンをキレート剤にバインドして、キレート錯体を抽出できます。マスキング剤、キレートする前にないキレート剤でキレートは、特定の金属イオンをバインドする使用されます。デマスキングの化学反応は、ソリューションに特定金属イオンを解放するために使用されます。マスキングより具体的なサンプル準備と特定の金属イオンの保護をことができます。
容解性は液体に溶解する物質の量です。一般的には、0.1 g 未満、100 mL の溶媒に溶解物質は溶解するといえます。溶解度が試料と分子間相互作用に依存したがって、溶解性の一般的なルールは「ディゾルブのように」と。極性物質は無極性 analytes は非極性溶媒によく溶解中極性溶媒によく溶解する傾向があります。液体中の固体の溶解度は、追加のエネルギーと分子運動のため高温で一般に大きいです。
キレートは、分子の結合サイトが複数あるポリオキソ リガンドによって行われます。金属イオンのための最も一般的なキレート剤は、エチレンジアミン四酢酸 (EDTA)、座と 2 窒素および 4 つの酸素原子がきついです。それは金属-EDTA 錯体形成時に失うことができる 6 の酸性プロトンがあります。バインディングの生成定数は特定の pH と pH がよくキレート反応の特異性を調整する調整されています。
EDTA は多くの異なる金属の複雑なことができます、ために、特定の金属の分析を実行するためにマスキングが必要です。キレート剤の添加前にマスキング剤を追加して、EDTA と反応から関心のイオンを守ること。マスキング剤-金属錯体の生成定数は、EDTA は反応しないので、EDTA 金属錯体の生成定数よりも大きくなければなりません。たとえば、フッ化物は、Al3 +と Fe3 +をマスクします。シアン化物は別の一般的なマスキング剤 Mg2 +Ca2 +、または Pb2 +と反応しないが Cd2 +Hg2 +Fe2 +Fe3 +、および Ni+など他の金属との反応が。シアン化物は、それは常に pH 11 上記ソリューションで使用する必要がありますので低 pH で有毒ガスを形成できます。デマスキング リリース仮面金属イオン;たとえばシアンは、ホルムアルデヒドを化学反応によって demasked することができます。マスキングとデマスキング複雑な混合物のコンポーネントを測定するための選択ができます。
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Procedure
1. 固体からソリューションを作成
- ソリューションを作成する正しいガラス製品を選択します。
- 1% 塩酸または硝酸溶液3不純物を取り除くとともに酸風呂経由で徹底的にガラスをクリーン (安全警告: 強い酸、手袋、ゴーグルおよび他の適切な個人用保護具を使用)。
- 蒸留水で何度もガラスをすすいでください。必要な場合は、オーブンで乾燥。
- 固体の適切な量を固形の塊からソリューションを提案します。
- 容積測定フラスコに固体を入れ、溶剤で完全な 3/4 について入力しています。
- 旋回、メスフラスコを完全に充填する前に固体を完全に溶解します。
- 行にメスフラスコをご記入ください。メニスカス充填ラインをタップする必要があります。必要に応じて、さらにミックスにキャップにフラスコを数回を反転します。
2. 液体からソリューションを作成
- ソリューションを作成する正しいガラス製品を選択します。転送ピペットを使用して液体を提供するには、ピペット ピペット電球を使用して行を入力します。
- ソリューションを作るためメスフラスコに液体を放出します。最後の一滴を吹かない。
- メニスカスに触れる行の行にメスフラスコを埋めます。数回反転によるソリューションをミックスします。
3. フィルタ リング
- フィルター フラスコ セットアップ ガラスフリット ガラス フィルターの濾紙片を配置します。
- ガラスフリット ガラス フィルターをフィルター フラスコに接続します。
- 真空をフィルター フラスコの腕に取り付けます。トラップは、任意の液体が真空に入るを防ぐためにも使用できます。
- 真空をオンにし、フィルター ペーパーを通してサンプルを注ぐ。
- フィルター乾燥粉末が残っているまで。乾燥の沈殿物が必要な場合は、オーブンで試料を乾燥し続けます。
- シリンジ フィルター サンプルをルアー ロック エンドと清潔なシリンジに追加します。
- ルアーロック シリンジ フィルターをネジします。注射器のプランジャーを押して、フィルター後の液体を収集します。
- スピン フィルター バッファーまたは純水フィルターをあらかじめすすいでください。
- 微量遠心チューブにスピン フィルターを挿入します。
- フィルターの上にサンプルをロードし、チューブのキャップします。
- チューブを正しく他の側とスピン フィルターの種類に応じて、10-30 分間遠心する別の管によってバランスをとるようにして、遠心分離機に入れ。
- フィルターを削除し、フィルタ リング ソリューション、液体の底には。
- サンプルが膜を通ることができない場合-大きなタンパク質など、上部フィルターのままになります。この場合、フィルターを裏返し、新しいチューブに入れて、再びスピンします。これは高濃度サンプルが生成されます。
4. マスキングとキレート
- マスキングとキレート、マスキング剤、キレート剤の生成定数に応じて適切な値に pH を調整します。
- マスキング剤をソリューションに追加し、選択の金属イオンと少なくとも 10 分のために反応します。
- キレート試薬を追加します。EDTA、1:1 の金属イオンとの複合体を形成する通常、キレートが金属として EDTA のできるだけ多くのモグラを追加します。
- キレート後、仮面の金属イオンと反応する化学物質を追加することによって緞子します。マスクされた物質の分析または沈殿物によって回復できます。
適切な試料は化学分析のすべてのタイプの重要な最初のステップです。
適切なサンプル準備エラーの可能性を減らすために不可欠です。いくつかの方法でエラーを軽減ことができます: の計算で有効数字に注意して適切なガラスの選択から。
多くの分析機器関心のサンプルの均一溶液を準備して最初必要があります。解散のプロセス-溶質が溶媒に溶ける-1 つまたは複数の解析で使用するため撤回することができる均一溶液の成形が可能します。
ただし、溶存のサンプルは、分析の準備ができる前に、追加の準備手順を多くの場合必要です。ろ過、抽出、またはキレートなどこれらの技術は、解析の前にも行われます。
このビデオでは、後続の化学物質の使用のための適切なサンプル準備のいくつかの重要なステップを説明します。
エラーは、組織的またはランダムのいずれかに分類できます。ランダムなエラーは、風などの環境条件などの予期せぬ変化に関連付けられます。
系統誤差は実験者や楽器のバイアスに関連付けられます。プロシージャとデバイスの両方を確保することによって試料でこれらのエラーを避けることが、バランスやピペットなど — が正しく使用されて。
サンプル ソリューションを準備するとき溶剤の選択は重要であり、使用している計測器の要件に基づくことができます。有機.が必要なもの、いくつかの楽器は水溶媒を必要とします。選択した液体で分解するサンプルに必要なです。溶解度は、溶媒と試料の分子間相互作用の要因であるし、しばしば pH や温度、溶媒の種類を変更することによって操作できます。
サンプル ソリューションは、正確な濃度が必要です。ソリューションを準備するには、固体試料は標準トップローディング バランス精度向上のためではなく、分析用天秤で重量を量った。固体試料は吸湿性、水分が含まれている場合は、オーブンまたはデシケータで計量する前に乾燥する必要があります。
試料が液体の場合は、重量又は容積が測定できます。体積測定を使用している場合必ず大卒業式で体積シリンダーなどの他の測定ガラス製品を使用する場合エラーを発生することができます、メスフラスコを使用してください。また、ガラス ピペットを使用できます。これらは通常、ピペットで残り最後の一滴と 1 つの正確なボリュームを提供する校正されています。
ソリューションを準備するために、メスフラスコで正確に測定サンプルを溶解します。当初は、試料を溶かす溶媒の最終巻より少ない使用します。混合した後、その最終巻にソリューションをもたらすために慎重に追加の溶剤を追加します。
ほとんどのサンプルを溶媒に溶解した後は、固体は、分析の前に削除する必要があります存在する可能性があります。これらの不要な固形物は、計器を損傷を避けるために濾過により除去することができます。
いくつかのケースで、別の化合物に溶解した金属をバインドしなければなりません、キレート剤と呼ばれる-を検出するために。このプロセスは、キレートと呼ばれます。不要な種では、キレート剤にバインドするときは、マスクする必要があります。
これを行うには、特定の金属のキレートを阻害するマスキング剤を追加します。これは、不要な金属が検出されるを防ぎます。デマスキング干渉の化合物は、金属イオンを解放し、彼らの分析を有効にすると、実行できます。
今では試料調製の基本が記載されている研究室で実行する方法を見てをみましょう。
まず、メスフラスコ、適切なサイズを選択します。
メスフラスコとストッパーを任意の吸着陽イオンを削除する 1% 塩酸に浸します。一晩浸漬後、フラスコとストッパーを削除します。
次に、メスフラスコと石鹸と脱イオン水でストッパーを洗浄し、徹底的にすすいでください。
フラスコと完全に乾燥するまで乾燥オーブンでストッパーを乾燥します。
フラスコがクールな必要なサンプルの重量を量る、それをフラスコに追加します。試料の質量を記録します。
フラスコに溶媒のボリュームの約 3/4 はストッパーを設置し、優しく.固体を溶解する渦を追加します。
メニスカス フラスコの目盛りに触れるまでは、溶剤の残りの部分を追加します。フラスコをストッパーし、それを徹底的にミックスする数回を反転します。
削除不溶固体は注射器にサンプルをロード、先端にシリンジ フィルターを配置、フィルターを通してサンプルを押し出すプランジャーを押します。収集したサンプルは、今完全の準備をして分析です。
分析するサンプルが固体ではなく液体の場合、ピペットを用いて使用して測定できます。きれいなメスフラスコとストッパーにはじまって、フラスコに適切な量のサンプルを追加し、ボリュームを記録します。
溶媒を追加し、固体試料の行われるようにサンプルの準備が完了します。
溶存サンプルが必要な金属キレートとマスキングなど鉄存在下でキレート カルシウム分析でベースを追加することによって適切な pH にサンプルを調整します。
マスキング剤キレートから鉄を保護するためにシアン化水素を追加します。少なくとも 10 分反応することができます。
EDTA はカルシウムをキレートし、混在させることができますを追加します。1:1 の錯体を形成するのに十分なを使用します。このサンプルは、カルシウム定量のため準備が整いました。
鉄分析に同じサンプルを使用するには、ホルムアルデヒドを追加することによって鉄を緞子し、ミックスします。サンプルは、鉄分析の準備が整いました。
サンプル調製は、ほぼすべての実験と分析法の化学者によって使用される重要なステップです。
工業用排ガスは、微細藻類を培養するため、二酸化炭素の発生源として使用できます。ガスからの重金属汚染が問題であるかどうかを理解するためにこの例で育つ藻は重金属含有量を分析しました。
成長期後藻バイオリアクター流体から遠心分離によって集められ、凍結サンプルの準備プロセスを開始する前に乾燥。
乾燥藻は、過酸化水素、硝酸、熱を使用して化学分析用に適した均一溶液を準備するために消化されました。この例では重金属をキレートを使用するのではなく、誘導結合プラズマ質量分析法、または ICP-MS を使用して調べた。
消化の藻類の誘導結合プラズマ質量分析は、干渉することがなく同時に 12 の金属を検出することができたし、培養で使用される排ガス中の金属汚染物質が藻類のバイオマスで終わったことを示した。
適切な試料は、原子吸光分光法を用いた土壌など複雑な材料を勉強するときにも重要です。
この実験では乾燥土壌のサンプル分析用天秤に最初秤量。それは 1:1 の水と消化管にした添加し、ピペットを利用した硝酸の濃縮します。
後いくつかの消化手順サンプルすべての固体を削除するを濾過し、容積測定フラスコで収集されました。付加的な水は、希薄溶液分析のために追加されました。
脂質ポリエステルは、細胞壁の部品の構造のコンポーネントを構成します。GC-MS を使用してこれらの化学物質を研究するために植物組織は最初収集、重量を量った。
様々 な処理手順を乾燥後トルエンとヘプタンの 1:1 の混合物は、乾燥試料を溶かしに追加されました。
バイアルは、GC/MS 分析のための自動ローディング トレイに挿入されました。
試料調製にゼウスの導入を見てきただけ。その後の分析のため液体・固体試料の準備の基本を理解する必要があります今すぐ。
見てくれてありがとう!
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Applications and Summary
サンプルをクリーンアップする、生物学的解析でしばしばスピン フィルターを使用します。セル換散から細胞の残骸が問題の場合は、サンプル フィルター スピンをすることができ、下部濾液粒子から無料となります。蛋白質または他の大きい試料に集中する場合は、タンパク質を通過できない小さな細孔膜フィルターを使用できます。スピン フィルターより小さい分子が下部に濾液になり、破棄されます。フィルターを反転しスピン再び別の管にそれフィルターから解放でき集中してフォームで収集しました。シリンジ フィルターは、粒子が列を詰まらせる楽器の問題の原因となる、クロマトグラフィーのサンプルからほこりや他の小さな粒子を削除する多くの場合使用されます。
EDTA は金属の内容を判別する滴定によく使用されます。EDTA の付加モル数の金属のモル数に等しい。キレートは微量金属分析の抽出にも使用されます。金属をキレートが電荷を中和し、キレート剤が疎水性グループを持っている場合、有機溶媒に抽出することができます。マスキングは、キレート、したがってされて抽出されてから金属を防ぎます。このメソッドは、サンプルのクリーンアップや微量金属の分離濃縮と使用できます。
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