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Retirada de Sangue II

Overview

Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidade de Notre Dame, IN

A coleta de sangue de camundongos e ratos para análise pode ser feita através de uma variedade de métodos. Cada método de coleta tem variações no tipo de contenção necessária, na invasividade do procedimento e na necessidade de um anestésico geral. 1 Historicamente, o uso da cavidade sinusal retro-orbital tem sido utilizado, mas não sem debate. A controvérsia relacionada aos potenciais danos teciduais, ou mesmo cegueira, causada por sangramentos retro-orbitais levou ao desenvolvimento de métodos de sangramento facial e submandibular em camundongos. A coleta de sangue da veia safena em camundongos e ratos é outra técnica que foi desenvolvida. Esses procedimentos não requerem anestesia e, portanto, são adequados quando o uso de anestésicos pode confundir resultados sanguíneos ou outros dados.

Principles

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Há uma veia facial no rato que corre do plexo ocular através da bochecha, e uma veia submandibular que corre ao longo da mandíbula inferior. Ambas as naves convergem para a veia jugular logo abaixo da linha da mandíbula, tornando-as facilmente acessíveis. Amostras seriais podem ser colhidas de qualquer vaso alternando o lado utilizado. No entanto, nenhum dos lados deve ser usado com mais frequência do que a cada 5-7 dias. 2

Precauções precisam ser tomadas durante a realização de uma veia facial. Como o canal auditivo está localizado perto da veia facial, se a ponta lanceta for direcionada caudalmente, o canal será perfurado. Isso resultará em um efeito de sifão fazendo com que o sangue venha da orelha. Apesar disso, o sangue ainda pode ser coletado, e o rato não sofrerá nenhum dano permanente. No entanto, isso pode fazer com que o animal agite a cabeça, espalhando sangue na gaiola.

Quando se sangrando da veia submandibular, a profundidade de inserção da agulha é crítica. Uma profundidade de inserção superior a 4-5,5 mm pode resultar em trauma nos músculos, nervos e outros vasos que estão na cabeça, pescoço e cavidade oral. Complicações subsequentes incluem hemorragia excessiva resultando em hipovolemia, afogamento causado pelo fluido na boca e danos às estruturas orais que interferem na alimentação e na bebida.

A contenção do animal é crucial para um sangramento bem sucedido tanto para a veia facial quanto para os procedimentos da veia submandibular. Se o aperto no scruff estiver muito apertado, o fluxo sanguíneo para a veia facial pode ser restringido. Isso resultará em uma redução no volume coletado. Os volumes de coleta variam tanto na veia facial quanto na veia submandibular. É imprescindível limitar os volumes de coleta para que não excedam o volume máximo de coleta de sangue de sobrevivência de acordo com as políticas institucionais e um protocolo animal aprovado. Garantir a hemostasia uma vez que a quantidade desejada é coletada evitará perda de sangue adicional ou excessiva. 2

A coleta de sangue da veia safena é outra alternativa viável para sangramentos em série. A veia lateral safena é um vaso superficial que corre dorsalmente, e depois lateralmente, através da articulação tarsal. 3 Embora este procedimento possa ser mais esteticamente aceitável do que o sangramento retro-orbital, devido à preparação necessária e sem uso de anestesia para este método - ele pode realmente ser mais estressante para o animal. Complicações que podem surgir de uma hemorragia safena estão relacionadas ao local da punção. Se a punção da agulha não estiver diretamente no vaso, o sangue pode se acumular subcutâneamente, resultando em um hematoma. Contusões, possíveis infecções e favorecimento do membro são outros possíveis problemas. Este método requer treinamento, mas é facilmente compreendido. Os volumes coletados com este método estão entre 10-150 μL, dependendo da frequência da amostragem. 4 As amostras são variáveis em qualidade, pois podem conter produtos teciduais. Não mais do que quatro amostras de sangue devem ser colhidas dentro de um período de 24 horas da mesma perna.

A veia femoral é outra opção para coleta de sangue em um rato. A veia femoral corre no aspecto medial da perna traseira da virilha até a articulação do joelho antes de cruzar o joelho e tornar-se o lateral safeno, tornando-o facilmente acessível. Embora este procedimento possa ser feito sem o uso de um anestésico, ele requer duas pessoas uma pessoa vai segurar a perna no ponto onde a perna e o abdômen se conectam para ocluir a veia, enquanto o outro realiza a venipunctura e coleta o sangue.

A vantagem de usar a veia femoral é que um volume maior é mais facilmente coletado a partir dele do que da veia safena. No entanto, como a veia femoral é grande, é propensa à formação de hematoma. Isso pode ser exacerbado por um aperto muito firme na perna, o que pode causar contusões adicionais. Com este método de coleta de sangue, há variação na quantidade de sangue coletada devido ao sangramento após a remoção da agulha. É imperativo garantir hemostasia para evitar essa perda excessiva de sangue.

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Procedure

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1. Veia facial sangra em camundongos

  1. Equipamento
    1. A coleta de sangue é de uma captura grátis em um tubo de sangue ou um tubo Eppendorf. Em alguns casos, é desejável coletar sangue diretamente em tubos hematócritos.
    2. As lancetas goldenrod serão selecionadas com base no tamanho apropriado para o animal de acordo com a idade e o sexo.
      1. As lancetas são selecionadas de acordo com a idade/tamanho dos ratos da seguinte forma:
        Lancet de 4mm: camundongos de 3-4 semanas de idade (menos de 15 gramas de peso corporal)
        Lancet de 5mm: camundongos fêmeas com menos de 10 semanas (menos de ~20 gramas de peso corporal)
        Lancet de 5mm: camundongos machos com menos de 6 semanas (menos de ~20 gramas de peso corporal)
        Lancet de 5mm: para amostras de gota única (para manchas de sangue)
        Lancet de 5,5 mm: camundongos fêmeas ao longo de 10 semanas (mais de ~20 gramas de peso corporal)
        Lancet de 5,5 mm: camundongos machos ao longo de 6 semanas (mais de ~20 gramas de peso corporal)
        Lancet de 5,5 mm: amostras grandes
  2. Restrição
    1. Os ratos são contidos usando a técnica de scruffing.
    2. É importante que o movimento lado a lado da cabeça seja minimizado. Isso garante uma venipuntura precisa e segura com a lanceta.
  3. Retirada de sangue
    1. A lanceta de tamanho adequado é mantida perpendicular à superfície da pele.
    2. O ponto lanceta é ligeiramente angular, com a ponta voltada para o nariz.
    3. A lâmina lanceta é melhor usada em uma posição vertical.
    4. Enquanto restringe o mouse, localize a área aproximada da veia facial medindo o comprimento do olho abaixo do canthus lateral e a largura do olho caudalmente.
    5. Com o ponto da lanceta, sinta suavemente o ponto em que a mandíbula termina.
    6. Para melhor precisão na pontuação do vaso, posicione o mouse em recumbência lateral.
    7. Fure a pele até o ombro da lanceta naquele momento. Isso é feito com um empurrão firme e não como jogar um dardo.
    8. Após a remoção da lança, o sangue começará a fluir.
    9. Para auxiliar o fluxo sanguíneo, posicione o rato com a cabeça mais baixa que o coração.
    10. Recolher o sangue no vaso de coleta desejado.
    11. Borrue o local da punção e solte pressão no scruff para hemostasia.

Figure 1
Figura 1. Veia facial sangra em camundongos.

2. Sangramento submandibular em camundongos: Embora muito semelhante à técnica para o sangramento da veia facial, há variações no equipamento e diferenças sutis neste procedimento de sangramento.

  1. Equipamento
    1. A coleta do sangue é de uma captura gratuita em um tubo de sangue ou um tubo Eppendorf. Em alguns casos, é desejável coletar diretamente em tubos hematócritos.
    2. As agulhas de calibre 18-22 são selecionadas com base no tamanho adequado para o animal de acordo com a idade e o sexo.
      1. As agulhas são selecionadas de acordo com a idade/tamanho dos ratos da seguinte forma:
        22 medidor: camundongos de 3 a 4 semanas (menos de 15 gramas de peso corporal)
        20 medidor: camundongos fêmeas com menos de 10 semanas (menos de ~20 gramas de peso corporal)
        20 medidor: camundongos machos com menos de 6 semanas (abaixo de ~20 gramas de peso corporal)
        20 medidor: para amostras de gota única (para manchas de sangue)
        18 medidor: camundongos fêmeas ao longo de 10 semanas (mais de ~20 gramas de peso corporal)
        18 medidor: camundongos machos ao longo de 6 semanas (mais de ~20 gramas de peso corporal)
        18 medidor: amostras grandes
  2. Restrição
    1. Os ratos são contidos usando a técnica de scruffing.
    2. É importante que o movimento lado a lado da cabeça seja minimizado. Isso garante uma venipuntura precisa e segura com a agulha.
  3. Retirada de sangue
    1. A agulha é mantida perpendicular à superfície da pele.
    2. Enquanto restringe o rato, localize a área aproximada da veia submandibular pelo ponto onde uma linha do canto da boca cruza uma linha do canthus lateral do olho. Isso coincide com uma pequena covinha sem pelos encontrada caudal no canto da boca e ligeiramente abaixo da linha da mandíbula.
    3. Para melhor precisão na pontuação do vaso, posicione o mouse em recumbência lateral.
    4. Fure a pele com a ponta da agulha nesse ponto. Isso é feito com um empurrão firme e não como jogar um dardo.
    5. A agulha não está inserida além da ponta do bisel.
    6. Após a remoção da agulha, o sangue começará a fluir.
    7. Para auxiliar o fluxo sanguíneo, posicione o rato com a cabeça mais baixa que o coração.
    8. Recolher o sangue no vaso de coleta desejado.
    9. Limpe o local da punção e solte a pressão sobre o scruff para hemostasia.

Figure 2
Figura 2. Veia submandibular sangra em camundongos.

3. Sangrous de Saphenous

  1. Equipamento
    1. Cones de contenção flexíveis e de plástico transparente podem ser usados tanto para o rato quanto para o rato. Para camundongos, tubos cônicos plásticos modificados de 50 mililitros podem ser usados para contenção. Para ratos, tubos de contenção plexiglas modificados - com uma ranhura larga o suficiente para estender a perna traseira - pode ser usado.
    2. Ao utilizar o cone plástico, ele é medido contra o comprimento do corpo do animal, e um orifício oval é cortado ao nível da coxa.
    3. Um tubo cônico pode ser modificado para um rato para este método de coleta de sangue cortando a extremidade do tubo para permitir um orifício respiratório. Uma ranhura é cortada da extremidade da tampa do tubo com cerca de 1/2 polegada de largura e 2 polegadas de comprimento. As bordas são cobertas em fita adesiva ou suavizadas para a segurança animal.
    4. Um torniquete é fabricado usando uma seringa de 3 cc e um comprimento de sutura nãoabsorbável de 2-0. 3
    5. A pomada de antibiótico triplo ou geleia de petróleo branca é usada como uma barreira à prova de umidade na pele.
    6. Uma agulha de calibre 22 é o tamanho preferido para a venipunctura.
    7. O sangue é coletado diretamente nos tubos hematócritos.
  2. Restrição
    1. Cones plásticos flexíveis
      1. O rato ou rato é colocado no nariz do cone primeiro.
      2. A extremidade do cone é dobrada e fechada usando um pequeno clipe de aglutinante para evitar que o animal saia do cone de contenção.
      3. A perna traseira é puxada suavemente através da abertura oval para a virilha.
    2. Tubo cônico para ratos
      1. O rato é colocado no tubo primeiro.
      2. A perna traseira é guiada suavemente para dentro da fenda.
      3. O dedo médio é colocado sobre a extremidade do tubo para evitar que o rato saia do tubo.
      4. O dedo indicador e o polegar estabilizam a perna do rato.
    3. Tubo de contenção plexiglas para ratos
      1. O rato é colocado no tubo primeiro.
      2. A perna traseira é guiada suavemente para dentro da fenda.
      3. A extremidade do tubo é fixada para evitar que o rato se levante e saia do tubo.
      4. O dedo indicador e o polegar estabilizam a perna do rato.
  3. Retirada de sangue
    1. O cabelo é removido do aspecto lateral da perna do hock para o sufoco. Isso pode ser feito arrancando, barbeando ou usando um creme depilatório.
    2. Uma vez que o cabelo tenha sido removido, uma pequena quantidade de pomada é aplicada e espalhada em uma camada muito fina na área sem pelos.
    3. O torniquete é aplicado o mais rápido possível e apertado.
    4. O vaso safeno que atravessa a superfície externa da perna do joelho até o tornozelo começará a encher e será levantado e fácil de visualizar.
    5. A agulha é mantida perpendicular à superfície da pele diretamente sobre o vaso sanguíneo. Perfure o vaso. Tenha cuidado para não inserir a agulha profundamente na perna, para evitar perfurar o músculo ou bater osso.
    6. O sangue subirá na superfície da perna para coleta com o tubo hematócrito.
    7. Uma vez coletado o sangue, solte o torniquete e aplique pressão sobre a punção para hemostasia.
    8. Uma vez que o sangramento tenha parado, remova o animal da contenção e devolva-o para a gaiola.

Figure 1
Figura 3. Veia safena sangra em camundongos.

4. Veia femoral para ratos

  1. Equipamento
    1. O sangue é coletado em um tubo hematócrito.
    2. A pomada antibiótica tripla é necessária para criar uma barreira entre a pele/cabelo e a gota de sangue.
    3. Uma agulha calibre 22 é usada para perfurar a veia.
    4. Um cortador de cabelo pequeno e portátil com aproximadamente uma lâmina de largura de 1" é usado para cortar o cabelo da perna.
  2. Restrição
    1. Os ratos são contidos usando um cone de contenção de plástico transparente e flexível.
    2. Os cones plásticos são medidos contra o comprimento do corpo e um orifício oval cortado no nível da coxa. O cone é cortado de tal forma que a perna traseira pode ser exteriorizada com acesso à veia.
  3. Retirada de sangue
    1. O cabelo é raspado da superfície interna da perna da virilha até o joelho.
    2. A pomada antibiótica tripla é aplicada em uma camada fina no local da punção.
    3. A pessoa de contenção oclui a veia e segura o rato com a superfície interna da perna voltada para o flebotomista.
    4. Use a agulha para perfurar a veia. A agulha é mantida perpendicular ao vaso sanguíneo e a punção é feita diretamente na veia.
    5. A punção é feita o mais próximo possível do joelho, permitindo uma amostragem adicional anterior ao primeiro local de coleta de sangue.
    6. A nave é superficial. Portanto, a profundidade da punção não deve ser mais profunda do que o comprimento do bisel da agulha.
    7. Para auxiliar o fluxo sanguíneo, posicione o rato com a perna mais baixa que o coração.
    8. Colete o sangue nos tubos hematócritos enquanto ele se encolhia na superfície da pele.
    9. Solte a pressão na perna e aplique pressão no local da punção para alcançar hemostasia.

Figure 4
Figura 4. Veia femoral sangra em ratos.

A coleta de sangue de camundongos e ratos é necessária para uma ampla variedade de estudos científicos, e pesquisadores desenvolveram diferentes métodos para alcançar objetivos experimentais específicos.

Na primeira parte, discutimos a consideração geral da retirada de sangue e revisamos o sangramento retro-orbital dos olhos, cortes de cauda e cortes, bem como métodos de coleta de sangue intra-cardíaco. Aqui, delinearemos os procedimentos para coleta de sangue das veias faciais, submandibulares, safenas e femorais. Esses métodos são menos invasivos e não requerem anestesia, o que os torna métodos de escolha quando o uso de anestésicos pode confundir resultados sanguíneos ou outros dados.

Vamos começar com o procedimento para obter uma amostra de sangue de uma veia facial murina. No mouse, há uma veia facial facilmente acessível que atravessa a bochecha. Comece escolhendo o equipamento adequado para o procedimento. Basicamente, você precisa de um pequeno tubo de centrífuga para coleta de sangue e uma lanceta, que está disponível em diferentes tamanhos. A seleção da lanceta correta depende da idade, sexo e peso corporal do animal e tamanho da amostra a ser coletada. Consulte o protocolo de texto para obter detalhes sobre a seleção lancet.

Comece o procedimento restringindo o animal usando a técnica de scruffing. A contenção adequada minimiza o movimento lado a lado da cabeça e ajuda a garantir uma venipuntura precisa e segura com a lanceta. Se a aderência estiver muito apertada, o fluxo sanguíneo pode ser restrito, resultando em um volume reduzido coletado. Uma vez que o animal é contido, localize a área aproximada da veia facial medindo o comprimento do olho abaixo do canthus lateral e a largura do olho caudalmente. Com a ponta da lanceta sinta suavemente o ponto em que a mandíbula termina. Para obter uma melhor precisão na pontuação do vaso, você pode querer posicionar o mouse de lado.

Agora, no local de inserção, segure o lanceta perpendicular à superfície da pele com a ponta voltada ligeiramente para o nariz. Isso é crítico, porque se a ponta lanceta for direcionada caudalmente, o canal auditivo será perfurado causando sangramento da orelha. Para perfurar a veia, aplique um empurrão firme e fure a pele até o ombro lanceta. Após a remoção, o sangue começará a fluir. Para auxiliar o fluxo, posicione o animal com a cabeça mais baixa que o coração. Para parar o sangramento, borre o local da punção para alcançar hemostasia e evitar perda excessiva de sangue. Por fim, solte a pressão sobre o scruff e devolva o animal para sua gaiola. Observe que os volumes de coleta variam, mas é imprescindível NÃO exceder o volume máximo para coleta de sangue de sobrevivência. Consulte o protocolo de texto do vídeo Retirada de Sangue Um para obter detalhes sobre o volume máximo recomendado de coleta. Amostras seriais podem ser colhidas alternando o lado utilizado. Nenhum dos lados deve ser usado com mais frequência do que a cada 5-7 dias.

Agora vamos rever o método de sangramento da veia submandibular. Embora isso seja muito semelhante à técnica para o sangramento da veia facial, há variações no equipamento e diferenças sutis no procedimento de sangramento.

A veia submandibular corre ao longo da mandíbula inferior do rato e converge com a veia facial na veia jugular. Em vez de uma lanceta, este método é realizado usando agulhas. Mas, assim como as lancetas, a seleção do medidor de agulhas depende da idade, sexo e tamanho do peso e amostra do animal - veja o protocolo de texto para detalhes.

Para começar, escroto o animal da mesma forma que para a veia facial sangrar de modo que haja um movimento mínimo lado a lado da cabeça. Lembre-se - aderência excessivamente apertada pode diminuir o volume de coleta de sangue. Enquanto restringe o rato, imagine uma linha do canto da boca através do rosto e uma linha do canthus lateral do olho. O ponto de intersecção dessas linhas é a área aproximada da veia submandibular. Isso coincide com uma pequena covinha sem pelos encontrada caudal no canto da boca e ligeiramente abaixo da linha da mandíbula.

Para melhor precisão, coloque o animal em recumbência lateral (3.6.1). Em seguida, segure a agulha perpendicular à superfície da pele e insira-a com um empurrão firme. NÃO insira a agulha além da ponta de bisel, pois a profundidade de inserção maior que essa pode resultar em trauma nos músculos, nervos e outros vasos que estão na cabeça, pescoço e cavidade oral. Após a remoção da agulha, o sangue começará a fluir. Como para a veia facial sangrar, posicione o rato com a cabeça mais baixa que o coração para ajudar no fluxo sanguíneo. Finalmente, borre o local da punção para alcançar hemostasia e solte pressão sobre o scruff para devolver o animal à sua gaiola.

Agora, vamos aprender a coletar sangue da veia safena. Esta veia é um vaso superficial que corre dorsalmente e, em seguida, lateralmente através da articulação tarsal.

O equipamento que você precisa para este procedimento inclui um dispositivo de contenção, que pode ser um plástico flexível para ratos ou, para ratos, um tubo cônico plástico modificado de 50 mililitros pode ser usado. Observe que a extremidade do tubo é cortada para permitir um orifício de respiração, e uma fenda de meia polegada de largura e 2 polegadas de comprimento é cortada da extremidade da tampa. As bordas estão cobertas de fita de coágulo para a segurança do animal. Este procedimento também requer um torniquete - fabricado usando uma seringa de 3 cc e um comprimento de 0-2 sutura não absorvível, pomada tripla com antibiótico com um cotonete - para ser usado como uma barreira à prova de umidade entre a pele e a gota de sangue, um cortador de cabelo, uma agulha de calibre 22 para venipuntura, e tubo hematócrito para coleta de sangue.

Para conter um rato, coloque-o no tubo, nariz primeiro. Em seguida, guie suavemente a perna traseira para dentro da fenda e estabilize-a usando o dedo indicador e o polegar. Posteriormente, raspe o cabelo do aspecto lateral da perna do hock até o sufoco. Em seguida, borriize uma camada muito fina da pomada antibiótico tripla para a área sem pelos. Depois disso, aplique o torniquete o mais longe possível e aperte-o. O vaso safeno que atravessa a superfície externa do joelho até o tornozelo começará a encher e será levantado e fácil de visualizar.

Em seguida, segure uma agulha de calibre 22 diretamente sobre o vaso sanguíneo e perpendicular à superfície da pele. E perfure o vaso, tomando cuidado para não inserir a agulha muito profundamente e perfurando músculo ou osso. O sangue subirá na superfície da perna para coleta em um tubo hematócrito. Uma vez coletado o sangue, solte o torniquete e aplique pressão sobre a punção para hemostasia. Depois que o sangramento parar, remova o animal da contenção e devolva-o para sua gaiola. Os volumes coletados com este método variam entre 10 e 150 μL, dependendo da frequência da amostragem. E a qualidade da amostra é variável, pois pode conter produtos tecidos. Não devem ser colhidas mais de 4 amostras de sangue dentro de um período de 24 horas da mesma perna.

Por fim, aprenderemos a coletar sangue da veia femoral, que é outra opção para coleta de sangue em um rato. A veia femoral corre no aspecto medial da perna traseira da virilha até a articulação do joelho antes de cruzar o joelho e tornar-se a veia lateral safena, tornando-a facilmente acessível.

A vantagem da sangria da veia femoral é que um volume maior é mais facilmente coletado do que da veia safena. A desvantagem é que esse procedimento, em um animal consciente, requer duas pessoas. Os equipamentos necessários para este procedimento são semelhantes ao método de veia safena, exceto que não requer o torniquete, e o dispositivo de contenção preferível é um cone flexível. Para selecionar o cone correto, meça-o contra o comprimento do corpo do animal e, em seguida, faça um orifício oval cortado ao nível da coxa.

Para conter o animal, coloque-o no tubo, nariz primeiro. Em seguida, dobre a extremidade do cone e feche-a usando um pequeno clipe de aglutinante para evitar que o animal saia. Agora puxe a perna traseira através da abertura oval para ter acesso à veia femoral. Não segure muito fortemente, pois pode exacerbar a formação de hematoma. Em seguida, raspe a superfície interna da perna da virilha até o joelho, e aplique fina camada de pomada antibiótico tripla na área sem pelos. Posteriormente, a pessoa de contenção deve ocluir a veia femoral e agarrar o rato com superfície interna da perna voltada para a pessoa que vai tirar sangue. Segurando a agulha de 22 bitola perpendicular ao vaso sanguíneo, perfure diretamente a veia e colete o sangue em tubos hematócritos enquanto ele escorre na superfície da pele. A punção deve ser o mais próximo possível do joelho para permitir uma amostragem futura anterior a este local. Além disso, certifique-se de que a profundidade da punção não é mais profunda do que o comprimento do bisel da agulha. Para auxiliar o fluxo sanguíneo, posicione o rato com a perna mais baixa que o coração. Por fim, solte a pressão sobre a perna e aplique pressão no local da punção para alcançar hemostasia e evitar perda excessiva de sangue. Observe que significativamente mais quantidade de sangue pode ser coletada usando este procedimento.

Depois de discutir o básico das técnicas de coleta de sangue, vamos rever alguns exemplos de por que esses procedimentos podem ser úteis para a pesquisa científica

O sangue é frequentemente analisado para confirmar a resposta imune durante o desenvolvimento da vacina. Aqui, os pesquisadores entregaram uma vacina de peptídeo para animais que sofrem de câncer de bexiga. Em seguida, coletaram sangue através da veia submandibular e separaram o soro para detectar os níveis de diferentes citocinas, que servem como indicadores de eficácia da vacina.

A coleta de sangue também é comumente realizada para testar a eficácia de um tratamento, estudando biomarcadores da doença humana, como os níveis de glicose no diabetes. Esses pesquisadores estavam interessados em testar a eficácia de uma nova terapia genética entregue através da veia da cauda em animais diabéticos. Após a injeção, esses pesquisadores coletaram sangue da veia safena em vários pontos de tempo para analisar o efeito de diferentes protocolos de tratamento no nível de glicose no sangue.

Por fim, para alguns experimentos, é importante conhecer o estado básico do animal, como níveis de inflamação ou estresse. Neste exemplo, o plasma de sangue foi coletado de um rato antes e depois de um evento estressante. E como você pode ver, a corticosterona, ou o hormônio do estresse, o nível é mais alto em animais dez minutos após o evento estressante.

Você acabou de assistir a segunda parte do JoVE sobre técnicas de retirada de sangue para ratos e ratos. Depois de assistir a esses dois vídeos, você deve ter uma melhor compreensão das considerações e procedimentos para a coleta de sangue desses animais e como eles estão sendo usados em pesquisas biomédicas hoje em dia. Como sempre, obrigado por assistir!

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Applications and Summary

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O método de coleta de sangue pode causar uma variação na análise da amostra. O nível de habilidade do técnico que realiza a coleta de amostras tem impacto na qualidade da amostra e no bem-estar do animal. O uso de anestésicos também pode afetar a qualidade da amostra. Os métodos aqui descritos são todos realizados sem o uso de anestesia, assim essa variável foi eliminada. Além disso, todas essas técnicas podem ser utilizadas para amostragem serial com mínimo desconforto ao animal.

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References

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