Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
Lab Animal Research

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

שיקולים לניתוח מכרסמים
 
Click here for the English version

שיקולים לניתוח מכרסמים

Overview

מקור: קיי סטיוארט, RVT, RLATG, CMAR; ואלרי א. שרודר, אר.די.ג'י, אר-אל-ג'י. אוניברסיטת נוטרדאם, IN

המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה1 מכתיב שניתוח הישרדות מכרסמים יבוצע באופן כאפטי. טכניקה אספטית משתמשת בפרקטיקות ספציפיות הממזערות את הזיהום של האתר הכירורגי, כולל הכנת המטופל, הכנת המנתחים, עיקור מכשירים ואספקה אחרת, ושימוש בסביבה נקייה ומבוקרת. תכנון טרום כירורגי, ניטור תוך ניתוחי וטיפול לאחר הניתוח חיוניים להתאוששות מוצלחת של בעלי חיים מניתוחי הישרדות.

Principles

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

הליכים כירורגיים מסווגים כהישרדות או לא-עביריים וגדולים או מינוריים. ניתוח הישרדות הוא הליך כירורגי המבוצע על חיה חיה, מורדמת לחלוטין, שצפויה להחלים לחלוטין הן מההרדמה והן מההליך. ניתוח לא-קרקעי או סופני הוא הליך כירורגי המסתיים בהמתת חסד של החיה לפני החלמתה מהרדמה. ניתוח גדול כרוך בחשיפה או בחדירה של חלל גוף - חלל בית החזה או חלל הבטן - או ניתוח שיגרום לליקוי פיזי או פיזיולוגי קבוע, כגון כריתת איבר. ניתוח קטן אינו חודר לחלל הגוף או גורם למחסור קבוע, כגון השתלה תת עורית של משדר. כל הניתוחים דורשים שהחיה תהיה מרדים כראוי ותטופלו בצורה אנושית. 2

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Procedure

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. תכנון פרסוקרתי

למרות שההנחיות אינן מחייבות כי ניתוחי מכרסמים יבוצעו במתקן כירורגי ייעודי, יש לחטא את האזור המשמש בחומר חיטוי משטחים קשיח מתאים, אשר יש להשתמש בו בהתאם לריכוזים ולזמני המגע המפורטים של היצרן. האזור צריך גם להישמר ללא עומס, ולא להיות בקו הישיר של צינורות האספקה והפליטה, שכן הטיוטות יכולות לתרום להיפותרמיה של החיה. הגישה לחדר צריכה להיות מוגבלת בעת ביצוע הליכים כירורגיים. יש לייעד גם אזור להכנה כירורגית (במיוחד להסרת שיער החיה), ולהחלמה וטיפול לאחר הניתוח, ובסמיכות, אם לא בתוך חדר הניתוח. באופן כללי, אם ניתוחים מבוצעים באופן שגרתי באזור מסוים, אין להשתמש באזור לפעילויות אחרות.

ההכנות לפני הניתוח צריכות לכלול בדיקה גופנית של המטופל הכירורגי כדי לזהות כל מצב בריאותי בסיסי שעלול להפריע לניתוח. מאז מכרסמים יש קצב חילוף החומרים גבוה כל כך, עתודות שומן מוגבל מאוד, הם לא צריכים להיות צמים לפני הניתוח. מצב הלחות של החיה צריך להיות מוערך על ידי בדיקת גמישות העור. העור מעל הכתפיים מורם בעדינות. אצל בעל חיים מיובש בדרך כלל, העור ייפול במהירות בחזרה למקומו, ואילו בחיה מיובשת, העור לא יחזור מיד למצבו הרגיל. מראה כללי, כגון יציבה ואת מצב מעיל השיער, יש לציין גם. בעל חיים שמפגין תנוחה כפופה, או שיש לו מעיל שיער לא מלוטש, עשוי להיות מחסה מחלה. הבדיקה צריכה להתבצע ממש לפני מתן ההרדמה, ויש לציין תנאים חריגים בתרשים של החיה. 2 לבסוף, שיקולים לאנטומיה ופיזיולוגיה של החולדה או העכבר חייבים להיעשות בעת הכנתם לניתוח.

2. פלטפורמה

לשני המינים יש יחס שטח-פנים גבוה לנפח הגוף, מה שהופך אותם לרגישים להיפותרמיה במהלך הליכים כירורגיים, במיוחד כאשר הניתוח חושף את חלל הגוף. המאמצים למנוע היפותרמיה כוללים שימוש בפלטפורמה כירורגית מחוממת.

הפלטפורמה המשמשת לניתוח מכרסמים, הבנויה בדרך כלל מפלדת אל-חלד או פלסטיק קשיח, חייבת להיות מכוסה בחומר בידוד או במקור חום משלים כדי למנוע מחום הגוף של החיה לברוח במהלך ההליך. מקורות חום משלימים כוללים רפידות חימום במחזור מים, שמיכות מחממות אוויר כפויות, מנורות חום או שכבה של ריפוד קצף המכסה את הפלטפורמה הכירורגית. פלטפורמות כירורגיות עם מקור חום מובנה זמינות מסחרית. כל הפלטפורמות חייבות להיות מחומר שחוטא בקלות ואטום ללחות.

שיטות אחרות למניעת היפותרמיה כוללות שימוש במבודדים המוניים, הצבת חומרי בידוד בין החיה לפלטפורמה הכירורגית ושימוש במקורות חום חיצוניים. 3 מבודדי מסה ללכוד אוויר בתוך מטריצת סיבים, לייצר "אוויר דומם" המקיף את החיה. ניתן להשתמש בשמיכות מים חמים מתחת למטופל. ציוד זה זמין בגדלים שונים ממכרסם לסוס, ומאפשר תמיכה תרמית מדויקת עם תרמוסטטים מובנים.

מקורות חימום המופעלים כימית יכולים להיות חד פעמיים או לשימוש חוזר. סוג אחד מורכב משקיות פלסטיק מלאות בתמיסה כימית ודיסק מתכת, אשר כאשר לחוץ יוצר תגובה exothermal. זה גורם לנוזל להתמצק ולשחרר חום. בדרך כלל, יש להם כמות מוגבלת של חום והם מתאימים רק להליכים קצרים. מקורות חימום כימיים אחרים זמינים כמוצקים בטמפרטורת החדר, אבל כאשר מחומם, הם הופכים נוזל. כאשר בעל חיים מונח על הכרית, הנוזל משחרר חום, ותכולת הכרית מתמצקת כשהם מתקררים. אלה יכולים לשחרר חום על פני תקופה ארוכה בהרבה. כיתרון, הם לא יכולים לעלות על טמפרטורת ההפעלה (~ 39 מעלות צלזיוס), ובכך לבטל את הצורך תרמוסטט.

חבילות מים זמינות כבקבוקי מים חמים המורכבים משקית גומי או סיליקון עם פקק. האריזות מלאות במים חמים הפולטים חום על פני השטח החיצוניים. החבילה תאבד בהדרגה חום כשהמים יתקררו. גרסה מודרנית יותר מורכבת מיריעת פלסטיק עם בד חדיר מים דבוק למעלה. החלל שביניהם מלא באבקה הידרופילית, אשר סופגת מים ומתנפחת. זה יכול לשמש גם מקור חום או כמקור קירור. בהתאם לאיכות החומרים, ניתן לעשות בו שימוש חוזר ולחמם אותו מחדש במיקרוגל או להשרות אותו במים חמים.

יש לנקוט אמצעי זהירות בעת שימוש במקורות חום חיצוניים. טמפרטורת הגוף צריכה להיות מנוטרת או עם בדיקה רקטלית או מדחום להציב ליד החיה על מקור החום. יש לבדוק אם קיימים פגמים בכל מקורות החום החיצוניים לפני השימוש.

3. הסרת שיער

יש להקדים את האתר הכירורגי כדי למזער את זיהום החתך. השיער צריך להיות מקוצץ או הוסר עם קרם depilatory כימי, אשר ממיס את השיער על הזקיק. 2,3 למרות גזירת השיער יכול לפעמים להתבצע על חיה מודעת עם איפוק ידני, היישום של קרם depilatory צריך להיעשות רק על חיה מרדימה כדי למנוע בליעה של המוצר, נזק לעיניים, והסרת שיער עודף. גילוח עם סכין גילוח הוא אופציה אם אין ברירה. שיטה זו דורשת מיומנות טכנית, זמן נוסף וסבלנות כדי למנוע חתכים בעור. השדה הכירורגי צריך להיות גדול מספיק כדי לאפשר חתך ותפירה ללא הכללת פרווה לתוך הפצע הכירורגי, אבל קטן ככל האפשר כדי למנוע את החמרת היפותרמיה.

  1. מסיכה
    1. ניתן לקצוץ את השיער באמצעות קוצץ חשמלי או מופעל באמצעות סוללה, רצוי עם להב A40 כירורגי. יש לקחת בחשבון את רוחב הלהב. להב 2 אינץ' סטנדרטי יכול לשמש לחולדות, בעוד להב בגודל 1/2-1 אינץ' מתאים יותר לעכברים.
    2. השיער נחתך כנגד כיוון הצמיחה. למתוח את העור כדי לייצב אותו, כמו מכרסמים יש חיבור רופף של העור לשריר הבסיסי.
    3. יש להקפיד להימנע מחיתוך או חיתוך העור. הקצה השטוח של הלהב ממוקם על העור בעת גזירת השיער. הלהב לא צריך לשמש עם השיניים בניצב לעור.

Figure 1
איור 1. המיקום הנכון של קוצץ שיער בזמן הגילוח.

  1. קרמים כימיים או קרמים
    1. יש למרוח את המוצר על אזור האתר הכירורגי.
    2. לאחר 10 דקות, העור חייב להיות שטוף לחלוטין וניקוי של כל עקבות של depilatory כדי למנוע גירוי או כוויות כימיות על העור.

4. קרצוף כירורגי

פתרונות קרצוף כירורגיים לשימוש צריך: 1) להפחית באופן משמעותי חיידקים נוכחים על העור מכילים הכנה מיקרוביאלית לא מכתיבה; 2) יש ספקטרום רחב של תכונות מיקרוביאלית; 3) להיות מהיר משחק; ו-4) פעילות מתמשכת ומצטברת.

שני פתרונות קרצוף ניקוי נפוצים הם כלורהקסינים ויודופורים. פתרונות כלורהקסידין יעילים נגד חיידקים ווירוסים אפילו בנוכחות חומר אורגני. לעומת זאת, ליודופורים יש מגוון רחב של פעולות מיקרוביציאליות, אך יעילותם מופחתת בנוכחות חומר אורגני; הפעילות השיורית נמוכה מזו של הכלורהקסינים.

שטיפות המשמשות בין המדים הן מים סטריליים או אלכוהול. פתרונות מבוססי אלכוהול המכילים 60-95% אלכוהול יש פעולות מיקרוביאלית נהדרות באמצעות denaturing של חלבונים. 2 עם זאת, אלכוהול יכול להיות מגורה עור חזק. מים סטריליים יעילים בשטיפה של האזור, אך אין לו תכונות מיקרוביאלית.

  1. השתמש ספוג גזה לח כדי להסיר פסולת ברוטו כולל שיער וקשקשים.
  2. תמיסת ניקוי חיטוי ספוגה על כרית גזה מוחלת על העור החל באתר החתירה. חיטוי צריך להתחיל לאורך קו החתך ולהשתרע כלפי חוץ בתבנית מעגלית.
  3. השטיפה החיטוי מוחלת לאחר מכן החל באתר החתכים. העור מנגב בתבנית מעגלית המתפתלת מקו החתך לפריפריה של השדה הכירורגי כדי להסיר את תמיסת הניקוי.
  4. זה חוזר על עצמו שלוש פעמים.
  5. לאחר שטיפה סופית, כרית גזה סטרילית ממוקמת מעל השדה הכירורגי. גזה זו עשויה להיות רטובה עם אלכוהול או יוד. הגזה תוסר ברגע שהחיה תועבר ותוצב בעמדה על פלטפורמה כירורגית או על השולחן / הספסל הכירורגי.

אזורים בגוף שבהם לא נעשה שימוש בשיטות הקרצוף הכירורגיות הסטנדרטיות כוללים את העיניים, הפה והאזור האנאלי. מכיוון שפני השטח של העין ייפגעו אם נעשה שימוש בפתרונות קרצוף, קרצוף כירורגי נעשה רק לעפעפיים לאחר הטמעת משחה מגנה בעין. במצבים מסוימים, תמיסת מלח מאוזנת מבחינה פיזיולוגית משמשת כדי לשטוף את העין כדי להסיר פסולת ברוטו לדלל כל חיידק לרמה מקובלת על ניתוח להתרחש. הפה גם מוכיח שקשה לנקות מספיק לניתוח. זה יכול להיות שטוף עם תמיסת מלח מאוזנת מבחינה פיזיולוגית כדי לדלל כל חיידקים; עם זאת, חשוב להימנע משימוש יותר מדי מלוחים, אשר יכול לגרום לשאיפה של הנוזל. ניתן לנגב חניכיים, שיניים ולשון עם חומר חיטוי לא טוקסיקי. עם זאת, יישום פתרונות קרומים הריריים יכול לגרום לספיגה מערכתית. ניתוחים באזור האנאלי, כגון הפחתה כירורגית של צניחות רקטליות, אינם נחשבים לניתוחים נקיים. השימוש בכמה פתרונות חיטוי יכול להגביר את הנזק לרקמות ולמנוע או להאריך ריפוי. השימוש בתמיסת מלח מאוזנת מבחינה פיזיולוגית כדי לשטוף את האזור נקי של פסולת ברוטו היא השיטה המועדפת של הכנה כירורגית. 2,4

5. מיקום

מיקום המטופל עבור הליכי בטן כרוך באבטחת הגפיים של החיה הנוטה על הפלטפורמה עם סרט או קשירה. בעת שימוש קשירה כדי להאריך את הגפיים, יש לנקוט זהירות כדי למנוע את זרימת הדם על הרגליים להיות בסכנה, כדי למנוע מתח מוגזם על הגפיים ומתיחה קיצונית של הגפיים שעלול לפגוע במפרקים, כדי למנוע את המכשול של הנשימה. הקשרים צריכים להיות שחרור מהיר עם רק חצי לולאת תקלה מעל האיבר. כמה פלטפורמות זמינות מסחרית מגיעות עם נסיגה גפיים מובנית המורכבת ווים או לולאות של חוט נירוסטה או שרשרת כדור, אשר ניתן להתאים לפי גודל החיה. אם נעשה שימוש בסרט, יש לדבוק בו במשטחים יבשים.

6. וילונות

לאחר שבעל החיים מוכן ומוצב על הפלטפורמה הכירורגית, וילונות כירורגיים משמשים למניעת זיהום של חומר תפירה ולשמור על שדה סטרילי באתר הניתוח. וילונות יכולים להיות חומר בד רב פעמי, חומר חד פעמי מנייר או חומר דבק פלסטיק חד פעמי.

וילונות נייר חד פעמיים יש מטריצת סיבים ארוגים עבור כוח המאפשר חיתוך לתוך כל צורה או גודל, כולל חיתוך גפן או פתיחה בוילונות, ללא קרע או שבירה של הקצוות לחתוך. הם גם דוחי לחות. ניתן לרכוש את הווילונות החד פעמיים ארוזים מראש ומוכנות מראש במגוון גדלים וצורות. וילונות בד אינם מיועדים להיחתך על ידי המנתח כדי ליצור גדר. הם נרכשים עם חתך מראש וגידור קצה קשור. וילונות בד דורשים הלבנה ועיקור. כאשר מטופלים היטב, וילונות בד יכולים להימשך שנים, מה שהופך אותם להשקעה חסכונית.

הן וילונות נייר והן וילונות בד מוחזקים במקום עם מהדקי מגבת דרך עור החיה אם הוא מכרסם גדול יותר, כגון חולדה בוגרת. עבור מכרסמים קטנים יותר, הוילון אינו מודבק על העור, אשר דורש דריכות וטיפול מצד המנתח לא להתנתק או להזיז את הוילון לאחר שהוא הוצב על החיה.

וילונות דבק הם ברורים או אטומים. הווילונות הצלולים עדיפים לניתוחי מכרסמים, שכן הם מאפשרים הדמיה ישירה של החיה. כמה וילונות פלסטיק הם שילוב של פלסטיק ונייר, כאשר אזור הפלסטיק נמצא ישירות מעל החיה ואזור הנייר המגדיר את השדה הסטרילי המורחב. החלק של הוילון כי הוא ישירות מעל אתר החתך כירורגי נועד לדבוק באזור החתך. לאחר מכן המנתח יכול לחתוך ישירות דרך הפלסטיק בעת ביצוע חתך העור. ניילון נצמד מעוקר התקבל כחומר חסכוני ושימושי לניתוחי מכרסמים. יש להזהירות כדי למנוע התכווצות התנועה לנשימה כאשר העטיפה ממוקמת סביב המטופל. העטיפה תשמור על חום הגוף, תאפשר הדמיה של המטופל ותספק מחסום לחות בין השדה הסטרילי לחיה. זה יכול לשמש גם כדי לסייע מיצוב והחזקה של החיה לניתוח במקום קיבוע גפיים.

וילונות מכל סוג צריך להיות התגלגל בקפידה כדי למנוע מגע עם אזורים לא סטריליים, ציוד, וכוח אדם; הם אף פעם לא צריכים להיות התגלגל על ידי רועד או מנופף.

  1. וילונות נייר: בשיטת וילונות יחיד, הוילון נפתח כדי לאפשר חיתוך של הגפן אם אחד לא חתוך מראש.
    1. המנתח יניח את הוילון מעל החיה שישאיר את הידיים בצד הוילון שלא ייגע בחולה.
    2. הוילון מותאם כך שהשדה הכירורגי נראה דרך ההגשה.
    3. הוילון מוחזק במקום עם מהדקי מגבת דרך העור של החיה במקרה של חולדות גדולות יותר.
  2. נייר או פלסטיק עם חלון דבק
    1. וילון עם חלון דבק דורש קילוף של אזור הנייר כדי לאפשר לאזור הדבק להיצמד לשדה הניתוחי.
    2. כאשר פותחים את הוילון הסטרילי, אזור הדבק הוא בדרך כלל האזור העליון ונגיש בקלות למנתח.
    3. לאחר שהדבק נחשף, הוילון נפתח בקפידה ופונה כך שהצד הדביק פונה לחיה.
    4. זה הכרחי כי וילון ממוקם כראוי, כמו ברגע הדבק מגעים עם החיה זה לא יהיה מסוגל להיות מותאם.
    5. המנתח צריך ללחוץ בעדינות על הדבק לשדה הניתוחי כדי ליצור חותם עם העור.
  3. וילונות בד
    1. אין לחתוך וילונות בד עם פנסים, ולכן באחריות המנתח לבחור וילון עם פתח גדול מספיק כדי לחשוף כראוי את האזור הכירורגי, אך לא כל כך גדול כדי לאפשר חשיפה של כל משטחי גוף לא מגולחים ולא מוכנים.
    2. הוילון נפתח בקפידה כדי לחשוף את השומר.
    3. המנתח יניח את הוילון מעל החיה, ישאיר את הידיים בצד הוילון שלא ייגע בחולה.
    4. הוילון מותאם כך שהשדה הכירורגי נראה דרך ההגשה.

Figure 2
איור 2. שדה כירורגי הנראה דרך השומר של וילון ממוקם כראוי.

  1. וילונות דבק: חומר חסכוני ושימושי לניתוחי מכרסמים. 5
    1. יש לשלוף את הוילון מהגליל באופן שיבטיח שהקטע בו נעשה שימוש יישאר סטרילי.
    2. העוזר הכירורגי פותח את הקופסה ומושך אורך של העטיפה החוצה, נזהר להימנע מלגעת בו לקופסה או לכל משטח אחר.
    3. המנתח תופס את העטיפה בכל צד, והעוזר חותך את הקצה שהם מחזיקים (כ -3-4 אינץ ').
    4. לאחר השלכת הקצה החתוך, המסייע גם חותך את המקטע משאר הגליל.
    5. המנתח תופס צד אחד של העטיפה ומניח אותו מעל החיה.
    6. המאפיינים של העטיפה מאפשרים לו לדבוק בכל המשטחים.
    7. המנתח לוחץ את הסרט על החיה ויוצר שדה סטרילי.
    8. אין צורך להשתמש מלחצי מגבת או לדאוג כי הוילון ישתנה.
    9. יש להזהירות כדי למנוע התכווצות התנועה לנשימה. העטיפה תשמור על חום הגוף, תאפשר הדמיה של המטופל ותספק מחסום לחות בין השדה הסטרילי לחיה.

7. ניטור תוך-הניתוחי

חולים מרדים חייבים להיות במעקב אחר טמפרטורת הגוף, נשימה, וקצב הלב עד שהם החלימו לחלוטין.

ניתן לעקוב אחר טמפרטורת הגוף במישרין או בעקיפין. לניטור ישיר, יש להשתמש בבדיקה רקטלית שתוכננה במיוחד עבור מכרסמים. מדי חום רקטליים קטנים של בעלי חיים, כספית או דיגיטליים, גדולים מדי לשימוש בעכברים וחולדות ללא נזק הסוגר האנאלי ורקמות רקטליות. בזנים רגישים, השימוש בהם יכול לזרז צניחה רקטלית. ניטור עקיף כרוך בהנחת מדחום ליד החיה או מתחת לגוף על מקור חימום חיצוני. למרות שזה לא ייתן טמפרטורת גוף מדויקת, זה יכול להצביע על האפקטיביות של מקור החום ולאפשר התאמות כדי להפחית או להגדיל את החום לפי הצורך.

קשה לתבל את קצב הלב ולספור את הנשימה על מכרסמים קטנים ללא ציוד מיוחד.

רוב הניטור הוא חזותי ורק יצביע על נוכחות או היעדר נשימה בחזה או בבטן. קצב הלב מוערך כנוכח או נעדר על ידי מישוש או התבוננות חזותית של תנועה עדינה של דופן החזה. זה לא יכול להיות אפשרי במהלך ניתוח עקב וילונות ואת הגודל הקטן של החיה.

ניטור נוסף יכול להיעשות באמצעות אלקטרוקרדיוגרמה (אק"ג) ואוקסימטרי דופק. האק"ג מעריך את מצב הלב של מכרסם במהלך הרדמה וניתוח. אוקסימטר הדופק משתמש בשחזור אור אדום ואינפרא אדום כדי למדוד חמצן בדם עורקי. טכנולוגיה זו הותאמה לשימוש במכרסמים באמצעות הזנב או כף רגל. שני סוגי המדידות השוטפות הלא פולשניות של הסימנים החיוניים של המטופל נגישים בקלות עם הפרעה מינימלית של התחום הכירורגי.

8. ניטור לאחר הניתוח

יש לשקול להשתמש כרית חימום מתחת לפוסטורגיה של כלוב ההתאוששות. בנוסף, יש לספק מנטל לפני הניתוח ולאחר הניתוח במידת האפשר. הוראות המן יעילות ביותר בהפחתת עוצמת הגירוי הכואב כאשר ניתנה לפני האירוע הכואב. היתרונות של שימוש מראש של משקעים כוללים את הפחתת עוצמת הגירוי הכואב, שיפור רמת הנוחות של החיה פוסטורגיה, הפחתת כמות ההרדמה הנדרשת כדי לשמור על מטוס כירורגי, והתאוששות חלקה יותר מהרדמה לאחר סיום ההליך. תרופות נפוצות לפני תמנע ולאחר הניתוח מוצגות בטבלה 1. 6

מחלקת סמים שם המינון תדירות
תרופה נוגדת דלקת לא סטרואידית (חומר לא מבוקר) קטופרפן 2-5 מ"ג/ק"ג עכברי SC
5 מ"ג/ק"ג חולדות SC
כל 12-24 שעות
כל 12-24 שעות
תרופה נוגדת דלקת לא סטרואידית (חומר לא מבוקר) פלוניקסין מגלומינים 2.5 מ"ג/ק"ג עכברי SC כל 12-24 שעות
תרופה נוגדת דלקת לא סטרואידית (חומר לא מבוקר) מלוקימצלמת 5-10 מ"ג/ק"ג עכברי PO או 1-2 מ"ג/ק"ג עכברי SC
5-10 מ"ג/ק"ג PO או 1-2 מ"ג/ק"ג חולדות SC או PO
כל 12-24 שעות
כל 24 שעות
כל 12-24 שעות
כל 24 שעות
תרופה נוגדת דלקת לא סטרואידית (חומר לא מבוקר) אצטמופין 50 מ"ג/ק"ג SC/IP או 100 מ"ג/ק"ג חולדות PO כל 8-12 שעות
אופיואידים (חומר מבוקר) בטורפנול 0.5-3.0 מ"ג/ק"ג SC או 0.2-2 מ"ג/ק"ג עכברי IP
2.0 מ"ג/ק"ג SC
0.2-2 מ"ג/ק"ג חולדות IP
כל 4 שעות
כל שעתיים עד 4 שעות
כל 4 שעות
כל שעתיים עד 4 שעות
אופיואידים (חומר מבוקר) בופרנורפין 0.05-2.5 מ"ג/ק"ג SC או עכברי IP
0.01 – 0.5 מ"ג/ק"ג חולדות SC
כל 6-12 שעות
כל 8-12 שעות
אופיואידים (חומר מבוקר) אוקסימורפון 0.2-0.5 מ"ג/ק"ג עכברי SC
0.2-0.5 מ"ג/ק"ג חולדות SC
כל 6-12 שעות
כל 6-12 שעות

טבלה 1. תרופות מנע לאחר הניתוח נפוץ.

הנחיות לטיפול ושימוש בחיות מעבדה קובעות כי ניתוח הישרדות מכרסמים יבוצע באופן טפיטי ואנושי. זאת כדי להבטיח שיש טראומה מינימלית לחיה; אין זיהום עקב ההליך הכירורגי עצמו; כדי למנוע היפותרמיה; ולהפחית את הכאב ואת אי הנוחות הנגרמים על ידי הצעדים ה פולשניים.

סרטון זה יבחן את השיקולים הכלליים לתכנון טרום ניתוחי, ניטור תוך ניתוחי וטיפול לאחר ניתוח. זה יהיה ואחריו הדגמה של כמה סוגים של ניתוחים שבוצעו במחקר ביו-רפואי היום.

ראשית, בואו נסקור את שלבי ההכנה שמדען צריך לבצע לפני כל ניתוח מכרסמים. האזור שבו הניתוח יבוצע צריך להיות נקי מעומס ויש לחטא אותו בחומר חיטוי משטחים קשיח מתאים. שים לב כי האזור לא צריך להיות בקו ישיר עם האוורור, כמו טיוטות יכול לתרום היפותרמיה של המטופל. כדי למנוע עוד יותר היפותרמיה, פלטפורמת הניתוח צריך להיות מבודד עם מקור חום משלים.

יש לחטא את המכשירים הכירורגיים לפני היד. עטפו אותם בכיסים הניתנים להפעלה אוטומטית בנפרד והניחו אותם בתצורת אוהל בתוך האוטוקלבה כדי לאפשר חדירת קיטור מלאה. כאשר מבוצעים ניתוחים סדרתיים, לעקר את המכשירים בין כל בעל חיים עם מחטא חרוזים במשך 10-15 שניות. הקפד לקרר את המכשיר לפני השימוש בו על החיה הבאה.

מספר ימים לפני הניתוח, התבונן בבעלי החיים כדי להעריך את מצב הגוף שלהם, תיאבון, צריכת מים, שתן וצואה. בנוסף, שימו לב לתנוחת הגוף ולמצב מעיל השיער. בעל חיים המציג תנוחה כפופה או מעיל שיער לא מלוטש עשוי להיות מחסה מחלה ולא יכול להיות מועמד טוב לניתוח.

מכיוון שלמכרסמים יש קצב חילוף חומרים כה גבוה ורזרבות שומן מוגבלות מאוד, אין לצום לפני הניתוח. להעריך את מצב הידרציה של החיה על ידי ביצוע בדיקת גמישות העור. כדי לעשות זאת, בעדינות להרים את העור מעל הכתפיים. אצל חיה מיובשת בדרך כלל, העור ייפול במהירות למקומו, ואילו בחיה מיובשת העור לא יחזור מיד למצבו הרגיל.

לאחר הגדרת אזור הניתוח ולוודא כי החיה במצב בריאותי טוב, אתה יכול להתחיל להכין את החיה להליך. הצעד הראשון הוא יראת חסד. על מנת להבין כיצד לגרום ולשמור על הרדמה עיין בסרטון אחר באוסף זה. לאחר החיה הוא מסומם, להסיר אותו מהתא ומניחים אותו על כרית הגילוח. שים לב כי גילוח צריך להתבצע באזור הרחק הפלטפורמה הכירורגית כדי למנוע כל זיהום. יש למרוח משחת עיניים חומר סיכה למניעת ייבוש העיניים, במיוחד לניתוחים ארוכים יחסית.

גילוח נעשה בדרך כלל באמצעות קוצץ חשמלי, רצוי עם להב A40 כירורגי. להב סטנדרטי בגודל 2 אינץ' יכול לשמש לחולדות, בעוד להב בגודל 2-5 אינץ' מתאים יותר לעכברים. כדי למנוע חתכים וחתכים, ראשית למתוח את העור כדי לייצב אותו. לאחר מכן מניחים את השטוח של הלהב על העור ומזיזים אותו לכיוון צמיחת השיער. השדה הכירורגי המגולח צריך להיות גדול מספיק כדי לאפשר חתך ותפירה ללא הכללת פרווה לתוך הפצע הכירורגי, אבל קטן ככל האפשר כדי למנוע את החמרת היפותרמיה. לחלופין, השיער עשוי להיות מוסר באמצעות קרם depilatory, אשר ממיס את השיער על הזקיק. ראשית, להחיל את המוצר על אזור האתר כירורגי באמצעות ספוגית. לאחר כשלוש דקות, לשטוף ולנקות את העור עם מים סטריליים כדי להסיר את כל עקבות של הקרם על מנת למנוע גירוי או כוויות כימיות.

לאחר הסרת שיער, להשתמש ספוג גזה לח כדי להסיר את כל פסולת כולל שיער וקשקשים. לאחר מכן, באמצעות כרית גזה ספוגה מראש בתמיסת חיטוי או ניקוי, לשפשף את האזור החל באתר החתך ולהשתרע החוצה בתבנית מעגלית. לאחר מכן, החל את נוזל השטיפה באותו דפוס מעגלי - מתפתל מקו החתך לפריפריה של התחום הכירורגי. חזור על מחזור הניקוי והשטיפה לפחות שלוש פעמים. לאחר השטיפה הסופית, מניחים כרית גזה סטרילית - רטובה עם אלכוהול או יוד - על השדה הכירורגי. הגזה תישאר במקומה בזמן שהחיה מועברת ומוצבת על הרציף הכירורגי.

השלב הבא הוא למקם את החיה. עבור הליכי גב, למקם את החיה במצב נוטה. אבטחו את הגפיים על הרציף באמצעות קשירה או סרט הדבקה. יש להקפיד שלא: לסכן את זרימת הדם לרגליים, לגרום למתח מוגזם בגפיים, לפגוע במפרקים עקב מתיחת יתר, או לעכב את נשימת בעלי החיים. לאחר שבעל החיים מוכן ומוצב על הרציף הכירורגי, הסר את הגזה המכסה את אזור החתך ועכשיו החיה מוכנה לווילונות.

זכרו כי וילונות הם טכניקה אספטית, ולכן המנתח צריך ללבוש כפפות סטריליות, כובע גוף, מסכה כירורגית, וחלוק מעבדה נקי או שמלת כירורגית סטרילית. וילונות יכולים להיות עשויים בד, שהוא רב פעמי, או נייר חד פעמי או חומר דבק פלסטיק. וילונות מכל סוג שהוא לעולם לא צריכים להיות מזועזעים או מנופפים כדי להתפתח. יש לפתוח בזהירות כדי להימנע ממגע עם אזורים, ציוד וכוח אדם שאינם סטריליים. אם הוילון אינו חתוך מראש, אז להתפתח מספיק, כך שאתה יכול ליצור פתח באמצעות מספריים סטריליים זה יהיה גדול מספיק כדי לחשוף כראוי את האזור הכירורגי, אבל לא כל כך גדול כדי לאפשר חשיפה של משטחי גוף לא מגולחים ולא מוכנים.

לאחר מכן, מניחים את הוילון מעל החיה שומר את הידיים בצד של הוילון שלא ייגע בחולה. ולבסוף, להתאים אותו כך השדה הכירורגי גלוי דרך הפתח. זה מאפשר לשמור על שדה סטרילי באתר הניתוח לכל ההליך. אם משתמשים בוילון נייר עם חלון דבק, מקלפים תחילה את הנייר מאזור הדבק. לאחר מכן, פתחו את הוילון בזהירות, סובבו אותו כך שהצד הדביק פונה לחיה, ומניחים אותו מעל האזור הכירורגי. לאחר מכן לחץ בעדינות על הדבק לשדה הניתוחי כדי ליצור חותם עם העור.

לאחר ההכנות, השלב הבא הוא ניתוח. אז בואו נסתכל על כמה דברים שהמנתח צריך לזכור במהלך הניתוח ולאחריו. בעוד תחת הרדמה, בעלי חיים חייב להיות במעקב עבור טמפרטורת הגוף, נשימה, וקצב הלב עד שהם התאוששו לחלוטין.

לניטור ישיר של טמפרטורת הגוף, יש להשתמש בבדיקה רקטלית שתוכננה במיוחד עבור מכרסמים. הטווח הנורמלי הוא 35.3 עד 38 מעלות צלזיוס שהוא 97.5 עד 100.4 מעלות פרנהייט. לחלופין, לניטור עקיף, הנח את המדחום ליד החיה או מתחתיה. למרות שזה לא ייתן טמפרטורת גוף מדויקת, זה יכול להצביע על האפקטיביות של מקור החום ולאפשר התאמה כדי להפחית או להגדיל את החום לפי הצורך.

בינתיים, לאורך כל ההליך לפקח חזותית על קצב הלב, הנשימה, ואת צבע הזנב. מדי פעם, ניטור נוסף יכול להיעשות באמצעות אלקטרוקרדיוגרמה, אשר מעריך את מצב הלב של מכרסם במהלך הרדמה וניתוח.

לאחר הניתוח, יש להחזיר את החיה לכלוב התאוששות שהונח חלקית מעל כרית חימום ויש להנגיש את המזון בקלות. המיקום החלקי על משטח החום מאפשר לחיה להתרחק ממקור החום לאחר שחזר להכרה. בנוסף, יש לספק מנטל לפני הניתוח ולאחר הניתוח במידת האפשר. ראה טבלה 1 להלן לקבלת רשימת משככי ה משככי השתן המומלצים, המינון שלהם, המסלול והתדירות של הממשל.

עכשיו, כשאתה בקיא בשיקולים, בואו נסתכל על כמה מניתוחי ההישרדות המבוצעים על ידי חוקרים ביו-רפואיים.

על מנת לתפעל את המוח בבעלי חיים, מדענים מבצעים לעתים קרובות ניתוחים סטריאוטקסיים באמצעות ציוד מיוחד הנקרא "מסגרת סטריאוטקסית". באמצעות כלי זה ומערכת קואורדינטות תלת ממדית, ניתן למקד מיקומים ספציפיים כדי למדוד את פעילות המוח, לגרום נגעים, או לבצע מניפולציות גנטיות.

מדענים גם מבצעים ניתוח ליצירת מודלים של בעלי חיים של הפרעות אנושיות. כאן, החוקרים יצרו מודל "דש עור" כדי לחקור איסכמיה הנגרמת נזק לרקמות. על ידי השתלת חלון מתכת בעור המגולח, החוקרים הצליחו לדמיין את המיקרו-סירקולציה של האזור בחיה חיה במשך מספר ימים. בניסוי אחר, מחקרים ביצעו ניתוח כדי לגרום לפגם בעצמות על ידי קידוח צלחת לתוך עצם הירך של חולדה, ולאחר מכן למד בתהליך ריפוי עצם vivo בעזרת צילומי רנטגן.

הרגע צפיתם בסרטון של JoVE על שיקולים שיש לזכור לפני, במהלך ואחרי ביצוע ניתוח מכרסמים. יחד, אמצעים אלה יפחיתו את ההסתברות לזיהום והיפותרמיה, ויסייעו בהחלמת כאב ואי נוחות לחיה, אשר בתורם יגדילו את ההסתברות לניתוח הישרדות מוצלח. כמו תמיד, תודה שצפית!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Applications and Summary

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

באמצעות טכניקה אספטית, השכיחות של זיהום פוסט-כירורגי מצטמצמת מאוד. מזעור טראומת הרקמות במהלך ההליך, נקיטת אמצעי זהירות למניעת היפותרמיה, שליטה בכאב לאחר הניתוח ובאי נוחות, ושימוש בתוספי תזונה עד שבעל החיים מסוגל אמבולציה בדרך כלל יפחיתו את מידת התגובות המטבוליות השליליות לתהליך הניתוחי ויגדילו את ההסתברות לניתוח הישרדות מוצלח.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

References

  1. Institute for the Laboratory Animal Research. 2011. Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. Washington (DC): National Academies Press.
  2. Bernal, J., Baldwin, M., Gleason, T., Kuhlman, S., Moore. G., and Talcott, M. 2009. Guidelines for Rodent Survival Surgery. Journal of Investigative Surgery. 22. 445-451
  3. Brauer, A., Perl, T., Uyanik , Z., English, M.J.M. ,Weyland, W., and Braun, U. 2004. Perioperative thermal insulation: minimal clinically important differences? British Journal of Anaesthesia 92:6. 836-840
  4. Guidelines for Survival Rodent Surgery. http://oacu.od.nih.gov/ARAC/documents/Rodent_Surgery.pdf  Accessed 11/11/15
  5. Eakin, K., Rowe, R.K., and Lifshitz, J. 2015. Modeling Fluid Percussion Injury
    Relevance to Human Traumatic Brain Injury in Neurotrauma: Molecular, Neuropsychological, and Rehabilitation Aspects. Taylor & Francis Group, LLC.
  6. Rodent Anesthesia and Analgesia. The University of British Columbia. Retrieved from https://animalcare.ubc.ca/conducting-your-research/rodent-anesthesia-and-analgesia

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter