Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education Library
Lab Animal Research

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

 

Procédures de soins de base

Article

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

Étant donné que les souris et les rats représentent plus de 90 % des animaux utilisés pour la recherche biomédicale, prendre correctement soin de ces organismes est essentielle à l’issue des expériences. Ces procédures de soins commencent dès le début avec le déballage des animaux de conteneurs, à l’évolution de la cage, à maintenir des conditions de logement adéquat, en fournissant alimentation adaptée et assurer des conditions propices. Bien que, il y a des procédures générales qui s’appliquent à la plupart des souris et des rats en laboratoire, certains animaux, tels que ceux qui sont immunodéprimés, nécessite une attention supplémentaire afin d’assurer leur subsistance à des fins expérimentales.

Cette vidéo décrit les normes et les procédures de soins essentiels pour animaux fois immunocompétents et immunodéprimés. Et enfin, Nous illustrerons certaines expériences d’exemple montrant comment les scientifiques utilisent ces connaissances à des fins de recherche différents.

Recevoir des animaux provenant d’autres institutions représente un risque pour les animaux déjà logés dans l’établissement, comme pendant le transport, les caisses de transport peuvent venir en contact avec des agents pathogènes. Par conséquent, une procédure appropriée devrait être utilisée lorsque vous Déballez les conteneurs d’expédition.

Avant de manipuler des animaux, il est important de porter l’équipement de protection individuelle appropriés, ou PPE. Le PPE minimal à porter est une blouse de laboratoire, gants, lunettes de protection et un masque de type chirurgical qui permettront de réduire l’exposition à la poussière et les allergènes. L’étape suivante consiste à sélectionner des cages pour animaux entrant. Ensuite, remettre la cage avec literie appropriée et de matériaux de nidification. Et prendre les cages préparées à la salle de réception thermorégulées, afin qu’ils soient prêts pour le transfert avant l’arrivée des animaux.

À l’arrivée de l’expédition, placez les boîtes de transport dans un endroit sûr dans la salle de réception. Examinez le conteneur pour tout dommage et désinfecter les surfaces extérieures pour détruire les pathogènes nuisibles. S’assurer que le désinfectant est en contact avec la boîte pendant au moins 15 à 30 minutes, selon les recommandations du fabricant. Ensuite, placer le récipient dans la Station de transfert d’animaux, ou ATS. Cette station offre High Efficiency Particulate Air ou HEPA, filtre unidirectionnel flux d’air dans la hotte. HEPA protège l’utilisateur contre les allergènes et qui empêche les animaux de l’air ambiant, minimisant les risques de contamination. Ensuite, ouvrez l’emballage d’expédition et d’évaluer la santé globale des rongeurs. Prenez note de tout animal qui semble être blessé ou malade. Après cela, les placer dans la cage déjà Assemblée dans la taille des groupes appropriés, couvrir la cage avec le couvercle de barre métallique et fixer la cloison pour créer deux zones. Choisir les aliments appropriés et placez-le dans un côté et laissez le deuxième côté ouvert afin de permettre une meilleure circulation d’air. Enfin, si les animaux ne sont pas être placés sur une étagère avec arrosage automatique, ajouter une bouteille d’eau afin d’assurer l’approvisionnement adéquat en eau. N’oubliez pas, l’ATS doit être désinfecté à la fin de chaque session, et le ventilateur doit être éteinte lorsque la désinfection.

Pour changer de cage, placez les deux cages, un cage fraîches avec la litière appropriée et la cage utilisée avec les animaux-à l’ATS. On peut transférer les animaux de la cage ancienne à la nouvelle cage à la main ou à l’aide d’une pince rembourrée. Ces deux méthodes ont été discutées dans une autre vidéo de cette collection. N’oubliez pas qu’une seule cage d’animaux peut être ouverts simultanément. Pour les souris mâles ou femelles avec une litière, il a été démontré que l’aire de nidification des souris lors du transfert vers la cage propre aide les animaux avec la transition. Une fois que le haut de la cage est placé sur la nouvelle cage, transfert alimentaire du vieux haut de cage vers le nouvel haut et ajouter plus de nourriture si nécessaire. Ensuite, placez le dessus de la barrière et retourner la cage à la crémaillère. Il est conseillé de changer de gants entre cages ou entre groupes.

La procédure de déballage pour animaux immunodéprimés est un peu différente, que les choses doivent être stériles. Il est recommandé que le ventilateur à l’intérieur de la hotte au moins 24 heures avant utilisation. Comme pour les animaux d’immunocompenent, à l’arrivée de l’expédition pulvériser le conteneur avec une solution désinfectante dans la salle de réception et le laisser ouvert pendant 15-30 minutes. À l’ATS désignées pour souris immunodéprimées, vaporiser la hotte à flux laminaire d’éthanol à 70 % 30 minutes avant de manipuler les animaux. Il est idéal pour que les deux personnes à participer à cette activité déballage--une seule personne serait le technicien stérile portant la robe stérilisé de vapeur et la double paire de gants stériles pour traiter les animaux à l’aide de techniques aseptiques et l’autre serait la non stériles technicien vêtu d’une robe propre isolement et une paire de gants pour manipuler des éléments contaminés. Les deux devraient porter un, masque, bonnet de cheveux et des lunettes de sécurité.

Avant d’ouvrir l’emballage d’expédition à l’intérieur de la hotte, placer toutes les fournitures et mise en cage dans les présentes et leur extérieur de pulvérisation avec de l’alcool. Et à l’arrivée de l’expédition, placez la zone animale reçue dans le capot et il vaporise d’éthanol à 70 % de plus. Il y a deux options pour la mise en cage stérile, soit mise en cage standard qui a été emballé et stérilisées ou jetables des unités qui a été stérilisé à l’aide de l’irradiation par le vendeur de la vapeur.

Démarrer la procédure de déballage en ouvrant la nourriture stérile, suivie par l’ouverture de la boîte de transport. À ce stade, le gestionnaire doit jeter la première paire de gants stériles. Ensuite, la personne non stériles déballe la cage stérile et aseptiquement passe au dresseur puis supprime le capot et le couvercle de barre métallique, qui met à l’envers dans la hotte. Par la suite, le tube de siroter sur la cage est rempli d’eau à la gare située sur le capot. Enfin, le dresseur place l’animal dans la cage, il assure avec le couvercle de barre métallique, ajoute alimentaire et définit le capot en place. Notez que le ventilateur de la hotte reste à tout moment pour maintenir l’environnement stérile. À la fin, la personne non stériles supprime la cage peuplée de la hotte et le place sur un support approprié. Pour éviter la contamination croisée possible entre les groupes, le dresseur doit changer de gants après chaque conteneur d’expédition.

Pour modifier les cages des animaux immunodéprimés, la préparation de la hotte et les cages et les EPI sont les mêmes que pour le déballage de ces animaux. Et la technique de transfert est la même que les animaux immunocompétents, mais dans des conditions stériles.

Maintenant nous allons discuter des conditions de logement approprié pour les animaux, qui est un autre aspect important des soins essentiels. Souris et les rats sont principalement logés dans la boîte à chaussures type mise en cage avec un fond solid contenant du matériel de literie. La cage de souris typique fournit 75 pouces carrés de surface au sol, qui est suffisant pour un maximum de 5 souris adultes. En revanche, une cage rat a la surface de 142 pouces carrés et est suffisante pour 2 rats adultes. Cages statiques sont habituellement couverts avec un couvercle de barre métallique et le matériau filtrant est ajouté sur le dessus de la cage comme un bonnet. Individuellement ventilés cages ou IVCs, ont aussi un couvercle barre métallique et le bonnet, mais ils sont placés sur une étagère qui fournit des flux d’air dans la cage. Ceci élimine la nécessité de changer la cage aussi souvent que les cages statiques, qui peuvent être bénéfiques pour les animaux immunodéprimés.

Tous les systèmes de mise en cage ont une disposition pour l’alimentation et de l’approvisionnement en eau. Il y a deux mangeoires placés dans la cage d’animaux ou une partie du couvercle barre métallique est utilisée pour le stockage de nourriture. Alimentaires doivent être placés de telle qu’il n’est pas souillé par les animaux. L’eau est généralement assurée par une bouteille d’eau sur le dessus de la cage, ou via une vanne d’arrosage automatique de boire qui est construit en composant de la cage de l’animale. Pour boire option vanne, quand la cage est engagée sur un support, l’eau est transportée dans le tube pour un système d’arrosage automatique est conçu pour répondre aux besoins de l’animal tout au long de l’animalerie.

Le Guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire indique que tous les outils de mise en cage doivent être assainis au moins toutes les 2 semaines. Quelques cages et accessoires devrez peut-être être changé plus souvent dicté par le niveau d’odeur et d’ammoniaque dans l’enceinte.

Maintenant nous allons parler de la bonne nourriture et l’approvisionnement en eau pour les animaux immunocompétents et immunodéprimés. Il y a plusieurs flux commercialement disponibles avec variable protéines, glucides et matières grasses. Idéalement, RSS se compose de 15 à 19 % de protéines, 44 % de glucides et 4-9 % de matières grasses. Pour les animaux immunodéprimés, assurez-vous que l’alimentation a été stérilisée.

L’eau du robinet, ou osmose inverse RO d’eau, peut être utilisé pour des animaux immunocompétents, mais pour les animaux immunodéficients, l’eau peut être une source de contamination et doit donc être stérilisé. Stérilité dans l’eau est maintenue en ajoutant 2 gouttes de HCl molaire 12 à 8 litres d’eau RO, qui vont acidifier l’eau à un pH de 2,5 à 3 et limite la croissance bactérienne. Puis versez l’eau en bouteilles et recouvrez-les de papier d’aluminium. Placer les couvercles de bouteille avec tubes sipper séparément dans un sac de l’autoclave et tout mettre dans un autoclave pour la stérilisation à la vapeur.

Maintenant nous allons discuter les conditions environnementales standards essentielles pour les soins aux animaux.

Au niveau de la cage, le logement social est obligatoire sauf si scientifiquement justifiée ou si un animal n’est pas compatible avec tous les autres. Enrichir l’environnement avec des cases de papier et de matériaux de nidification permettent les animaux à manifester des comportements spécifiques à l’espèce comme des nids bâtiment et fouisseurs, qui à son tour, diminue le niveau de stress et augmente le bien-être des animaux. Matériaux de nidification fournissent également un coin couchage saturé en calmant les phéromones qui aide avec le logement chez des souris mâles multiples dans la même cage. Tel que mentionné précédemment, se déplaçant de l’aire de nidification à la cage propre à la modification de la cage permet d’éviter agression, surtout chez les mâles, comme les animaux sont introduits dans un nouvel environnement. Pour animaux nude athymique, un devrait envisager de fournir une literie supplémentaire et râpé de type de papier dans leurs cages des matériaux de nidification pour aider à la thermorégulation.

Au niveau de la chambre, la température pour les rats et les souris doit être entre 68 et 79 ° F. Le taux d’humidité ambiante doit être 30-70 %, des niveaux inférieurs pouvant provoquer une maladie appelée ringtail. Le troisième paramètre de la chambre est l’éclairage. Cela inclut l’intensité lumineuse et cycles. Normalement, l’animalerie a la valeur cycle sombre lumière/12 heures et 12 heures. L’intensité de la lumière devrait varier selon l’activité dans la salle. Lorsque les techniciens travaillent, des niveaux plus élevés d’éclairage peuvent être utilisés. Toutefois, il devrait être abaissé à environ 325 lux lorsque toute l’activité est terminée. Enfin, le flux d’air dans la pièce doit également être soigneusement contrôlée. Un minimum de 10-15 changements d’air de 100 % d’air frais doit avoir lieu toutes les heures. Cela diminue les microbes et les odeurs dans la salle de l’animale.

Enfin, nous allons voir comment les chercheurs utilisent ces connaissances sur les animaux de laboratoire, logement, alimentation et environnement préférences dans leurs expériences.

Comme mentionné précédemment, les animaux de laboratoire présentent généralement comportement de construction du nid, ce qui réduit le stress, et les chercheurs ont utilisé cela comme un indicateur du bien-être animal. Dans cette expérience particulière, les scientifiques ont développé une impartiale système pour marquer le NID construit et utilisé puis étude de l’effet de la température ambiante sur le comportement de construction du nid. Comme vous pouvez le voir, une augmentation de température a entraîné une baisse significative dans la partition, en soulignant le rôle d’entourant la température dans le bien-être des animaux.

Étant donné que les souris et les rats aiment les hydrates de carbone, chercheurs ont utilisé des flux de différentes formes pour tester la fonction motrice de l’animal. Cela inclut analyse de dextérité lors de différents types de tâches de manipulation des aliments et en examinant pour atteindre comportement après des interventions chirurgicales ou pharmacologiques.

Enfin, on sait que les souris et les rats sont des animaux nocturnes et qu’ils ne préfèrent les zones d’illuminés. Les scientifiques utilisent ces connaissances pour construire l’environnement afin d’étudier l’anxiété chez ces espèces. Par exemple, ici les recherches introduits animaux simple terrain dégagé et a étudié le temps passé par le type sauvage et souris génétiquement déficientes en interne et externe classé zones, pour analyser le knockdown de gène effet sur le comportement de type anxiété.

Vous avez juste regardé introduction de JoVE aux procédures de soins essentiels pour les souris et les rats. Vous devriez maintenant avoir une meilleure compréhension des mesures il faut prendre pour s’assurer que l’environnement et la manipulation de ces animaux ne cause pas de préjudice causé à la santé de l’animal et vous devez également savoir comment les chercheurs peuvent modifier ces paramètres pour réaliser différents objectifs scientifiques. Comme toujours, Merci pour regarder !

Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter