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Diagnostique autopsie et récolte de tissus
 

Diagnostique autopsie et récolte de tissus

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autopsie-sens de l’autopsie des organes- et récolte de tissus font partie intégrante de nombreuses expériences en laboratoire, qui s’appuient sur le temps de collecte de données finales tirés des points le analyses des organes récoltées. Par conséquent, il est important d’apprendre la nécropsie diagnostic correct et tissus technique, la récolte que la procédure peut influer significativement la qualité des échantillons recueillis. Cette présentation examinera la méthode de dissection et l’extraction des organes thoraciques, abdominales et reproduction des animaux de laboratoire.

avant de commencer la procédure, un formulaire doit être instauré qui comprend un historique complet de l’animal : sexe numéro, identification des animaux, conditions, date de naissance, date de son décès, étude du logement / Numéro de protocole et le nom de l’enquêteur principe.

Ensuite, préparer la zone de dissection. Prévoir un revêtement de banc, plateau de dissection, instruments désignés pour l’autopsie, qui comprend les ciseaux, pinces, lames de bistouri stériles, OS coupeurs, sonde émoussé, petite spatule et matériel de suture non résorbable. Récolte d’organes et de tissus pour examen histologique exigent que les tissus soient préservés dans une solution de fixation. Sauf indication contraire, le fixateur le plus couramment utilisé est de 10 % de formol tamponné neutre. Notez que les échantillons de tissus devraient être de 0,5 à 1 cm d’épaisseur pour permettre une pénétration suffisante de la solution de fixation. Fixation empêche la carie, autolyse et la putréfaction ; arrête de réactions biochimiques en cours ; et peut augmenter la résistance mécanique et la stabilité des tissus traités.

La méthode d’euthanasie de l’animal peut également une incidence sur la qualité des échantillons. La méthode d’euthanasie plus couramment utilisés pour les souris et les rats est une overdose de gaz carbonique. Les animaux sont laissés dans leur cage maison, qui est placé, dans une chambre, et le CO2 est progressivement introduit dans la chambre à une vitesse de déplacement de 10 à 30 % du volume chambre/min. Ce qui provoque les animaux perdu conscience avant la perception de la douleur qui est associée avec l’activation des nocicepteurs par l’acide carbonique. Le flux est ensuite maintenu dans la chambre jusqu'à l’arrêt respiratoire s’est produite et l’animal est mort.

suite à l’euthanasie, tout d’abord effectuer un premier examen externe en inspectant visuellement la carcasse pour les lésions et masses, croissance excessive de dent ou une coloration de la fourrure à la bouche, les narines, les oreilles, les yeux et les ouvertures anales et génitales. Si cela se justifie, effectuer un test de la bande, grattage de la peau et dépouille les examens pour détecter les parasites externes. Une fois achevé l’examen externe, il est temps de commencer la nécropsie, commençant par la cavité abdominale. Notez que, avant d’enlever n’importe quel tissu, échantillons, il est important d’observer l’orgue en situ.

D’abord exciser la peau, place une petite coupure juste en avant du bassin chez les femelles et surtout le prépuce chez les hommes. Puis, en utilisant la technique de dissection émoussée, desserrer la peau de l’aponévrose et le muscle. Par dissection par clivage est une technique de dissection anatomique dans les tissus sont séparés et les structures sous-jacentes exposés sans couper. Dans cette technique, les ciseaux sont utilisés pour répandre les tissus apart plutôt que de les couper dehors. Les embouts fermés sont poussés dans les tissus et ensuite ouvert pour fractionner le tissu le long des plans naturels. Ce processus nécessite patience et une touche délicate, comme l’étirement du tissu peut causer des dommages aux organes adjacents et les vaisseaux sanguins. Puis étendez la coupure au menton. Ensuite faites, coupes transversales avant les membres postérieurs et postérieur pour les membres antérieurs et utiliser par dissection par clivage pour exposer la zone cervicale et thoracique. Extra il fallait être prudent pour éviter une rupture de la jugulaire et carotide vaisseaux du cou.

Chez les femelles, avec la peau excisée, observer le tissu mammaire du haut du sternum à la manubrium à l’appareil génital, ouverture sur la surface ventrale ; s’étendant latéralement sur les deux côtés. Les femelles allaitantes ou enceintes passera volume de tissu mammaire et lait peut-être être présent. Exciser les glandes mammaires, saisir le bord du tissu avec une pince et utiliser par dissection par clivage pour desserrer des pièces jointes à la peau. Une fois que la glande a été séparée, il peut être placé dans une solution de fixation pour une analyse histologique ultérieure.

à ce stade, vous pouvez observer des glandes salivaires sous-maxillaires, qui sont jumelés et situés à la mandibule--s’étendant le long du cou au sternum manubrium. Suppression de ces glandes nécessite une dissection émoussée et Redoublez de prudence lorsque vous travaillez dans la région cervicale pour éviter une rupture des vaisseaux sanguins. Une fois libéré des muscles sous-jacents, soulevez les glandes et de rompre toutes les pièces jointes résiduelles. Les glandes exigent au moins une coupe pour permettre la pénétration de la fixateur.

En outre, vous pouvez voir la trachée, qui s’étend de l’épiglotte à la bifurcation des bronches. C’est un tube cartilagineux côtelée souple. Alors que normalement clair, euthanasie avec CO2 peut causer une accumulation de liquide dans les poumons et la trachée qui ressemble à un liquide clair mousseux. Graisse sous-cutanée sera également présente dans ce domaine. L’évaluer pour la quantité et de dépôts. Un animal obèse peut avoir une grande quantité de graisse avec la peau épaissie.

Avant l’ouverture de la cavité du corps, observer les muscles abdominaux, intercostaux et exposés du cou et des membres pour tout épaississement, de masses ou de décoloration. Pour ouvrir la cavité du corps, tout d’abord faire un petit transversale coupe point la plus caudale du muscle abdominal exposé. Puis soulevez le muscle loin des organes et couper le long de la linea alba à la xiphoïde. Ensuite, disséquer les muscles latéralement de la ligne médiane juste au-dessus des membres postérieurs des deux côtés. Enfin, couper le long de la courbe des côtes des deux côtés. Une fois que la cavité a été ouvert, évaluer la quantité et l’accumulation de graisse abdominale. Un animal sain aura coussinets adipeux abdominales et certaines matières grasses le long de la surface dorsale de la cavité. Observer la couleur de ce tissu et noter toutes les anomalies.

nous sommes maintenant prêts à commencer la récolte des organes abdominaux. Commencez par localiser la rate, qui est rouge foncé et situé le long de la courbure inférieure de l’estomac. Il doit être régulier en forme et avec une surface légèrement mate. Pour supprimer le spleen, soulevez l’orgue et découper les pièces jointes à l’estomac.

L’estomac se trouve à l’extrémité distale de le œsophage. Il semble être deux tons, différencier les parties musculaires et glandulaires. Sentir la présence de nourriture. Un estomac vide est à noter qu’il peut être révélateur de la maladie. Faire pas couper l’estomac, comme le contenu finira par contaminer les organes de la cavité abdominale.

L’intestin grêle sont connectés dans la partie distale et inférieure de l’estomac. Il y a trois sections distinctes de l’intestin grêle. Le premier est le duodénum - une section plus courte du sphincter de l’estomac postérieure au début du jéjunum. Le canal cholédoque entre ici et le tissu pancréatique est plus fermement attaché à cette partie de l’intestin grêle. Le jéjunum est la partie centrale. Peyer ' s Patches, qui sont de petites zones ovales composées de tissu lymphoïde, peuvent être observées à la surface le jéjunum et l’iléon. L’iléon est la plus longue portion de l’intestin grêle qui se termine au caecum - situé à la jonction du petit et du gros intestin. Le caecum apparaît de couleur verdâtre et est très doux.

Le gros intestin se poursuit du caecum à l’anus. Il est facilement identifiable comme boulettes fécales peuvent être visualisées dans la lumière de cette structure. Les petits et les grands intestins sont ancrés au corps par le mésentère, une membrane contenant les vaisseaux sanguins, matières grasses et les ganglions lymphatiques. Cela devrait être examiné pour les ganglions lymphatiques et les masses avant d’ôter le tractus intestinal. Le pancréas est un postérieur diffuse de l’organe situé à l’estomac. C’est un bronzage lumineux de couleur grise et composé de plusieurs petits lobes avec des bords irréguliers. Pour récolter le pancréas, saisir l’organe et doucement taquiner des tissus environnants mésentérique. Cela doit être fait avant le retrait du tractus intestinal.

Pour supprimer l’ensemble du tractus qu’un seul morceau en commençant par l’estomac et s’étendant jusqu'à l’anus, placez d’abord une ligature au rectum et puis faire une incision dans le gros intestin juste en avant de l’anus. Ensuite, placez une ligature à la jonction de le œsophage et l’estomac, après qui le tractus intestinal entière peut être soulevé et toutes les pièces jointes membraneuses rompus. Tout cela alors peut être séparé du mésentère, coupée en sections et fixe.

Les reins sont des organes pairs situés contre les muscles du dos. Ils devraient avoir la taille et la couleur d’un haricot noir et avoir une surface lisse. Immédiatement avant le rein est la glande surrénale, apparaissant comme un petit nodule rose lumière.

Pour enlever un rein, l’isoler à l’aide d’une pince et couper entre l’organe et l’uretère. La couche externe dure peut ensuite être décollée pour examiner la surface. Couper un rein en deux le long de l’axe le plus long et l’autre transversalement. Tout grain au sein peut-être indiquer la présence de cristaux ou de dépôts de minéraux. Enfin, retirer le foie, qui est une couleur rouge foncé et ses marges devraient être lisses avec un bord croquant. Être prudent lors de manipulation du foie, telle qu’elle est un tissu mou. Toute perturbation de l’intégrité de l’organe provoquera une fuite dans la cavité du corps de sang et obscurcir les autres organes.

Pour enlever le foie, d’abord doucement reflètent les lobes de la membrane et faire une coupe à travers les vaisseaux sanguins antérieur à la structure. Ensuite, tenir compte du foie vers le diaphragme et saisir le nœud fibreux qui relie tous les lobes au centre. Enfin, soulever l’orgue tout en coupant toutes les pièces jointes à l’intestin et l’estomac.

le système reproducteur féminin est constitué sur l’utérus et les ovaires. L’utérus est une structure en forme de Y courte avec des cornes qui s’étend dans les deux sens. Les cornes se terminent aux trompes de Fallope et les ovaires--situées juste en dessous des reins. Les ovaires auront une surface rugueuse due à des stades différents de la maturation des follicules.

Pour enlever les ovaires, coupés les pièces jointes artériels vers l’avant et la trompe de Fallope vers l’arrière. Pour enlever l’utérus, doucement de saisir et de couper au-dessous du col de l’utérus. Après la coupe, soulever le corps et les cornes de l’utérus, brisant toutes les pièces jointes dans la cavité coelomique.

Chez les mâles, vous pouvez également observer les glandes préputiales situés juste en avant du prépuce. Elles apparaissent grandes et sont d’un gris de couleur jaunâtre avec un aspect spumeux. Retrait et fixation de ces glandes est semblable à glandes sous-maxillaires. En outre, le système reproducteur masculin se compose des vésicules séminales, la glande de la prostate et des testicules. Les vésicules séminales sont blanches, " ram ' corne s en forme de " structures situé devant la vessie et fixée sur la ligne médiane à la glande prostatique.

La prostate--généralement léger tan en couleur--est située autour de la vessie à la base. Pour visualiser les testicules, saisir les coussinets adipeux abdominales situés dans le bas ventre et les tirer vers l’avant. Cela va tirer les testicules du scrotum pour permettre l’examen. La surface doit être lisse et fine vascularisation évidente sur la surface.

L’épididyme est le long de la marge inférieure du testicule et s’effile vers le haut. Le canal déférent est fixé à l’extrémité de l’épididyme et nous ramène à la prostate. Pour enlever les testicules, couper la pièce jointe dans le scrotum et couper le canal déférent. Pour enlever la prostate et les vésicules séminales, saisir la base de la vessie et l’ascenseur tandis que séparer les pièces jointes sous la prostate.

animées sur les organes au sein de la cavité thoracique. Pour exposer les structures vitales, retirer le diaphragme de l’attachement aux côtes. Ensuite, couper à travers la cage thoracique latéralement sur les deux côtés jusqu’au dessus du sternum manubrium et puis reflètent les os parotidien afin de visualiser les organes thoraciques.

Les poumons sont normalement une couleur rose vif, spongieuse dans texture avec une surface lisse. Cependant l’euthanasie avec le CO2 peut causer des hémorragies pulmonaires entraînant des taches rouges foncés qui peuvent recouvrir les surfaces de l’ensemble du poumon.

Coeur est rouge foncé et les ventricules sont musclées, qui se sentent ferme au toucher. Les oreillettes sont de couleur rouge plus foncée et s’asseoir au sommet des ventricules. Ils sont beaucoup moins musclés et flasques. Une fine membrane translucide appelée le péricarde entoure le cœur.

Le thymus est situé devant le cœur et se trouve sur la trachée. Il doit être lisse de texture. Vous pouvez voir la trachée, comme décrit précédemment, et l’oesophage est un tube très mince qui se trouve directement derrière la trachée et le cœur et traverse la membrane de l’estomac.

Pour enlever les organes dans la cavité thoracique, commencez par saisir la trachée juste au-dessus du thymus et pratiquer une coupe perpendiculaire juste en avant de la pince. Tout en conservant l’emprise, soulevez la trachée direction caudale et découper toutes les pièces jointes des poumons à la surface de la colonne vertébrale dans la cage thoracique. L’oesophage peut doivent être coupés pour être capable de soulever le cœur et poumons gratuitement la cavité thoracique

après que le cœur est prélevé pour le corps, rincer avec du sérum physiologique pour enlever les résidus de sang et de caillots, ou remplir avec le fixateur par l’intermédiaire de l’aorte. Une fois que les poumons sont excisés, placé une ligature lâche autour de la trachée. Ensuite, enfiler une aiguille attachée à une seringue contenant le fixateur dans la lumière de la trachée et serrez la ligature. Puis injecter le fixateur jusqu'à ce que les poumons sont gonflés. Enfin, retirer l’aiguille et serrer la ligature davantage pour éviter les fuites.

avec ce souffle de connaissance relativement à la récolte de nécropsie et tissus rongeur, laissez ' s oeil à quelques-uns des thexpériences en laboratoire actuel e impliquant ces procédures.

Diagnostiques autopsie est un critère d’évaluation commun dans les expériences de métastases du cancer. Dans cet exemple, les enquêteurs ont injecté les cellules cancéreuses dans le rongeur ' rate s puis, trente à soixante jours plus tard, ils ont effectué l’autopsie, qui a révélé des métastases hépatiques significatifs.

Tissu extraction est souvent suivie d’une analyse histologique, ce qui contribue à l’étude de l’anatomie microscopique de l’échantillon. En suivant le protocole de la fixation, enrobage, coupes et coloration des tissus, les chercheurs sont en mesure d’étudier les structures microscopiques dans ces organes et de découvrir l’effet des interventions génétiques ou pharmacologiques au niveau atomique.

parfois enlever les tissus afin d’étudier les processus physiologiques, comme l’angiogenèse. Ici, les expérimentateurs extériorisée un rat ' tissu mésentérique s pour stimuler la croissance vasculaire. Ensuite, ils ont récolté quelques mèches et traités avec les marqueurs qui tachent les cellules d’un vaisseau sanguin, pour étudier la dynamique cellulaire impliqués dans la croissance du réseau vasculaire.

vous ' ve juste regardé JoVE ' s vidéo détaillant les étapes de diagnostic récolte nécropsie et tissus chez les animaux de laboratoire. Il est important d’utiliser les techniques appropriées pour le prélèvement d’organes et de la préservation, afin que la procédure d’extraction n’a aucun effet sur l’interprétation des données recueillies. Comme toujours, Merci de regarder !

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