Lab Animal Research
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许多实验要求从切除的组织收集细胞。在这种情况下, 必须以不育的方式进行组织收获过程。利用来自研究动物的细胞系和组织培养物, 可以进行许多实验 体外 , whichin 反过来减少研究中的动物使用.
在本视频中, 我们将讨论从实验室动物中提取常用器官的无菌方法。接下来, 我们将对一些使用这种无菌技术的示例实验进行简短的回顾, 以实现不同的研究目标.
让与 #39; s 从准备步骤开始, 以确保在动物组织收获过程中的空间、仪器和人员不育.
此过程在层流罩中执行。在这个过程之前, 引擎盖风扇应该跑至少15分钟, 并且区域应该用70% 酒精消毒。接下来, 将一些纸巾放到引擎盖上, 用70% 乙醇将它们浸湿。然后, 加载无菌设备, 并按每种仪器的使用顺序进行组织, 通常从左到右。这使得工作流能够以单向的方式发生, 防止动物胴体的意外污染.
建议消毒技术人员到场协助无菌技术员。两个操作员必须佩带面具和蓬松。不育的技术员必须穿不育的礼服和两副无菌的外科手套。请注意, 礼服和手套必须覆盖手腕, 以防止脱落的皮肤细胞进入打开的体腔, 培养皿, 或无菌介质.
消毒人打开无菌仪器包, 不触及内表面, 使无菌的人可以删除工具菌。最后, 消毒技术员 euthanizes 动物, 放置在纸巾上的胴体和完全浸泡70% 酒精, 使无菌的人可以开始收割.
首先, 我们将检查腹部器官的提取, 包括脾脏、肝脏、肾脏、卵巢和睾丸.
使用一组无菌剪刀和镊子, 在男性的包皮和女性的骨盆骨前的皮肤上进行水平切割。避免切开腹部肌肉。接下来, 把拇指放在切口下面, 抓住切口的颅骨边缘。用另一只手, 安全地握住后肢和尾部, 同时将皮肤拉向头部。皮肤会从身体上的后肢上撕裂, 并可以在头部和前腿内翻出来。这有效地消除了可能干扰无菌器官收获的毛发污染物。然后, 再用70% 的酒精浸泡身体, 去掉表面的手套, 不再是无菌的。还要丢弃在皮肤上使用的所有仪器.
要收脾, 将身体置于右侧侧卧床。届脾应通过腹肌可见。用剪刀直接在脾脏上切开, 然后轻轻地从体腔中缩回器官。切断脾脏与胃和胰腺组织之间的所有附着物, 但避免穿刺或撕裂器官.
要收获所有其他腹部器官, 将身体置于背部卧床。然后, 抬起和切断腹部肌肉离开一个椭圆形开放直接在腹腔。为了收获肝脏, 反射器官尾远离隔膜。现在用剪刀小心地切断两个结构之间的任何隔膜。接下来, 通过血管垂直于脊柱的切口。然后抬起肝脏, 并将其反射到横膈膜上, 以可视化它下面的附件。将有薄薄的膜附着较小的肝叶到胃和小肠。抓住肝中央的纤维结节, 提起器官, 找到所有的附件。现在把器官与底层组织分开。请注意, 肝脏是脆弱的, 可以很容易地刺穿导致血液过量释放。因此, 必须小心处理.
要获取肾脏, 请将肠道推到左侧, 以暴露右肾或右侧暴露左肾。现在用钳子刀片抓住肾脏下面, 用钳子割下剪刀, 将器官从身体中移除.
cranially 卵巢, 移动肠道, 使子宫可视化。按照左和右子宫角的卵巢。这些是小的器官, 在较旧的动物中, 它们可能被嵌入脂肪中。在卵巢下滑动镊子, 将其从体内分离出来, 并从脂肪和输卵管中切下.
在男性中, 要除去睾丸, 轻轻抓住腹股沟脂肪垫并拉前。这将从阴囊中取出睾丸。一旦它们变得可见, 切下阴囊和输精管的附着物, 从身体中释放这些结构.
下一步, 让 & #39; s 学习如何收获胸器官, 如心脏和肺部。心脏和肺部最容易被移除。打开胸腔, 首先将动物置于背卧床。首先, 把握和提升剑过程。然后通过腹部肌肉切开肋骨。沿两侧肋骨的下部曲线延伸切口, 露出隔膜.
下一步, 通过在肋骨的每一侧可能的最侧面的一个小切口, 刺穿膜片。然后, 切断隔膜远离肋骨。现在抬起肋骨在剑, 以可视化的胸部器官。将侧切延伸至两侧胸骨顶端, 打开胸腔。然后将镊子垂直于气管, 牢牢抓住气管。现在, 用剪刀, 做一个垂直的切口只是前钳。这将切断气管和食道。在不松开气管的抓地力的情况下, 将其向上尾, 并将肺部的任何附着物剪断到肋骨笼中的脊柱表面。继续, 直到你能够解除心脏和肺部无胸腔.
取出心脏, 抬起器官, 仔细切开心包囊。接下来, 用镊子握住主动脉, 在镊子的远端做一个切口。然后切断前腔静脉、肺动脉和静脉。之后, 你应该能够解除心脏的胸腔.
现在, 让 & #39; s 检查使用无菌技术采集大脑的过程。在大脑是唯一要收集的器官的情况下, 准备步骤是相同的.
开始收割, 用酒精浸透身体, 并像以前一样从身体上剥下皮肤--向上和超过头骨。这使得所有的东西都从这一点上不育。然后, 再用酒精浸透动物, 取出外手套, 丢弃皮肤上使用的器械。现在, 在颈部的颈背上做一个切口, 并沿着背部颈部的中线延伸到鼻尖.
现在, 使用一双专用的无菌脑收获剪刀, 在头骨底部的脊柱上进行切割。要打开颅骨, 把剪刀的点放在枕孔上, 沿中线切开。请注意, 在这个脑部收获过程中, 一只手被认为是消毒的, 因为它能抓住下巴下方反射的颅骨来稳定头部, 而不育的手则被用来切割头骨。然后, 使用剪刀刀片的扁平边缘, 把顶骨的骨骼从大脑中撬开。使用刮刀, 小心地扰乱脑干的神经附着物和大脑下方的视神经交叉。最后, 滑动闭合钳前和打破在嗅球的附件。然后大脑就可以直接从头骨中掉落到无菌介质中.
现在我们和 #39; 我们回顾了无菌组织收获的要点, 让我们 #39 讨论了这一过程在生物医学研究中的许多用途.
神经干细胞研究人员使用无菌收获技术从小鼠新生儿脑中提取组织, 在体外培养这些细胞 。这使他们能够研究神经干细胞在发展和癌症进展中的作用.
另一个涉及组织收获的研究领域是新陈代谢剖面, 它包括通过分析样本中不同的代谢物来研究组织生理学。在这个例子中, 科学家使用无菌技术, 收集野生型和无菌小鼠的肝脏活检, 并使用核磁共振波谱, 以阐明两个动物群体的肝脏代谢特征的差异.
最后, 家经常进行无菌组织的收获, 以研究感染的传播。在这个特殊的实验中, 研究人员进行了气管内注射细菌 铜绿假单胞菌 , 以诱发慢性肺部感染。随后, 动物被安乐死, 用无菌技术提取肺部, 以确定3、7、14和28天感染的细菌负荷.
您和 #39; 我刚刚看了朱庇特和 #39; 从实验动物身上采集组织的视频, 用无菌技术。现在, 你应该更好地了解你需要采取的步骤, 以确保在整个收获过程中保持不育。你应该能够从这些动物身上提取腹部和胸部的器官和大脑, 而不会对组织造成任何损害。一如既往, 感谢收看!