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Récolte de tissus stériles

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nombreuses expériences exigent la collecte des cellules des tissus excisés. Dans ce cas, il est impératif que la procédure de récolte de tissus être effectuée de façon stérile. L’utilisation de lignées cellulaires et les cultures de tissus provenant d’animaux de recherche permet à de nombreuses expériences menées in vitro, whichin tour réduit l’utilisation d’animaux dans la recherche.

Dans cette vidéo, nous allons discuter de la méthode aseptique pour la récolte d’organes généralement extraites des animaux de laboratoire. Et cela sera suivie d’un bref aperçu de quelques expériences exemple employant cette technique stérile pour atteindre les objectifs de recherche différentes.

let ' s commencent par préparer étapes requises pour assurer la stérilité de l’espace, les instruments et le personnel au cours de la récolte de tissus d’origine animale.

Cette intervention est réalisée sous une hotte à flux laminaire. Avant l’opération, la hotte de cuisinière doit fonctionner pendant au moins 15 minutes et la zone doit être désinfectée avec de l’alcool 70 %. Ensuite, placez un essuie-tout dans la hotte et mouillez-les avec l’éthanol à 70 %. Après cela, chargez le matériel stérile et organiser par l’ordre dans lequel chaque instrument sera utilisé, généralement de gauche à droite. Cela permet pour le workflow se produisent de manière unidirectionnelle, empêchant la contamination accidentelle de la carcasse animale.

Il est recommandé qu’un technicien non stériles soient présents pour aider le technicien stérile. Les deux opérateurs doivent porter un masque et un bouffant. Le technicien stérile doit revêtir une blouse stérile et deux paires de gants chirurgicaux stériles. Remarque que la blouse et les gants doivent couvrir les poignets pour empêcher la chute des cellules de la peau dans la cavité du corps ouverte, Pétri ou milieu stérile.

La personne non stériles ouvre le package de l’instrument stérile sans toucher la surface intérieure, afin que la personne stérile peut supprimer l’outil aseptiquement. Enfin, le technicien non stériles euthanizes l’animal, met la carcasse sur les serviettes en papier et il absorbe complètement avec de l’alcool 70 %, afin que la personne stérile peut commencer la récolte.

tout d’abord, nous passerons en revue l’extraction des organes abdominaux, y compris la rate, du foie, reins, ovaires et testicules.

à l’aide d’un ensemble de ciseaux stériles et forceps faites une coupe horizontale dans la peau juste en avant du prépuce chez les mâles et de l’os iliaque chez les femelles. Évitez de couper à travers la musculature abdominale. Ensuite, placez votre pouce sous la coupe et saisissez le bord crânial de la coupe. De l’autre main, maintenir les membres postérieurs et la queue, tout en tirant la peau vers la tête. La peau va déchirer loin du corps juste au-dessus des membres postérieurs et peut être tournée à l’envers sur la tête et les pattes avant. Ceci élimine efficacement les contaminants de cheveux qui pourraient interférer avec la récolte d’organes stériles. Ensuite, tremper le corps avec 70 % d’alcool et supprimer la superficielle paire de gants, qui ne sont plus stériles. Jetez aussi tous les instruments qui ont été utilisés sur la peau.

à la récolte de la rate, positionner le corps en décubitus latéral droit. Thrate e devrait être visible à travers le muscle abdominal. Utiliser des ciseaux pour faire une coupe directement sur la rate et retirer délicatement l’organe de la cavité du corps. Couper toutes les pièces jointes entre la rate et l’estomac et du tissu pancréatique, mais éviter de perforer ou de déchirure de l’orgue.

De récolter tous les autres organes abdominaux, placer le corps en décubitus dorsal. Ensuite, soulevez et coupez le muscle abdominal, laissant un ovale ouvrant directement sur la cavité abdominale. Pour récolter le foie, reflètent l’orgue direction caudale de la membrane. Maintenant, utiliser des ciseaux couper soigneusement les membranes entre les deux structures. Ensuite, faites une coupe perpendiculaire à la colonne vertébrale à travers les vaisseaux sanguins. Puis soulevez le foie et refléter vers le diaphragme pour visualiser les pièces jointes sous celui-ci. Il y aura des membranes minces y attacher les petits lobes du foie à l’estomac et l’intestin grêle. Saisir le nœud fibreux dans le centre du foie sur le dessous et soulevez l’orgue pour trouver toutes les pièces jointes. Maintenant l’orgue séparer les tissus sous-jacents. Notez que le foie est fragile et peut être facilement perforé résultant en une libération excessive de sang. Par conséquent, il doit être manipulé avec soin.

Pour récolter les reins, poussez les intestins vers la gauche pour exposer le rein droit ou vers la droite pour exposer le rein gauche. Maintenant utiliser les lames de pinces à saisir sous le rein et à l’aide de ciseaux, couper sous la pince, retirer l’organe du corps.

De récolter les ovaires, déplacer les intestins parotidien de visualiser l’utérus. Suivez les cornes utérines droite et la gauche pour les ovaires. Ce sont de petits organes et chez les animaux plus âgés, ils peuvent être enchâssés dans la graisse. Faites glisser la pince sous l’ovaire à l’isoler de l’organisme et coupez-le exempt de la graisse et la trompe de Fallope.

Chez les mâles, pour enlever les testicules, doucement saisir les coussinets adipeux inguinale et tirer vers l’avant. Cela va tirer les testicules du scrotum. Une fois qu’ils deviennent visibles, coupez les pièces jointes pour le scrotum et le canal déférent pour libérer ces structures de l’organisme.

ensuite, laissez ' s apprendre à récolter des organes thoraciques, tels que le cœur et les poumons. Le cœur et les poumons sont plus faciles à enlever ensemble. Pour ouvrir la cavité thoracique, commencez en plaçant l’animal en décubitus dorsal. Tout d’abord, saisir et soulevez le processus xiphoïde. Puis faire une coupe à travers le muscle abdominal juste caudal aux côtes. Étendre la coupe le long de la courbe inférieure de la cage thoracique, des deux côtés, exposant le diaphragme.

Ensuite, perforer la membrane en faisant un petit coupé dans la cage thoracique latérale au plus point possible de chaque côté. Ensuite, couper la membrane loin des côtes. Maintenant Soulevez les nervures à la xiphoïde pour visualiser les organes thoraciques. Étendre le latéral coupé vers le haut du sternum, des deux côtés pour ouvrir le coffre. Puis placer la pince perpendiculairement à la trachée et fermement la trachée. Maintenant, à l’aide de ciseaux, faire une coupe perpendiculaire juste en avant de la pince. Cela devrait rompre la trachée et l’oesophage. Sans desserrer l’emprise sur la trachée, soulevez-la direction caudale et découper toutes les pièces jointes des poumons à la surface de la colonne vertébrale dans la cage thoracique. Continuez jusqu'à ce que vous êtes capable de soulever le cœur et les poumons gratuitement la cavité thoracique.

Pour enlever seulement le cœur, soulevez l’orgue et découpez soigneusement à travers le péricarde. Ensuite, maintenez l’aorte avec la pince et faire une incision distale à la pince. Puis couper la partie antérieure de la veine cave supérieure, les artères pulmonaires et des veines. Après cela, vous devriez être capable de soulever le cœur libre de la cavité thoracique.

maintenant, que ' s revoir la procédure de la récolte du cerveau à l’aide d’une technique aseptique. Dans le cas où le cerveau est le seul organe à percevoir, les étapes préparer sont les mêmes.

Pour commencer la récolte, saturer le corps avec de l’alcool et enlever la peau du corps comme auparavant, à savoir vers le haut et sur le crâne. Ceci permet à tout être stérile à partir de ce moment. Puis, saturer l’animal à nouveau avec de l’alcool, retirer les gants externes et jeter les instruments utilisés sur la peau. Maintenant, effectuez une coupe à la nuque et elle s’étendent le long de la ligne médiane de la zone cervicale dorsale jusqu'à la pointe du nez.

Maintenant, en utilisant une paire dédiée de ciseaux de cerveau stérile de récolte, faire une coupe au milieu de la colonne vertébrale à la base du crâne. Pour ouvrir la boîte crânienne, placez la pointe des ciseaux dans le trou occipital et couper le long de la ligne médiane. Notez que durant ce cerveau procédure de récolte, une main est considérée comme reflété non stérile qu’il saisit la peau du crâne sous le menton pour stabiliser la tête, tandis que la main stérile est utilisée pour découper le crâne. Après cela, utiliser le côté plat de la lame de ciseaux pour tirer parti de l’os pariétaux du cerveau. Et à l’aide de la spatule, perturber soigneusement les pièces jointes de nerf dans le tronc cérébral et le chiasma optique sous le cerveau. Enfin, faites glisser la pince fermée vers l’avant et casser les pièces jointes à des bulbes olfactifs. Et le cerveau peut ensuite être supprimé sur le crâne, directement dans les médias stériles.

maintenant que nous ' ve a examiné les éléments essentiels de la récolte de tissus stériles, laissez ' s discuter de certaines des nombreuses utilisations de cette procédure dans la recherche biomédicale.

Tige neurales chercheurs utilisent récolte stérile pour extraire le tissu de cerveau de souris néonatales, à cultiver ces cellules in vitro. Cela leur permet d’étudier le rôle des cellules souches neurales dans le développement et la progression du cancer.

Un autre sujet de recherche qui implique la récolte de tissus active est profils métaboliques, qui consiste à étudier la physiologie tissulaire en analysant les différents métabolites dans un échantillon. Dans cet exemple, les scientifiques, à l’aide d’une technique aseptique, biopsies du foie prélevé de type sauvage et souris axéniques et utilisé la spectroscopie de résonance magnétique nucléaire, ou RMN, pour élucider la différence dans le profil métabolique du foie des deux populations animales.

Enfin, les immunologistes exécutent souvent récolte tissu stérile afin d’étudier la propagation de l’infection. Dans cette expérience particulière, les chercheurs ont réalisé par voie intratrachéale injection de bactéries Pseudomonas aeruginosa pour induire une infection pulmonaire chronique. Suite à cela, les animaux ont été euthanasiés et poumons ont été extraites à l’aide d’une technique aseptique pour déterminer la charge bactérienne à 3, 7, 14 et 28 jours après l’infection.

vous ' ve juste regardé JoVE ' s-vidéo sur la récolte de tissus provenant d’animaux de laboratoire à l’aide d’une technique aseptique. Vous devriez maintenant avoir une meilleure idée des étapes que vous devez prendre pour s’assurer que la stérilité est maintenue tout au long de la récolte. Et vous devriez être en mesure d’extraire les organes abdominaux et thoraciques et les cerveaux de ces animaux sans endommager les tissus. Comme toujours, Merci de regarder !

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