418 Views
•
02:19 min
•
September 22, 2023
DOI:
Transcript
Automatically generated
ابدأ بقطع شتلة الذرة القديمة المرغوبة في أنسجة mesocotyl باستخدام سكين صغير أو مقص. تنظيف الشتلات مع فرشاة الرسم. ثم أمسك متجرد الأسلاك مع مواجهة فكيه للمزلق.
ضع المزلق في الفتحة المحددة واضغط على مقابض المتجرد معا. حرك المتجرد بعيدا عن المزلق لتقليم الجزء العلوي من الأوراق. استخدم مسطرة لقياس الطول من طرف البدائية إلى قاعدة المزلق.
لبدء تصوير ورقة البدائية ، أمسك المزلق ثابتا على سطح أملس تحت مجهر ستيريو عند تكبير 0.8x تقريبا. باستخدام شفرة حلاقة أو مشرط ، قم بعمل قطع أولي أعلى قليلا من المنطقة المستهدفة للتخلص من الجزء البعيد من المزلق. ثم احصل على حوالي 0.25 إلى 0.8 ملليمتر من المقاطع الرفيعة عند النقاط المرغوبة على طول البدائية.
بمجرد الانتهاء من ذلك ، قم بتركيب قسم الورقة على شريحة زجاجية نظيفة. ضع بضع قطرات من الماء مباشرة على القسم باستخدام ماصة. ووضع زلة غطاء على القمة.
ضع بضع قطرات أخرى من خلال حواف قسيمة الغطاء إذا لزم الأمر. ضع الشريحة على مرحلة مجهر التألق واضبط الإعدادات لتصور الفلوروفور. باستخدام هذه الطريقة ، تم توحيد أخذ عينات الاستئصال الصدفة عن طريق قياس البدائية قبل التقسيم.
تم اكتشاف اتجاه يظهر أن الشرابة المتلاشية الثانية لها بدائية أوسع وأوردة أكثر من المعتاد ، مما يشير إلى أن الخلل في الطافر بدأ في وقت مبكر من تطور الورقة. مكنت هذه الطريقة أيضا من الفحص المنهجي لأنماط التعبير عن مراسلي البروتين الفلوري للاستجابة الهرمونية في ورقة البدائية.
Read Article
Cite this Article
Robil, J. M., Cortez, C. D. T., Villafuerte, C. M. R., Dela Peña, E. D. C., De Leon, D. O., Rioja, R. J. R., McSteen, P. Imaging Transverse Sections of Maize Leaf Primordia. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e200180, doi:10.3791/200180 (2023).
Copy