Journal
/
/
/
הדמיה של חתכים רוחביים של פרימורדיה של עלי תירס
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Imaging Transverse Sections of Maize Leaf Primordia

הדמיה של חתכים רוחביים של פרימורדיה של עלי תירס

418 Views

02:19 min

September 22, 2023

DOI:

02:19 min
September 22, 2023

12 Views
, , , , , ,

Transcript

Automatically generated

התחילו בחיתוך שתיל התירס המיושן הרצוי ברקמת המזוקוטיל באמצעות סכין קטנה או זוג מספריים. נקו את השתיל בעזרת מברשת. לאחר מכן החזיקו את חשפנית התיל כשלסתותיו פונות למצנח.

מקמו את המצנח לחור שנבחר ולחצו את ידיות החשפנית זו לזו. החליקו את החשפנית מהמצנח כדי לקצץ את החלק העליון של העלים. השתמש בסרגל כדי למדוד את האורך מקצה הפרימורדיום לבסיס המצנח.

כדי להתחיל את הדמיית פרימורדיום העלים, החזק את המצנח יציב על משטח חלק תחת מיקרוסקופ סטריאו בהגדלה של כ-0.8x. בעזרת סכין גילוח או אזמל, בצעו חיתוך ראשוני מעט מעל אזור המטרה כדי להשליך את החלק הדיסטלי של המצנח. לאחר מכן להשיג סביב 0.25 עד 0.8 מילימטר חתכים דקים בנקודות הרצויות לאורך הפרימורדיום.

לאחר שתסיים, הרכיבו את קטע העלה על מגלשת זכוכית נקייה. יש למרוח כמה טיפות מים ישירות על החלק באמצעות פיפטה. והניחו על גביכם פתק כיסוי.

במידת הצורך, יש לטפטף עוד כמה טיפות בשולי החלקת הכיסוי. הניחו את השקופית על במת המיקרוסקופ האפיפלואורסצנטי וכווננו את ההגדרות כדי להמחיש את הפלואורופור. בשיטה זו, דגימת כריתה מקרית תוקננה על ידי מדידת הפרימורדיה לפני החיתוך.

התגלתה מגמה שהראתה כי לציצית הנעלמת הייתה פרימורדיה רחבה יותר ורידים מהרגיל, מה שמעיד על כך שהפגם במוטציה החל בשלב מוקדם בהתפתחות העלה. שיטה זו אפשרה גם בחינה שיטתית של דפוסי הביטוי של מדווחי חלבון פלואורסצנטי בתגובה הורמונלית בפרימורדיית העלים.

Read Article