Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
-Чтобы получить доступ к развивающейся куколки, удалить puparium после pupal эпителия отделился от кутикулы или после куколки этапе P5. Для начала, поместите нетронутыми куколки с его брюшной стороны лицом к вам.
Сохраняя вентрал-ориентацию, используйте типсы для создания небольших разрывов вдоль передней-задней оси пупария и обеспечения непрерывного разрыва образуется в процессе. Будьте осторожны, чтобы не повредить любой из ткани куколки непосредственно под. Затем продолжайте ломать пупариум из зазора наружу, по одной части за раз, и разложить разорванный корпус в процессе.
-Чтобы начать удаление пупариума, прикрепите кусок односторонней ленты на листе бумажного полотенца. Поместите куколку на двустороннюю ленту, вентральную сторону вверх. Найдите пространство между передней стороной пупария и внутренней куколкой. Возьмите и удалите пупариум вокруг этого зазора с помощью типсов, и разоблачите переднюю сторону головы куколки.
Вставьте кончик типса, перемещая его параллельно передней-задней оси. Поднимите кончик типсов, чтобы локально сломать пупариум. Повторите это действие до тех пор, пока поломка не достигнет задней части пупариума. Убедитесь, что разрыв образуется между пупариумом и пупок ног, и разорвать брюшной стороне puparium при минимизации ущерба для внутренней куколки. После нарушения puparium как можно больше, выньте куколку с помощью тонкой кисти. Поместите куколку на листе бумаги ткани, которая была увлажнена с ddH2O и помещены в ddH2O. Немедленно сфотографировать, как подвергаются куколка уязвима и высыхает легко.
