Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
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첫째, 배양에 원하는 유방암 세포라인을 확립한다. 수술 전날, 마우스의 복부를 면도하고 탈모 크림을 사용하여 털을 제거하고 잉게인 젖꼭지를 노출시하십시오. 수술 당일, 세포를 수집하고, 마우스를 마취하고, 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인합니다. 핀셋을 사용하여 젖꼭지 주위에 피부를 꼬집어 고양 된 터널을 만듭니다.
그런 다음 수집 된 세포의 주사기로 피부를 관통합니다. 바늘은 팁이 젖꼭지에 가까워질 때까지 터널을 따라야합니다. 바늘 끝을 젖꼭지 바로 아래 유방 지방 패드로 부드럽게 이동합니다. 핀셋을 제거하여 바늘로 피부 텐트를 형성한 다음 천천히 세포를 주입하십시오.
마지막으로, 주사기를 철회하고 젖꼭지를 둘러싼 둥근 범프를 방해하지 않도록주의하십시오. 주입된 세포 및 후속 종양은 루시파라제를 발현하고 생체 발광 화상 진찰을 사용하여 추적될 수 있습니다. 실시예 프로토콜에서, 우리는 뮤린 직교 유방암의 설립을 보여줄 것입니다. 수술 전날, 수취인 마우스를 수동으로 제지하고 동물 배면을 털로 돌려 네 번째 젖꼭지 주위에 면도합니다.
탈모 크림의 얇은 층으로 모피를 닦아. 증류수를 사용하여 30~60초 후에 크림을 제거했습니다. 그리고 부드러운 종이 타월로 마우스를 건조. 수술 당일, 뮤린 유방암 세포 현탁액을 얼음에 멸균 된 미세 센심분리기 튜브에서 PBS 농도의 밀리리터 당 5 세포로 2 x 10으로 희석한다.
각 주입 전에 마우스 당 50 마이크로 리터의 셀이 장착 된 1 밀리리터 주사기를 로드하십시오. 그리고 각 진정 된 동물에 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인합니다. 동물의 눈에 연고를 바르고 핀셋을 사용하여 첫 번째 마우스의 네 번째 젖꼭지 주위에 피부를 텐트하여 주사기를 위한 터널을 만듭니다.
주사기를 위쪽으로 향하는 척수와 함께 주사기를 잡고 바늘 끝이 젖꼭지에 거의 도달할 때까지 터널을 따라 젖꼭지에서 5~10밀리리터로 피부에 피하로 들어간다. - 핀셋을 사용하여 첫 번째 젖꼭지 주위의 피부를 텐트로 사용하면 주사기가 따라갈 수있는 터널을 만듭니다. 바늘은 트위저 팁 사이에 입력해야하며 조직에 우울대신, 타고있어야합니다. 조심스럽게 베벨이 젖꼭지 아래에있을 때까지 유방 지방 패드에 바늘 팁을 이동합니다.
그리고 암세포의 느린 주입을 허용하기 위해 피부 텐트를 방출한다. - 삽입 시, 조심스럽게 베벨이 젖꼭지 아래에있을 때까지 유방 지방 패드에 바늘 팁을 이동하고, 당신은 올바른 위치에 세포의 전달을 보장하기 위해 저항을 느낀다. 모든 세포가 주입되면 바늘을 옆으로 살짝 돌리고 주사기를 천천히 철회하십시오. 면 봉면을 사용하여 바늘 상처에 압력을 10~20초 동안 적용하여 유체 가시가 없는지 확인합니다.
주입된 젖꼭지는 중앙에 젖꼭지가 있는 투명한 흰색 평면 구로 나타나야 합니다.
