骨质注射到乳腺脂肪垫：在小鼠中建立乳腺癌

首先，在培养中建立所需的乳腺癌细胞系。手术前一天，剃掉老鼠的腹部，用去皮膏去除毛皮，露出腹腔。在手术当天，收集细胞，麻醉小鼠，并确认对脚趾捏缺乏反应。使用钳子，捏紧周围的皮肤，以创建一个提升的隧道。

然后，用收集的细胞的注射器刺穿皮肤。针头应沿着隧道，直到尖端接近。轻轻地将针尖移到乳腺脂肪垫中，就在下面。取出钳子，用针头形成皮肤帐篷，然后慢慢注射细胞。

最后，收回注射器，注意不要打扰周围的圆形凸起。注射的细胞和随后的肿瘤表达红素酶，可以使用生物发光成像进行跟踪。在示例协议中，我们将显示穆林矫原性乳腺癌的建立。在手术前一天，手动约束接受者鼠标，将动物腹部侧翻到毛皮上，在第四个周围剃光。

用一层薄薄的脱毛霜擦去皮毛。使用蒸馏水在 30 到 60 秒后去除奶油。用柔软的纸巾擦干鼠标。手术当天，将乳癌细胞悬浮稀释到每毫升PBS浓度的2×10至第5个细胞，在冰上无菌的微中量管中。

每次注射前，加载一个，一毫升注射器，配备.45乘16针，每只小鼠50微升细胞。并确认对每只镇静动物的脚趾捏缺乏反应。在动物的眼睛上涂上软膏，并用钳子将第一只老鼠的第四个周围的皮肤帐篷起来，为注射器的跟随创造一条隧道。

将注射器按住，斜面朝上，皮下从向下 5 至 10 毫升进入皮肤，跟随隧道，直到针尖几乎到达。- 使用钳子将第一个周围的皮肤帐篷起来，为注射器创建一个通道。针头应该进入钳子尖之间，应该骑起来，而不是压入组织。小心地将针尖移到乳腺脂肪垫中，直到斜面在下。

并释放皮肤帐篷，让癌细胞缓慢注射。- 插入后，小心地将针尖移到乳腺脂肪垫中，直到斜面在下，并且您感到阻力，以确保将细胞输送到正确的位置。当所有细胞都注射后，将针头稍微转向一侧，慢慢收回注射器。使用棉签对针伤施加压力10至20秒，以确保没有液体渗漏。

注射的应显示为透明的白色扁平球体，位于中心