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Drosophila Condicionamento de namoro

 
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Drosophila Condicionamento de namoro: um método para testar o aprendizado e a memória em moscas

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Primeiro, isole os machos de melanogastor Drosophila. e, portanto, não é receptivo ao namoro. O macho exibe comportamentos típicos de namoro, como orientar-se com ela, segui-la ao redor, bater nela com um foreleg, e estender e vibrar sua asa para produzir a canção de namoro. Ele também pode tentar lamber e acasalar.

Para testar a memória do macho, permitir que ele descanse, e depois expô-lo a outra fêmea acasalada. O macho treinado não tentará cortejar esta mosca porque ele mantém a memória da rejeição passada. No protocolo de exemplo, veremos como as moscas são tratadas durante as fases de treinamento e teste de um ensaio de condicionamento de namoro para avaliação de memória de curto e longo prazo.

- Comece anestesiando todos os adultos dos arquivos de acasalamento de quatro dias. Separe os sexos, e transfira fêmeas pré-adolescentes solteiras para cada um dos 12 poços de uma fileira de um bloco habitacional. Em seguida, usando um aspirador e sem anestesia, remova os machos ingênuos de seus poços domésticos e transfira-os para os poços contendo as fêmeas pré-desmatadas.

Para testar o aprendizado ou a memória de curto prazo, realize essa configuração ao amanhecer e deixe o período de treinamento passar por uma hora. Para testar a memória de longo prazo, configure os pares quatro horas antes do amanhecer subjetivo e deixe o treinamento continuar por oito horas.

- Para que o aprendizado e a memória sejam estabelecidos, é importante que os machos não se co copulam, por isso verifique periodicamente os pares durante o período de treinamento, para ter certeza de que os machos estão sendo rejeitados.

Quando o período de treinamento acabar, remova suavemente os machos dos poços usando um aspirador, não anestesia de dióxido de carbono. Carregue os machos em um novo bloco habitacional. Para o experimento de aprendizagem, teste imediatamente os machos após o treinamento, sem um período de descanso. Para o experimento de memória de curto prazo, permita aos machos uma hora de descanso antes de iniciar a fase de teste. Para o experimento de memória de longo prazo, descanse os machos até o amanhecer subjetivo seguinte.

Para se preparar para a fase de testes do experimento, anestesiar fêmeas pré-adolescentes e transferi-las para um novo alimento normal vil. Deixe pelo menos uma hora para as moscas se recuperarem da anestesia. Em seguida, prepare a configuração de teste. Certifique-se de ter os gravadores de vídeo prontos para gravar atividade nas arenas de namoro.

Para iniciar o teste, use aspiração suave para transferir um macho de teste do bloco de alojamento para a arena de namoro com os divisores fechados. Mova os buracos de entrada entre as arenas até que todas as 18 arenas estejam carregadas com homens solteiros. Em seguida, usando a mesma técnica, transfira fêmeas pré-graduadas individuais para cada uma das 18 arenas, mas para o lado oposto dos divisores. Agora, vire cuidadosamente a arena de namoro, e coloque-a sob a câmera de vídeo com as aberturas de poço em direção à superfície do banco branco. Quando o experimento acabar, remova as moscas das arenas usando um vácuo e ventile as câmaras de namoro por pelo menos 10 minutos antes de serem reutilizadas.

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