Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

A subscription to JoVE is required to view this content.

德罗索菲拉 挖洞和隧道分析:评估飞拉维组织缺氧的方法

 
Click here for the English version

德罗索菲拉 挖洞和隧道分析:评估飞拉维组织缺氧的方法

Article

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

- 建立胚胎收集笼,使用葡萄阿加补充新鲜酵母,并将放在笼子里含有适当的基因型雄性雌性果蝇酵母葡萄气味吸引人促进雌性产卵允许计时期间然后取出成人孵育胚胎24小时,以获得第一个星内幼虫。 然后轻轻地几个单独的幼虫葡萄转移到一个只有阿加的测试,其中阿加中心有一个,并充满了酵母糊。

必须喂养才能增加体重才能发育, 所以他们食物来源,酵母糊中挖洞 随着它们的发展,幼虫进入一个游荡阶段,并食物隧道,寻找幼崽的部位评估缺氧,请检查基底中的隧道模式幼虫形态缺乏不足的隧道缺氧征兆 示例协议我们将看到如何设置挖洞隧道检测。

-设置控制实验遗传十字架,如文本协议开始定时收集鸡蛋之前苍蝇黑暗至少 对于定时鸡蛋收集,成人转移到新的葡萄装饰的新鲜抹布早些时候允许成人盘子产卵个小时。小时后,成人转移到新鲜葡萄盘。

接下来,25摄氏度温度下连夜孵化4小时的采集第二天下午,大部分幼虫孵化出来。计划每个实验至少有50个。

对于次运行检测,每个实验至少准备检测通过加热700毫升除离子水中加入16阿加准备17.5毫升尼帕肯95%乙醇。 加热阿加溶液直到它几乎完全溶解。 然后尼帕根溶液添加到阿加溶液中,加热阿加完全溶解。 短暂冷却 agar 溶液然后 15 毫升 agar 溶液加载 10 厘米板。一旦胶,盘子上盖上盖子它们温下干燥几个小时过夜。

固化的阿加必须坚定触摸抵抗崩溃,碎片它。一旦阿加已经固化,使用1.5厘米的软木使每个盘子一个中心然后新鲜酵母整齐地填充

幼虫转移到检测制作个简单的工具。曲线弯曲塑料微铲尖端,将尖端酵母,使其粘合幼虫中。现在单独拿起第一星内幼虫并把它们放在靠近食物土堆阿加板块对于每个实验组,准备至少,每个10个幼虫。

为了确保检测复制品之间的可重复性在每个检测放置10幼虫至关重要一定要仔细检查检测以确定每次交付带有微肩幼虫,只有幼虫被转移

好盘子标记它, 盖上它, 然后把它放在黑暗 盖子温下。 每天检查每个盘子直到所有的幼虫死亡幼崽死亡。 以下是天到天的野生菌株的例子幼虫食物没有隧道发生。 隧道从开始第五第八达到最大值,因为幼虫不再在隧道中游荡幼崽

小心地弯曲的调戏幼崽转移到葡萄盘上如果需要的话,数数多少注意幼崽形成,并评估幼崽异常情况。

Tags

空值,问题,
Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter