Fly Climbing Assay: Eine Methode, um allgemeine Fortbewegung in Drosophila melanogaster zu testen

-Zuerst erhalten Sie eine festgelegte Anzahl von erwachsenen Drosophila. Die Prüfkammer für den Klettertest besteht aus zwei Fläschchen zusammengeklebt.

Ohne Kohlendioxidanästhesie, die das Kletterverhalten beeinträchtigen kann, übertragen Sie eine bestimmte Anzahl von Fliegen in die Prüfkammer. Lassen Sie die Fliegen für eine vorbestimmte Zeit erholen. Tippen Sie mit der markierten Seite der Kammer nach unten fest auf die Kammer auf einem Mauspad auf einer festen Oberfläche. Dies zwingt die Fliegen auf den Boden der Kammer. Der Klettertest nutzt die natürliche Neigung drosophilas, nach oben zu klettern.

Während der Studie sollten die Fliegen nicht direkter Sonneneinstrahlung ausgesetzt werden, da die Fliegen möglicherweise Phototaxis Verhalten oder Bewegung als Reaktion auf Lichtreiz zeigen. Erfassen Sie die Anzahl der Fliegen, die die Linie erreichen oder passieren. Dann erhalten Sie die prozentuale Passrate, indem Sie diese Zahl durch die Gesamtzahl der getesteten Fliegen dividieren. Lassen Sie die Fliegen sich erholen, bevor sie die Studie wiederholen.

-Zu beginne homozygote Fliegen aus Linien, die zur ENU-Mutagenisierten Sammlung von Drosophila-Mutanten gehören, die dem zweiten Chromosom zugeordnet sind. Drehen Sie die Fliegen im Alter von 10 bis 12 Tagen in eine Testkammer ohne Anästhesie eine Linie nach der anderen und lassen Sie sie sich für fünf Minuten erholen.

Mit der fünf Zentimeter langen Linie, die seitlich nach unten markiert ist, tippen Sie dreimal auf ein Mauspad, das auf einer festen Oberfläche platziert ist, so dass alle Fliegen den Test am Boden beginnen. Beobachten Sie die Flugfortbewegung über einen Zeitraum von 10 Sekunden. Zeichnen Sie die Anzahl der Fliegen auf, die die Fünf-Zentimeter-Linie innerhalb dieser Zeit erreichen oder passieren, sowie die Gesamtzahl der getesteten Fliegen. Warten Sie eine Minute, bevor Sie einen zweiten Versuch starten.