ショウジョウバエ 男性のアクセサリー腺解剖:二次細胞を分離する方法

- 解剖顕微鏡と血清補充培地の下で、各ハエから生殖管を鉗子で取り除く。まず、生殖管に伴った可能性のある消化管の一部を取り除き、補助腺と射精管を分離し、精巣、射精球、および末端体を取り除き、PBSで組織を1~2分間洗浄して血清を取り除き、脱液する。

腺の中の細胞を解離液に露出するには、各腺の中心を鉗子で保持し、鋭利な鉗子で腺をスライスします。腺の近位部分と射精管を取り除き、交配に関与するタンパク質の分泌を担当する稀な二次細胞集団を含む腺の遠位端を残します。

-手順を開始する前に、カットと炎のラウンド、腺を処理するための広い200マイクロリットルの先端を、炎の近くの複数の1000マイクロリットル先端の先端を1秒未満で渡して開口部を狭めます。

精巣や射精球を含む他のすべての組織からアクセサリー腺ペアをクリアし、そして、常温で血清補充培地を含むガラス板にアクセサリー腺を移し、20組の補助腺が採取されたら、室温でPBSの皿で腺を1〜2分間洗浄します。

2番目の鉗子を使用して、鋭い先端で組織を切断し、副細胞を含む腺の部分から補助腺と射精管の近位領域を分離します。