Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Avlägsna först delar av mag-tarmkanalen som kan ha åtföljt reproduktionskanalen under ett dissekeringsmikroskop och i serum kompletterat media.
För att utsätta cellerna inuti körtlarna för dissociationslösningen, håll mitten av varje körtel med tång och skär genom körteln med ett par skarpa tångar. Ta bort den proximala delen av körteln och den ejakulatoriska kanalen för att lämna efter sig den distala änden av körtlarna som innehåller den sällsynta sekundära cellpopulationen som är ansvarig för att utsöndra proteiner som är involverade i parning. Slutligen överföra tillbehörskörtelspetsarna till ett mikrocentrifugrör som förberedelse för matsmältningen.
- Innan proceduren påbörjas, kapa och flamma runt, breda 200 mikroliterspetsar för hantering av körtlarna, och passera spetsöppningen av flera 1000-mikroliterspetsar nära en låga i mindre än en sekund för att begränsa öppningarna. Sedan sorterar du de modifierade spetsarna från smalare till bredare baserat på deras aspirationshastighet.
Rensa tillbehörsparet från alla andra vävnader, inklusive testiklarna och ejakulatoriska glödlampan. och överför tillbehörskörtlarna till en glasplatta som innehåller serumtillägg medium vid rumstemperatur. När 20 par tillbehörskörtlar har samlats in, tvätta körtlarna i en skål pbs i en till två minuter vid rumstemperatur.
Använd ett andra par tångar och skär vävnaden med den skarpa spetsen för att separera tillbehörskörtelns proximala region och den ejakulatoriska kanalen från den del av körteln som innehåller sekundära celler.
