Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- For å isolere eggstokkene fra levende Drosophila fluer, begynn med å flytte en bedøvet kvinne til en av tre disseksjonsbrønner fylt med forvarmet insekt disseksjonsmedium. Mediet vil bidra til å opprettholde vevsintegritet og levedyktighet.
Under et disseksjonsmikroskop, separer magen fra thoraxen. Flytt deretter magen inn i en ny brønn. For å isolere eggstokkene, hold magen i bakre ende og skrap forsiktig ut reproduktive organer. Til slutt, overfør eggstokkene til en frisk brønn. Etter dette trinnet kan du enten bruke hele eggstokken eller ytterligere dissekere den i komponentstrukturene.
Hver Drosophila eggstokk består av flere eggarioler, bestående av en kjede av eggkamre med økende modenhet. For å frigjøre eggariolene, fest eggstokken i den ugjennomsiktige bakre enden og ert forsiktig den beskyttende hylsen fra rundt eggstokken til eggstokkene er riktig skilt.
I eksempelprotokollen vil vi vise disseksjonen av Drosophila eggstokkene for deres bruk i levende og fast vevsmikroskopi.
- Etter å ha sortert ut fem bedøvede kvinnelige fluer i henhold til tekstprotokollen, under disseksjonsmikroskopet, bruk to par tang for å kutte thoraxen fra magen. Deretter må du forsiktig overføre magen til den andre brønnen på parabolen. Bruk ett par tang til å holde magen i den bakre enden, bruk det andre paret tang for å sakte skyve eggstokkene ut.
Bruk deretter tangene til å holde en individuell eggstokk ved den ugjennomsiktige bakre enden og flytt den forsiktig til den tredje brønnen på parabolen for erting eller festing. Forsiktig ert beskyttelseshylsen fra rundt eggstokkene ved å bruke et par tang for å holde den bakre enden og lett feie en ertende nål fra bakre til fremre ende.
